贺彬琪
- 作品数:12 被引量:30H指数:3
- 供职机构:南华大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金:湖南省卫生厅科研基金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
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- 甲醛诱导内皮细胞ADMA代谢紊乱及其机制
- 2007年
- 目的观察甲醛对内皮细胞不对称性二甲基精氨酸(ADMA)代谢的影响,分别从氧化损伤及DNA-蛋白质交联两个方面分析甲醛影响ADMA代谢的特征,研究甲醛对内皮细胞损伤的可能机制。方法利用甲醛与人脐静脉内皮细胞共培养建立细胞实验模型,采用DMEM(低糖)培养基培养人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-12),取生长良好的3-6代细胞进行实验。分为实验组(分别加入终浓度为6.25、12.5、25、50、100、200和400μmol/L的甲醛)和对照组(加入等体积的PBS溶液),采用丙酮酸二硝基苯腙比色法、二硫代二硝基苯甲酸比色法、黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法、化学比色法、高效液相色谱法、KCL-SDS沉淀法、SigmaPlot8.0作图。结果(1)甲醛对内皮细胞的损伤,在本研究所用的剂量范围内,表现出2个特点:6.25-25.00μmol/L甲醛组使细胞上清液LDH漏出下降,50.00-400.00μmol/L甲醛组使细胞上清液LDH漏出升高,与对照组相比差异均有统计学意义(P〈0.05);(2)甲醛诱导氧化损伤,低剂量(〈12.50μmol/L)甲醛对细胞内GSH含量和SOD活力的影响与对照组相比差异无统计学意义(P〉0.05);高剂量(〉12.50μmol/L)甲醛能明显降低细胞内GSH含量和SOD活力,与对照组相比差异具有统计学意义(P〈0.05);细胞上清液MDA的含量随着甲醛浓度的增加而升高,与对照组相相比差异有统计学意义(P〈0.05);(3)甲醛对ADMA/eNOS的影响,甲醛呈浓度依赖性的诱导细胞上清液ADMA产生,并抑制细胞内DDAHⅡ活性,与对照组相比差异均有统计学意义(P〈0.05)。低剂量(〈12.50μmol/L)甲醛显著提升细胞内eNOS活性,与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05);高剂量(〉12.50μmol/L)甲醛呈浓度依赖性显著降低细胞内eNOS活性(P〈0.05)。(4)甲醛诱导DNA-蛋白质交联,6.25-12.50μmol/L甲醛组诱导细胞内DPC交联率与对照组相比差异无统
- 贺彬琪让蔚清
- 关键词:内皮细胞乳酸脱氢酶一氧化氮合酶DNA-蛋白质交联
- 甲醛对植入后小鼠胚胎发育毒性的时间-效应关系被引量:9
- 2007年
- 目的:探讨甲醛对植入后小鼠胚胎发育毒性及时间-效应关系。方法:应用体外全胚胎培养模型,观察终浓度为81μmol.L-1的甲醛与昆明种小鼠全胚胎共培养不同时间(分别为0,16,26,48 h)对胚胎生长发育的影响。结果:甲醛对小鼠胚胎的器官形成早期具有明显的影响,呈现明显的时间-效应关系。甲醛暴露16 h则能引起胚胎发育迟缓。当甲醛暴露时间为26和48 h时,胚胎生长发育和形态分化等各项指标与对照组(0 h)比较均呈现出显著差异(P<0.05,P<0.01);胚胎畸形发生率也显著升高,主要表现为神经管闭合不全、体位翻转不全、脑、心脏、腮弓发育异常及视觉系统、前肢芽、后肢芽、体节等畸形。结论:甲醛对小鼠胚胎生长发育和器官形态分化均有明显的抑制作用,表现出明显的时间-效应关系。
- 曹智丽李友贺彬琪李瑛王穆吴成秋陈锋让蔚清
- 关键词:甲醛发育毒性
- 较低剂量甲醛诱导人脐静脉内皮细胞损伤的时相特征及机制被引量:2
- 2007年
- 目的观察较低剂量甲醛(formaldehyde,FA,浓度为40μmol/L)诱导人脐静脉内皮细胞损伤时相特征及一氧化氮(NO)含量变化的时相规律,分析甲醛在诱导内皮细胞损伤中的作用机制。方法将人脐静脉内皮细胞(HU-VEC-12株)与甲醛浓度为40μmol/L的DMEM培养基孵育。分别处理一定时间后(0,4,12,24,48,72h)H-E染色-光学显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定细胞的活性;丙酮酸二硝基苯腙比色-分光光度法检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)浓度;硝酸还原酶法测定培养液中NO浓度;生化分析法测定内皮细胞一氧化氮合酶活性;免疫细胞化学法测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(i NOS)的蛋白表达;RT-PCR法测定eNOS和i NOS的mRNA表达。