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下调脐静脉内皮细胞小窝蛋白1表达对RPMI8226细胞硼替佐米敏感性的影响: 2013年; 目的探讨下调脐静脉内皮细胞（HUVEC）小窝蛋白1（Cav．1）表达对多发性骨髓瘤细胞硼替佐米敏感性的影响。方法构建靶向Cav-1基因的shRNA表达载体及阴性对照shRNA表达载体，转染HUVEC细胞株；以多发性骨髓瘤细胞系RPMl8226为对象，用MTT法检测不同浓度硼替佐米单独或联合50nmol／L地塞米松对单独培养及与HUVEC（转染干扰质粒或对照质粒）间接共培养的RPMl8226细胞增殖的抑制作用；用Western blot法检测Cav．1表达水平；用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡率及活性氧（P．OS）水平变化。结果Cav．1shRNA．1转染的HuVEc（HuVEc。low）Cav-1蛋白表达水平与转染阴性对照载体组相比显著降低，其Cav-1蛋白相对表达水平为0．2199±0．0288对1．3195±0．2393（P〈0．01）；RPMl8226细胞单独培养及与HUVEC、HUVEC共培养，硼替佐米作用的IC50值分别为20、50、65nmol／L。HUVEC、HUVEC可使RPMl8226细胞周期阻滞，RPMl8226细胞单独培养及与HUVEC、HUVEC共培养后RPMl8226细胞G0／G1期比例分别为28．5％、30．4％和36．2％；HUVEC保护RPMl8226细胞免于凋亡，20nmol／L硼替佐米作用于单独培养及与HUVEC、HUVEC共培养的RPMl8226细胞24h后，其细胞凋亡和（或）死亡率分别为66．8％、10．7％和8．6％；RPMl8226细胞可诱导HUVEC的氧化应激，共培养前后RPMl8226细胞ROS水平由15．0％上升至35．2％，HUVEC的ROS水平由80．4％上升至91．0％，HUVEC ROS水平由84．6％上升至96．8％。结论下调HUVECCav一1表达可促进共培养的RPMl8226细胞增殖，抑制细胞凋亡，使其阻滞在静息期，并降低RPMl8226对硼替佐米的敏感性。; 陈露居颂光王子妍李军袁育青傅晋翔; 关键词：人脐静脉内皮细胞多发性骨髓瘤硼替佐米

体外诱导自噬对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响被引量：1: 2012年; 目的探讨诱导自噬对多发性骨髓瘤（MM）细胞株增殖的影响。方法在无血清培养条件下诱导MM细胞株U266细胞自噬并分别加入雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤（3-MA），观察其细胞增殖，以正常培养条件培养U266细胞、淋巴瘤细胞株Jurkat及无血清培养Jurkat为对照组。采用CCK8法检测细胞的增殖；用流式细胞术检测细胞凋亡；单丹（磺）酰戊二胺（MDC）法检测细胞自噬泡数量；RT—PCR法检测自噬基因mtor、Beclinl表达；Westernblot方法分析自噬标志蛋白-微管相关蛋白轻链3Ⅰ／Ⅱ（LC3I／II）及溶酶体相关膜蛋白1（LAMP1）含量的变化。结果正常培养条件下U266细胞有基础水平的自噬，无血清培养可诱导U266细胞上调自噬水平；雷帕霉素促进无血清培养条件下U266细胞自噬并刺激其增殖能力，至培养96h无血清培养及雷帕霉素处理U266细胞内自噬水平下降；3-MA具有上调U266细胞自噬和促进增殖作用，但仅维持24h；正常培养条件下雷帕霉素及3-MA可显著抑制U266细胞增殖；无血清培养24h后细胞凋亡率[（17．90±1．46）％]高于正常培养细胞[（1．33±0．09）％]（P〈0．01）；加入雷帕霉素及3-MA可使血清饥饿诱导的细胞凋亡率分别降至（6．23±0．12）％和（6．97±0．03）％（P〈0．01）；培养至72h，各处理组细胞凋亡率趋于一致[（30．37±0．27）％、（30．13±1．93）％和（28．57±2．83）％]（P〉0．05）；去除雷帕霉素及3-MA后U266细胞凋亡率减低至18．7％和12．6％。结论MM细胞内存在高于淋巴瘤Jurkat细胞株基础水平的自噬；在常规培养条件下雷帕霉素及3-MA均可下调MM细胞增殖水平；血清饥饿条件下U266细胞可通过上调自噬水平维持生存和增殖；雷帕霉素诱导血清饥饿条件下U266细胞自噬，但是具有白限性；3-MA对U266细胞自噬具有双重作用。; 高灵素张晓慧张宏张蕴玉陈露傅晋翔; 关键词：多发性骨髓瘤雷帕霉素自噬

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陈露

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