蒲军 作品数:13 被引量:92 H指数:6 供职机构: 天津农学院 更多>> 发文基金: 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
杂色云芝漆酶基因在甲醇毕赤酵母中表达条件研究 被引量:6 2006年 重组甲醇毕赤酵母(Pichiamethanolica)工程菌PMAD16/pMETA-Lcc1能分泌表达杂色云芝重组漆酶。本文通过对其发酵条件的研究,找出瓶发酵表达漆酶的最适培养条件:在BMMY培养基中添加0.2mmol/L的Cu2+,装液量为25mL/250mL三角瓶,接种量体积之比为45:25,0.5%甲醇诱导,20℃条件下瓶培养5d,漆酶最高酶活力达1192U/L。 郭梅 路福平 蒲军 白东清 杜连祥关键词:漆酶 漆酶提取黄芪中黄芪皂苷的研究 被引量:7 2005年 蒲军 郭梅 杜连祥 路福平关键词:黄芪皂苷 漆酶 酚类化合物 多酚氧化酶 食品工业 降解酶 白腐菌Trametes versicolor产漆酶发酵条件的优化 被引量:19 2006年 对白腐菌Trametesversicolor产漆酶的发酵条件进行了研究,结果表明摇瓶培养产漆酶的最佳培养基组成为:可溶性淀粉2g/L,氯化铵1.2g/L,KH2PO42g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,CaCl2·2H2O0.1g/L,VB10.001g/L,Tween802g/L,微量元素混合液7mL/L,愈创木酚0.015mmol/L,CuSO4·5H2O60μmol/L,pH3.5;最佳发酵条件为:在250mL三角瓶装50mL培养基,接种量(Φ8mm)2块,25℃,150r/min振荡培养10d时,漆酶活力达到862U/L,约是优化前的4倍。 郭梅 蒲军 梁鹏 温斌 路福平 杜连祥关键词:VERSICOLOR 漆酶 发酵条件 杂色云芝漆酶基因在甲醇毕赤酵母中的异源表达及应用研究 郭梅 路福平 李拖平 王娜 张陈云 李晓雁 刘敏尧 蒲军 梁鹏 利用分子生物学的手段,采用pMETA和pMET A新型表达载体,实现了杂色云芝漆酶基因在甲醇毕赤酵母P. methanolica PMAD16中的异源表达,构建并筛选出了遗传稳定的基因工程菌;改变传统转换培养基诱导,采用...关键词:关键词:甲醇毕赤酵母 异源表达 分子生物学 杂色云芝漆酶基因(Lcc1)的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达 被引量:17 2005年 以白腐菌杂色云芝Coriolus versicolor RNA为模板,通过RT-PCR获得漆酶Leel基因的cDNA片段。构建了甲醇酵母表达质粒pMETA-Lccl载体,并将其线性化后用电穿孔法导入Pichia methabolica PMAD16,部分阳性克隆的PCR结果表明Lccl基因已经整合到甲醇毕赤酵母染色体上,经摇瓶培养筛选出表达水平较高的酵母工程菌株。 郭梅 蒲军 杜连祥 路福平 白东清关键词:甲醇毕赤酵母 杂色云芝 PICHIA E1基因 甲醇酵母 电穿孔法 基因工程菌漆酶对蒽醌染料的脱色研究 被引量:12 2009年 利用基因工程菌甲醇毕赤酵母(PMAD16/pMETαA-Lcc1)培养产生的重组漆酶,研究了重组漆酶对蒽醌染料Remazol Brilliant Blue R脱色的影响。结果表明:重组漆酶对蒽醌染料RBBR脱色的最佳pH值为4.5,温度为45℃,当溶液中漆酶活力为10.0U/mL时,在最适脱色条件下作用14h,粗漆酶和纯化漆酶对蒽醌染料RBBR(80mg/L)的脱色率分别为95.2%和87.5%,重组漆酶可有效地使蒽醌染料RBBR脱色。 郭梅 路福平 刘敏尧 李拖平 梁鹏 蒲军关键词:基因工程菌 脱色 基因工程菌漆酶用于提取黄芪总皂甙的研究 被引量:2 2008年 利用基因工程菌甲醇毕赤酵母(PMAD16/pMETαA-Lcc1)培养产生的重组漆酶,采用正交试验,对水浸提取条件、漆酶酶解条件进行了研究。结果表明:黄芪总皂甙最佳提取工艺为:先用重组漆酶酶解,1g黄芪加入3.0mL纯化的重组漆酶(453U/mL),在40℃、pH4.0的条件下酶解1.5h,然后再水浸提取黄芪总皂甙。经过重组漆酶酶解处理后黄芪总皂甙提取率比未经酶处理的提取率提高了65.6%。 郭梅 路福平 刘敏尧 蒲军 李拖平 梁鹏关键词:基因工程菌 黄芪总皂甙 正交试验 杂色云芝漆酶在甲醇毕赤酵母中异源表达发酵工艺 本发明公开了一种杂色云芝漆酶在甲醇毕赤酵母中异源表达发酵工艺,步骤为:(1)准备基因工程菌甲醇毕赤酵母PMAD16/pMETαA-Lcc1和发酵培养基;(2)将活化的菌株接种在经灭菌的发酵培养基中,在25~31℃,振荡或... 郭梅 路福平 李托平 蒲军 王娜 梁鹏 白东清文献传递 白腐菌漆酶特性及其应用前景 被引量:26 2004年 木质素是第二天然聚合物,木质素的降解是碳素循环中的关键一步。自然界中木质素的降解主要是通过丝状真菌,尤其是白腐菌的分解作用来完成的。漆酶是一种含铜多酚氧化酶,按其主要来源分为漆树漆酶和真菌漆酶两大类,研究表明,漆酶可作用的底物范围广泛。本文综述了白腐菌漆酶的结构特性、催化氧化性质,以及漆酶在环境保护、造纸工业、食品工业、生物检测及其它领域中的应用前景。 郭梅 蒲军 路福平 杜连祥关键词:木质素 生物降解 白腐菌 漆酶 去自身信号肽漆酶基因的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达 本文以白腐菌杂色云芝RNA为模板,通过RT-PCR获得不带自身信号肽漆酶Lcc1基因的cDNA片段.构建了重组表达载体pMETαA-Lcc1,并将其线性化后用电穿孔法导入PichiamethabolicaPMAD16,P... 郭梅 白东清 蒲军 杜连祥 路福平关键词:漆酶 甲醇毕赤酵母 异源表达 基因克隆 基因表达 文献传递