董蕊
- 作品数：35 被引量：251H指数：10
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划福建省科技厅重大项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胚胎面突外胚间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨人胚胎面突外胚间充质干细胞向成骨细胞分化的可能性。 方法 将妊娠 5 0天人胚胎面突外胚间充质干细胞 ,培养于含 10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、10 0 μg/ml维生素 C、10 nmol/L地塞米松和 15 %胎牛血清的DMEM矿化诱导液中。相差显微镜下观察细胞的形态变化 ,免疫组织化学检测 型胶原的表达 ,碱性磷酸酶活性检测 ,矿化结节 Von Kossa染色 ,逆转录聚合酶链反应 ( reverse transcription- polymerase chain reaction,RT- PCR)检测骨钙素的表达。 结果 诱导 3天 ,细胞体积变大 ,由成纤维样变扁平 ,密集处细胞呈多边形、立方形 ,抗 型胶原染色阳性 ,碱性磷酸酶活性增高 ;15天后有矿化结节形成 ;2 5天 Von Kossa染色阳性。RT- PCR显示诱导细胞表达成骨细胞特异的骨钙素。
- 邓蔓菁金岩史俊南何大为聂鑫董蕊
- 关键词：胚胎成骨细胞诱导分化
- 大鼠肺微血管内皮细胞培养方法的研究被引量：21
- 2004年
- 目的 :探讨以简单有效的方法获取大鼠微血管内皮细胞 ,为构建含有血管的组织工程产品提供种子细胞。方法 :用出生 1d的SD仔鼠的肺组织进行肺微血管内皮细胞的组织块培养。用第四军医大学口腔医院组织工程中心设计的方法对其进行纯化 ,用经优化处理的内皮细胞培养液扩大培养。通过形态学、免疫组织化学、透射电镜鉴定其来源。结果 :用此法进行的原代培养 ,血细胞在换液和传代过程中被去除 ,成纤维细胞污染可经第四军医大学口腔医院组织工程中心设计的方案纯化去除。经鉴定获得的血管内皮细胞纯度较高 ,生长状态良好。结论 :由此获得的血管内皮细胞纯度高 ,生长状态良好 。
- 姜明金岩刘源赵宇刘鹏董蕊
- 关键词：肺微血管细胞培养血管内皮细胞
- 永生化外胚间充质干细胞的生物学特性被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨端粒酶催化亚基 (hTERT)介导的永生化外胚间充质干细胞的生长、增殖特性及转化特征。方法 :测定永生化外胚间充质干细胞的生长曲线、群体倍增时间 ;流式细胞术检测细胞增殖周期 ;绘制细胞累计生长曲线 ;检测细胞的平板克隆形成率、软琼脂克隆形成情况 ;胰蛋白酶 -Giemsa染色法分析染色体核型 ;接种于裸鼠皮下检测细胞的致瘤性。结果 :永生化外胚间充质干细胞越过衰老期 ,增殖较活跃 ,S期细胞比例明显增加 ;该细胞不能在软琼脂内形成细胞克隆 ;第 2 5代细胞染色体形态结构正常 ,为二倍体核型 ;在裸鼠皮下不能形成肿瘤。结论 :永生化外胚间充质干细胞增殖旺盛 ,核型正常 ,无悬浮生长能力 ,在裸鼠体内不具成瘤性 ,是正常细胞而非转化细胞 ,可以作为组织工程的种子细胞。
- 邓蔓菁金岩史俊南董蕊何大为刘源赵宇
- 关键词：外胚间充质干细胞永生化增殖
- SV40大T抗原对人皮肤成纤维细胞生物学行为的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 :研究SV4 0大T抗原 (LT)基因对人正常皮肤成纤维细胞体外转化作用 ,以及转化后细胞生物学特性的改变 .方法 :采用脂质体介导的方法 ,利用含有LTcDNA的质粒psv3 neo转染人正常皮肤成纤维细胞 .G4 18筛选后 ,挑选阳性克隆扩大培养 ,观察基因及蛋白在细胞内的表达 ,以及对细胞增殖等生物学特性的改变情况 .结果 :分离获得转化细胞克隆 ,原位杂交显示LTmRNA在转染细胞胞质中表达 .免疫组化结果显示 ,细胞质中有SV4 0大T抗原表达 .细胞计数、Br dU、流式细胞仪检测表明 ,经过一段时间的旺盛生长 ,在转染后第 16代 ,细胞即进入危机期 ,以一种比衰老细胞更快的速度死亡 .结论 :LT可以促进正常皮肤成纤维细胞增殖 ,但这种能力是有限的 ,在转染后期甚至会促进细胞死亡 .所以要使人的正常皮肤成纤维细胞永生化 ,单纯利用LT的转染是不够的 。
- 王新文金岩刘源王军琳赵宇董蕊
- 关键词：SV40大T抗原皮肤成纤维细胞
- 化学萃取异种组织工程化神经支架的方法及组织学研究
- 目的研究新的化学萃取方法,清除成年兔坐骨神经中的细胞和髓鞘,建立成年兔坐骨神经的化学萃取方法,获得去细胞同种异神经体移植物。方法切取健康成年兔双侧坐骨神经,以triton X—100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化...
