陈志雄
- 作品数：12 被引量：18H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Hedgehog信号通路对人胃癌SGC-7901细胞体外血管形成的调控被引量：4
- 2013年
- 目的探讨Hedgehog信号通路调控人胃癌SGC-7901细胞体外血管形成的可能分子机制。方法常规培养SGC-7901细胞和人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),将SGC-7901细胞分为对照组A(未给药)、实验组B(环靶明终浓度5μmol/L)及实验组C(环靶明终浓度10μmol/L),培养48 h后,免疫荧光检测各组胶质瘤相关癌基因1(Glioma-associated oncogene homolog,Gli1)和血小板源性生长因子-D(Platelet-derivedgrowth factor D,PDGF-D)在胃癌SGC-7901细胞中的表达;通过小管形成试验和血管拟态试验检测细胞处理前后血管形成能力的变化;RT-PCR和Western blot检测细胞处理前后Gli1、PDGF-D的mRNA和蛋白表达变化,并对二者mRNA和蛋白表达水平进行相关性分析。结果 Gli1和PDGF-D在各组SGC-7901细胞中均有表达;实验组SGC-7901细胞的体外血管形成能力较对照组下降,且呈剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组Gli1和PDGF-D的mRNA和蛋白表达较对照组均受到显著抑制,差异有统计学意义(P<0.05),且二者mRNA和蛋白表达水平呈正相关(r=0.829,r=0.786,P<0.05)。结论 Hedgehog信号通路可能通过Gli1来调控PDGF-D的表达,进而促进肿瘤血管的形成。
- 寇耀安昌勇陈志雄张刘平欧阳小波魏正强
- 关键词：HEDGEHOG胃癌血管形成血管生成拟态
- CTP-NPRL2融合蛋白对肾癌原代细胞迁移侵袭能力的抑制及机制研究被引量：1
- 2016年
- 目的将原核表达的氮酶调节因子2(nitrogen permease regulator 2-like,NPRL2)融合蛋白通过胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)转入肾癌原代细胞内,观察其对肾癌原代细胞迁移侵袭的影响,并分析与肾癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法胶原酶消化法培养肾癌原代细胞;构建原核表达质粒pET15b-CTP-NPRL2和pET15b-NPRL2,表达融合蛋白CTP-NPRL2和NPRL2,并通过Western blot鉴定目的蛋白的表达。将培养成功的原代细胞分为BLANK组、NPRL2组和CTP-NPRL2组。免疫荧光检测目的蛋白的细胞定位;Transwell迁移侵袭实验检测导入NPRL2蛋白后,对肾癌细胞迁移侵袭能力的影响;Real-time PCR检测Raptor、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤粘蛋白(Fibronectin)m RNA表达水平;Western blot检测Raptor、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平。结果成功培养出肾癌原代细胞并通过鉴定;测序结果及Western blot检测结果显示质粒构建成功并表达出目的蛋白;免疫荧光检测结果显示CTP-NPRL2融合蛋白可以穿过胞膜并定位于胞浆;迁移和侵袭实验显示CTP-NPRL2组肾癌细胞迁移侵袭能力明显下降(P<0.05);Real-time PCR和Western blot检测结果显示CTP-NPRL2组Raptor、Vimentin与Fibronectin的m RNA、蛋白表达水平与NPRL2组和BLANK组相比明显降低(P<0.05),而E-cadherin的mRNA、蛋白表达水平与NPRL2组与BLANK组相比明显升高(P<0.05)。结论 NPRL2可能通过与Raptor相互作用影响mTORC1的活性,进而调节EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、Fibronectin的表达量,影响肾癌细胞的迁移侵袭能力。
- 史晓博叶茂曾洋陈明龙陈志雄熊晶吕不凡唐伟
- 关键词：迁移上皮间质转化
- 蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的改善作用被引量：2
- 2012年
- 目的研究不同剂量蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的预防和治疗作用。方法采用小鼠结肠腺癌C26细胞接种BALB/c小鼠诱导的肿瘤恶病质模型。分为对照组(HC),肿瘤恶病质组(CC),MG132预防的低浓度组(PL),中浓度组(PM)和高浓度组(PH),MG132治疗的低浓度组(TL)、中浓度组(TM)和高浓度组(TH)。每天监测小鼠体质量、饮食量和肿瘤体积,预防组和治疗组分别于接种后第5、12天开始每天腹腔注射MG132(0.01、0.1、0.5 mg/kg)。第19天各组处死8只小鼠,称量肿瘤、左侧腓肠肌和附睾脂肪组织质量,检测血清葡萄糖(Glu)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平。CC、PM和TM组剩余8只小鼠继续原治疗至其死亡,观察生存时间。结果与CC组相比,MG132预防和治疗组小鼠自发活动量、去瘤体质量、腓肠肌纤维横切面积、腓肠肌和附睾脂肪质量增加,Glu和ALB水平升高,TG水平降低,生存时间延长,均以PM和TM组效果最好,且两组间以上指标差异均有统计学意义(P<0.05);PH组最显著地抑制了肿瘤生长(P<0.05)。结论 MG132的中浓度剂量能较好地改善恶病质,延长生存时间,且预防效果更明显。