结果较低浓度甲醛呈时间依赖性地促进细胞LDH漏出,以及内皮细胞上清液MDA和NO的产生;降低eNOS的活性,抑制eNOS在蛋白和基因水平的表达;增加i NOS活性,促进i N-OS在蛋白和基因水平的表达。结论甲醛诱导HUVEC-12细胞损伤,机制可能与其抑制eNOS的活性及表达,诱导i NOS的活性及表达,增加病理性NO产生,从而导致内皮细胞损伤。
- 尹蔚兰让欧艳李恩华邹丽君贺彬琪王穆李良让蔚清
- 关键词:甲醛一氧化氮内皮细胞诱生型一氧化氮合酶
- 酒精联合高脂饮食对大鼠血脂与脂质过氧化的影响
- 2005年
- 目的 研究不同浓度的白酒和高脂对大鼠的损伤作用压VitE的保护作用。方法 用灌胃白酒及喂饲高脂饮食的方法,观察脏器系数的改变和血清中MDA、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)含量变化。结果 肝脏的脏器系数在高荆量酒精、高脂组及高脂联合中剂量酒精组差异有显著性,高脂加中剂量酒精组和中剂量酒精组比较差异有显著性。心脏的脏器系数只在高剂量酒精组有统计学意义,肾脏的脏器系数各组间无显著性差异,MDA含量与肝脏的脏器系数改变趋势一致,VitE使MDA、Glu、T-CHO、TG下降,随着胃饲时间的延长,血清中Glu、T-CHO、TG逐渐递增,差异有显著性。结论 高剂量酒精、高脂及高脂联合中剂量酒精对大鼠肝脏有一定的损伤作用,使血清中葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯的含量增高,高脂加重了酒精对肝脏的损伤,而高荆量酒精对心脏也有一定程度的损伤作用,可能与脂质过氧化引起自由基损伤有关,VitE对其损伤作用有一定的保护作用。
- 李友贺彬琪让蔚清
- 关键词:酒精高脂脏器系数
- 抗氧化营养素与疾病防治被引量:4
- 2006年
- 氧化损伤是机体多种疾病的病理生理基础,也是多类疾病的共同致病环节。因此增强机体的抗氧化损伤能力已成为预防和治疗多种疾病的重要措施。本文主要讨论抗氧化营养素与几类疾病的关系。
- 贺彬琪让蔚清
- 关键词:抗氧化营养素自由基疾病防治
- 酒精对大鼠血清NOS活性及ADMA含量的影响被引量:9
- 2007年
- 目的研究不同浓度的酒精对大鼠血清中NOS活性及其内源性抑制物ADMA含量的影响。方法动物实验选用SD大鼠(雄性、56只、体重约250 g)灌胃给予不同剂量饮用酒处理组(红星二锅头,1 ml/100 g),每天一次,连续2个月,建立酒精摄入的动物实验模型。实验分为7组(n=8)。(1)对照组,(2)低、中、高三个剂量的饮用酒组(红星二锅头,14 V/V2、8 V/V5、6 V/V),(3)高脂饮食组,(4)高脂饮食联合中剂量饮用酒组(28 V/V):灌胃给予红星二锅头的同时,给予高脂饲料,(5)维生素E保护组,在(4)组基础上,每天给予维生素E(100 mg/kg,灌酒前1 h灌胃给予)。2个月后,按常规取动物血清,测定MDA、NO的含量与NOS(包括iNOS、eNOS、总NOS)的活性及ADMA含量。结果与对照组相比,酒精、高脂饮食、酒精联合高脂饮食能显著升高MDA、NO、ADMA含量,降低eNOS活性,升高iNOS活性;维生素E能扭转上述生物学效应。结论酒精能增加脂质过氧化产物,影响NOS活性,干扰NO代谢。其机制可能与内源性一氧化氮合酶抑制物ADMA水平有关。维生素E对其损伤有一定的保护作用。
- 李友贺彬琪李瑛邹丽君李程让蔚清
- 关键词:酒精脂质过氧化不对称性二甲基精氨酸
- 不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响被引量:3
- 2008年
- 目的观察不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响,分析甲醛诱导内皮细胞损伤在心血管疾病发病中的意义。方法将人脐静脉内皮细胞株分别与不同浓度甲醛(分别为0、5、10、20、40和80μmol/L)的DMEM培养基孵育,同时以过氧化氢(100μmol/L)为阳性对照组,抗氧化剂维生素C(100mg/L)为保护组。