- 国生辉金岩张勇杰刘鹏聂鑫董蕊
- 关键词：神经移植异种周围神经
- 文献传递
- 大鼠毛囊细胞构建组织工程全层皮肤被引量：13
- 2005年
- 目的:以大鼠毛囊细胞为种子细胞培养组织工程皮肤。方法:分离培养新生SD大鼠毛囊外根鞘细胞和真皮鞘细胞,以这两种细胞为种子细胞构建全层组织工程全层皮肤。结果:成功构建了具有表皮层和真皮层的组织工程皮肤。结论:毛囊细胞可以用作种子细胞来构建组织工程全层皮肤。
- 刘晓亮金岩董蕊聂鑫
- 关键词：毛囊皮肤细胞
- EGF对真皮成纤维细胞中cyclinD1和CDK-4表达的影响被引量：17
- 2002年
- 目的 探讨表皮生长因子 (EGF)对作为皮肤组织工程种子细胞之一的真皮成纤维细胞中 cyclin D1和 CDK- 4表达的影响 ,以从细胞周期探讨 EGF促进真皮成纤维细胞生长的机制 .方法 用含 10 0 m L· L- 1 胎牛血清的 DMEM,加入5 0 mg· L- 1的 EGF培养 SD大鼠的真皮成纤维细胞 ,通过MTT检测、流式细胞仪分析观察细胞的生长状态 ,免疫组化检测 cyclin D1和 CDK- 4的表达 ,结合流式细胞仪分析观察细胞的周期变化 .结果 MTT检测、流式细胞仪结果都显示 5 0mg· L- 1 的 EGF能显著促进真皮成纤维细胞的生长增殖 ,免疫组化结果显示 ,二者一致 .结论 5 0 mg· L- 1 的 EGF对真皮成纤维细胞的生长有极大的促进作用 ,促进了细胞周期蛋白 cyclin D1和 CDK- 4的表达 ,使细胞 G1期变短 .
- 王军琳刘源金岩吕红兵赵宇王新文董蕊
- 关键词：细胞周期蛋白类细胞周期蛋白质依赖激酶类表皮生长因子-尿抑胃素真皮成纤维细胞
- 人角朊干细胞体外筛选及鉴定的实验研究被引量：10
- 2003年
- 目的 探讨体外筛选及鉴定人角朊干细胞 (KSC)的方法。 方法 利用 KSC对细胞外基质的快速黏附性 ,选择不同时间黏附的细胞分为 5、2 0和 6 0分钟 3组 ,并以不进行筛选的细胞作对照组。体外培养扩增后 ,以 KSC的相对特异性标识分子 β1 整合素、角蛋白 19(Ck19)的单克隆抗体 ,免疫组织化学方法对各组细胞进行鉴定 ,利用图像分析系统测平均灰度值。并用流式细胞仪、透射电镜对各组细胞进行检测。 结果 各组细胞在 10～ 14天均有克隆形成 ,组间比较 5分钟组细胞生长较慢 ,但形成克隆较大 ,细胞体积较小。免疫组织化学β1 整合素、Ck19在各组都有表达 ,各组平均灰度值统计学分析显示 ,β1 整合素在 5分钟组的表达与另 3组间有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ,Ck19的表达在 5分钟组与 2 0分钟组间无差异 (P>0 .0 5 ) ,6 0分钟组与对照组间差异不显著 ,而前两组与后两组之间比较有统计学意义 (P<0 .0 5 )。流式细胞仪检测提示 5分钟组细胞大部分处于 G1 期 ,与其它 3组有区别。透射电镜显示 5分钟组细胞体小 ,核浆比大 ,细胞器不成熟。 结论 利用细胞外基质筛选的 5分钟组细胞处于幼稚状态 ,并有强克隆形成能力 ,符合预期的KSC特点 ,可利用 KSC对细胞外基质的快速黏附性对其纯化筛选 ,同时利用 β1 整合素。
- 董蕊金岩刘源
- 关键词：体外筛选角蛋白19Β1整合素
- 面突外胚间充质干细胞在体外的自发分化
- 2004年
- 目的 :探讨无人为抗分化因素干扰下 ,具干细胞特性的面突外胚间充质细胞在体外自发分化的方向。方法 :取第 4代外胚间充质干细胞 ,去除抑制分化的白血病抑制因子 (LIF) ,2d、2周爬片 ,免疫细胞化学法检测细胞分化情况。结果 :去除LIF ,细胞形态发生改变 ,由成纤维样变得多样化 ,随时间的延长而明显。去除LIF 2d ,细胞不再表达HNK - 1、NSE、S - 10 0 ,约 6 5 %细胞表达a-SMA ,I型胶原出现表达。去除LIF2周 ,约 1%细胞表达NF ,零星细胞表达GFAP。结论 :外胚间充质干细胞在体外出现自发分化 。
- 邓蔓菁金岩史俊南董蕊何大为张光东聂鑫
- 关键词：外胚间充质干细胞体外
- 角朊细胞在三种不同培养基中生长的观察研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :探讨作为组织工程种子细胞的角朊细胞在不同培养基中的生长状态 ,以获得最佳生长状态的种子细胞。方法 :配制FAD、MCDB(- )、MCDB(+) 3种不同的培养基来培养SD大鼠的角朊细胞 ,通过细胞曲线、MTT检测、流式细胞仪分析观察细胞的生长状态。结果 :角朊细胞在 3种培养基中的生长状态显著不同 :MCDB15 3(+)组细胞增殖力最强 ,MCDB15 3(- )组次之 ,FAD组最差。前两组细胞传代都能达到 8至 10代 ,FAD组只能传至第三代。结论 :细胞在加入表皮生长因子和促进增殖的垂体提取物的无血清培养基中增殖良好。
- 王军琳金岩刘源吕红兵赵宇王新文董蕊
- 关键词：人工皮肤角朊细胞培养基表皮生长因子