- 张刘平陈志雄安昌勇寇耀唐华汤为学
- 关键词：蛋白酶体抑制剂MG132肿瘤恶病质
- Gli1和PDGF-D在结直肠癌中的表达及其临床意义被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨Gli1和PDGF-D在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学S-P法、Western blot法分别定性、定量检测54例结直肠癌组织及其对应30例癌旁正常组织中Gli1和PDGF-D蛋白表达情况并结合临床病例资料进行分析。结果:免疫组织化学结果显示Gli1和PDGF-D在结直肠癌中的阳性表达率分别为(72.22%、74.07%),与正常组织的阳性表达率(6.67%、33.33%)相比显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测Gli1和PDGF-D在癌组织中相对表达量分别为0.731±0.238和0.817±0.288,与正常组织0.196±0.041和0.236±0.060相比,两者表达也显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05);Gli1和PDGF-D的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),PDGF-D还与肿瘤分期有关(P<0.05);两者表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、侵袭深度均无明显相关性(P>0.05);Gli1和PDGF-D在结直肠癌中的表达呈正相关(P<0.05)。结论:Gli1和PDGF-D在结直肠癌中异常高表达,可能共同参与并促进结直肠癌的恶性进程。
- 寇耀魏正强杨勇张刘平陈志雄汤为学
- 关键词：GLI1结直肠癌免疫组织化学WESTERNBLOT
- 蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的作用及其分子机制被引量：3
- 2013年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的作用及其可能的分子机制。方法经小鼠腋窝皮下注射结肠腺癌C26细胞,建立肿瘤恶病质模型,并设正常对照组(HC组)。将模型小鼠分为肿瘤恶病质组(CC组)和MG132治疗组(MG组),待小鼠进入恶病质状态后,CC组小鼠经腹腔注射0.1 ml生理盐水,MG组小鼠经腹腔注射0.1 mg/kg的MG132,7 d后处死小鼠,称量小鼠肿瘤、左侧腓肠肌和附睾脂肪的重量,测量腓肠肌纤维横切面积,ELISA法检测血清中炎性因子TNF-α和IL-6的水平,RT-PCR及Western blot法检测腓肠肌中IKBa、P65、MuRF1和MAFbx基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平。结果与CC组相比,MG组小鼠腓肠肌和附睾脂肪组织的重量分别增加了31.6%和39.5%(P<0.05),腓肠肌纤维横切面积增加了36.1%(P<0.05);血清中TNF-α和IL-6的水平分别降低了20.9%和42.0%(P<0.05);腓肠肌组织IKBa基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平分别升高了132.7%和56.5%(P<0.05),MuRF1基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平分别降低了70.1%和42.6%(P<0.05),MAFbx基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平分别降低了76.8%和47.3%(P<0.05),P65基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平分别降低了59.1%和53.1%(P<0.05)。结论 MG132改善肿瘤恶病质的分子机制可能与抑制NF-κB途径及MuRF1和MAFbx的表达、抑制炎症反应及肿瘤生长有关。
- 张刘平唐华寇耀郑曰勇陈志雄安昌勇
- 关键词：蛋白酶体抑制剂MG132肿瘤恶病质NF-ΚB途径
- 胃转流术降低2型糖尿病大鼠肝脏FoxO1因子的表达被引量：1
- 2012年