共培养24h后,分光光度法检测乳酸脱氢酶漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛浓度;硝酸还原酶法测定培养液中一氧化氮浓度;生化分析法测定内皮细胞一氧化氮合酶活性;免疫细胞化学法测定内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶的蛋白表达;RT-PCR法测定内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达。结果不同浓度甲醛呈剂量依赖性地促进细胞乳酸脱氢酶漏出,促进内皮细胞上清液丙二醛和一氧化氮的产生;降低内皮型一氧化氮合酶的活性,抑制内皮型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达;增加诱导型一氧化氮合酶活性,促进诱导型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达。结论甲醛诱导人脐静脉内皮细胞损伤,机制可能与其抑制内皮型一氧化氮合酶的活性及表达,诱导诱导型一氧化氮合酶的活性及表达,从而诱导内皮细胞产生过多的一氧化氮有关;维生素C通过降低一氧化氮产生,减轻甲醛诱导的内皮细胞损伤。
- 尹蔚兰邹丽君贺彬琪让欧艳李良贺栋梁让蔚清
- 关键词:病理学与病理生理学甲醛一氧化氮内皮型一氧化氮合酶诱导型一氧化氮合酶
- 酒类食品对小鼠神经功能的影响被引量:1
- 2006年
- 目的观察不同剂量的乙醇、甲醇对小鼠神经功能的影响。方法用急性灌胃的方法染毒小鼠,实验分三组,即甲醇染毒组、乙醇染毒组、甲醇与乙醇组,采用爬杆实验装置测定小鼠神经功能,用秒表测定小鼠染毒前后的爬杆时间,分析各组间及组内处理爬杆时间的差异。结果小鼠爬杆时间随乙醇、甲醇染毒的剂量增大而减少,呈明显的剂量-效应关系,经统计分析显示,差异有显著性。结论甲醇与乙醇影响小鼠的爬杆时间,具有神经毒性。
- 胡剑宏李友曹贤文李瑛贺彬琪让蔚清
- 关键词:酒精假酒神经功能
- 乙醇诱导人脐静脉内皮细胞损伤及ADMA/NOS/NO信号机制被引量:2
- 2008年
- 目的探讨乙醇诱导人脐静脉内皮细胞损伤效应及ADMA/NOS/NO信号机制。方法用不同浓度的乙醇与人脐静脉内皮细胞共培养,观察细胞形态和活性,通过检测细胞上清液丙二醛(MDA)、非对称性二甲基精氨酸(AD-MA)、一氧化氮(NO)的含量和一氧化氮合酶(NOS)的活性等指标,观察乙醇对人脐静脉内皮细胞损伤的量-效关系(乙醇处理细胞24 h)和时-效关系(终浓度为100 mmol/L的乙醇分别于处理0、3、6、12、24、48 h后观察检测指标)。实验分为正常对照组(加入与处理组等体积的D-Hank’s液,乙醇浓度为0 mmol/L)、乙醇处理组(终浓度分别为25、50、100、200mmol/L的乙醇)、乙醇&VitC组(乙醇终浓度为100 mmol/L,VitC终浓度为100 mg/L)和阳性对照组(终浓度为500μmol/L的过氧化氢)。结果50-200 mmol/L乙醇能显著改变细胞形态、降低细胞活性(OD值:0.91±0.10-0.58±0.04,细胞生长抑制率:0.00±0.00-35.57±3.13,P〈0.01);能显著性诱导内皮细胞MDA升高(258.72±7.36-524.07±8.25,P〈0.01)。50-200 mmol/L的乙醇还能显著性诱导:内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性下降(6.27±0.10-0.47±0.23,P〈0.05)及总NOS活性下降(10.69±0.54-3.77±0.32,P〈0.05);NO含量降低(191.61±7.96-88.38±5.07,P〈0.05)。而且上述生物学效应均具有显著的时间依赖性,各处理组间两两比较也具有显著性(P〈0.05或P〈0.01)。100 mmol/L乙醇处理时细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性及ADMA含量最高,且分别在处理后24 h到达最高峰。VitC均能扭转上述生物学效应,且具有显著性(P〈0.01)。结论50-200 mmol/L的乙醇能显著诱导人脐静脉内皮细胞损伤;ADMA在乙醇诱导人脐静脉内皮细胞损伤中有着重要作用。
- 李友王穆让欧艳李恩华贺彬琪邹丽君郑宇让蔚清
- 关键词:人脐静脉内皮细胞乙醇
- 甲醛诱导内皮细胞ADMA代谢紊乱及其机制
- 目的观察甲醛对内皮细胞不对称性二甲基精氨酸(ADMA)代谢的影响,分别从氧化损伤及 DNA-蛋白质交联两个方面分析甲醛影响 ADMA 代谢的特征,研究甲醛对内皮细胞损伤的可能机制。方法利用甲醛与人脐静脉内皮细胞共培养建立...
- 贺彬琪让蔚清
- 关键词:内皮细胞乳酸脱氢酶一氧化氮合酶DNA-蛋白质交联
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