- 目的研究胃转流术对2型糖尿病大鼠肝脏FoxO1表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为糖尿病手术组(A组)、假手术组(B组)、正常对照组(C组)、糖尿病对照组(D组),每组10只。C、D组按A、B组术前和术后4、8、16、24周检测空腹血糖、空腹和餐后血清胰岛素、胰高血糖素样肽(GLP-1)。24周后处死各组大鼠,免疫组化和Western blot检测各组肝脏中FoxO1的表达。结果 A组术后4周空腹血糖由术前的(20.2±2.1)mmol/L降至(10.5±2.5)mmol/L,术后24周空腹血糖为(7.7±1.1)mmol/L,术后4周空腹胰岛素由术前(2.87±0.08)mU/L增至(2.91±0.08)mU/L,术后24周空腹胰岛素为(3.00±0.06)mU/L;术后4周空腹血清GLP-1由术前(8.7±0.9)pmol/L升至(13.2±1.0)pmol/L,术后24周为(23.5±0.2)pmol/L。A组术后24周肝脏FoxO1表达量为18.4±1.2,B组为37.6±0.5,C、D两组分别为9.2±1.0、35.8±0.4,A组术后FoxO1的表达量明显低于B、D组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组血清GLP-1浓度与肝脏FoxO1的表达量成负相关(r=-0.864,P<0.05)。结论胃转流术可显著降低2型糖尿病大鼠肝脏FoxO1的表达,降低血糖。
- 陈志雄张军张刘平寇耀蒙长远张能汪志红
- 关键词：胃转流术2型糖尿病FOXO1
- 结合实习生的期望探讨胃肠外科学的临床教学被引量：1
- 2011年
- 临床实习是医学生从医学理论到医学实践的重要过渡，结合临床实习生对带教教师、科室硬件、医疗流程的期望和多年临床教学经验，探讨能满足实习生期望和要求的教学方法，并对新教学方法进行评估。结果显示，新教学方法提高了医学生的临床基本技能和胃肠外科科室的教学水平。
- 张军陈志雄王致天孔令泉
- 关键词：实习生外科学临床教学
- NPRL2调控去势抵抗型前列腺癌对奥拉帕尼的敏感性被引量：1
- 2019年
- 目的探讨NPRL2在改善去势抵抗型前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)对Olaparib敏感性的作用。方法收集良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)、普通前列腺癌(prostate cancer,PCa)和CRPC患者手术标本进行NPRL2的免疫组化染色,观察NPRL2在上述组织中的表达差异。Western blot检测正常前列腺上皮细胞RWPE-1、前列腺癌细胞LNCaP和耐恩杂鲁胺的去势抵抗型前列腺癌细胞LNPER中NPRL2蛋白的表达情况。通过慢病毒转染到CRPC细胞建立NPRL2的过表达和干扰,实时定量荧光PCR(qPCR)和Western blot验证NPRL2过表达和干扰效率,蛋白免疫印迹检测ATM蛋白表达。CCK-8法检测细胞增殖和细胞毒性,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室侵袭和迁移实验检测细胞侵袭转移。结果免疫组化结果显示NPRL2在CRPC组织中呈现高表达。Western blot结果显示NPRL2在RWPE-1细胞中低表达,在LNCaP和LNPER细胞中高表达,并成功构建过表达和干扰NPRL2的稳定株,q PCR及Western blot结果显示慢病毒转染能明显增高和降低NPRL2的mRNA和蛋白水平(P <0. 01)。CCK-8、流式细胞术和Transwell实验结果显示,与阴性对照比较,沉默NPRL2联合Olaparib能明显抑制细胞生长、阻止细胞侵袭转移和促进细胞凋亡(P <0. 01)。NPRL2与ATM表达呈正相关,NPRL2过表达联合Olaparib显著增加ATM表达。结论沉默NPRL2可增加CRPC细胞对Olaparib的敏感性。
- 陈欣唐伟陈志雄郑斌熊涛
- 关键词：敏感性
- Roux-en-Y胃转流术对2型糖尿病大鼠肝脏AQP9的影响
- 2014年
- 目的研究Roux-en-Y胃转流术(Roux-en-Y gastric bypass,RYGB)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2MD)大鼠肝脏水通道蛋白-9(aquaporin-9,AQP9)表达的影响,初步探讨RYGB改善T2MD的机制。方法 SD大鼠50只,按随机数字表法选取40只建立T2MD模型,按干预方式分为糖尿病组(B组,n=10)、糖尿病假手术组(C组,n=10)、糖尿病手术组(D组,n=10),另10只大鼠作为正常对照组(A组)。检测各组大鼠术前和术后5、10、15、20 d的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血清胰岛素及胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)水平。于术后20 d处死各组大鼠,分别用免疫荧光染色和Western blot检测肝脏组织AQP9的表达情况。结果 D组大鼠术后5 d空腹血糖由术前(23.4±1.6)mmol/L降至(8.7±0.8)mmol/L,术后20 d空腹血糖为(7.8±0.8)mmol/L;术后空腹胰岛素较术前无显著变化(P>0.05);术后5 d空腹血清GLP-1由术前(7.7±0.3)pmol/L升至(16.8±0.9)pmol/L,术后20 d为(20.3±0.7)pmol/L;术后20 d,D组大鼠肝脏组织中AQP9的相对表达量(0.21±0.02)明显低于B、C组[分别为(0.54±0.11)、(0.58±0.09),P<0.05]。结论 RYGB可显著降低T2MD大鼠肝脏中AQP9的表达,降低空腹血糖。
- 蒙长远陈志雄官文飞母松骆赞汪志红张军
- 关键词：胃转流术2型糖尿病水通道蛋白-9
- 腹腔镜下Roux-en-Y胃转流术治疗非病态肥胖2型糖尿病患者疗效分析
- 汪志红陈满李启富张军陈书梅刘智平姚晓燕陈志雄
