程明亮 作品数:328 被引量:1,181 H指数:16 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
中药复方对猪血清免疫性肝纤维化肝中氧化及抗氧化的影响 被引量:5 2006年 在各种诱因引起的肝纤维化中,氧自由基是促使肝纤维化形成的主要原因之一,脂质过氧化反应的醛类产物不仅引起肝星状细胞(HSC)的增殖与活化,而且激活库普弗细胞释放导致肝纤维化形成的细胞因子。中药复方汉丹肝乐具有良好的抗肝纤维化作用,但其药理作用可能是多方面的。本实验旨在通过观察不同干预措施下肝内氧化及抗氧化体系的变化情况,了解汉丹肝乐是否可通过改善体内氧化及抗氧化体系发挥作用,为临床用药提供依据。 程明亮 付荣泉关键词:肝纤维化 免疫 汉丹肝乐 淋巴细胞内与乙型肝炎病毒X蛋白结合的新蛋白X-30编码基因的克隆 2003年 目的:为探讨 HBxAg 在 HBV 致病过程中的作用,筛选并克隆人淋巴细胞 cDNA 文库中与 HBxAg 有相互作用的蛋白基因.方法:利用酵母双杂交系统3筛选并克隆人淋巴细胞 cDNA文库中与 HBxAg 有相互作用的蛋白的基因.将 HBxAg 编码基因连接入酵母表达载体 pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞 AH109并在其内表达,然后与转化了人淋巴cDNA 文库质粒 pACT2的酵母细胞 Y187进行配合,双重筛选阳性菌落,提取质粒并测序,结果进行生物信息学分析,发现其中有1个未知基因.根据 GenBank 中的序列信息设计引物,从 HepG2细胞提取总 RNA,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,并测序证实,命名为 X-30,在 GenBank 中注册,注册号为AY280722.结果:X-30基因的编码序列全长为315个核苷酸(nt),编码产物由103个氨基酸残基(aa)组成.结论:HBxAg 与淋巴细胞结合蛋白新型基因 X-30的筛选与克隆,为进一步研究 HBxAg 的分子生物学机制及探索新型治疗技术奠定了基础. 梁耀东 李强 成军 王琳 陆荫英 吴君 程明亮关键词:淋巴细胞 乙型肝炎病毒X蛋白 克隆 分子生物学机制 逆转录多聚酶链反应 贵州地区762例肝癌患者的危险因素分析 被引量:4 2014年 目的 探讨贵州地区人群原发性肝癌(HCC)的危险因素.方法 对贵州地区9家医院确诊的762例肝癌患者为观察组,798例非肿瘤居民为对照组,采用调查表进行问卷调查,由专人负责调查.调查内容包括年龄、性别、民族、居住地区、文化程度、经济状况、体质量指数,HCC家族史,HBV、HCV感染史,常进食腌制、霉变食物史,吸烟史、饮酒史,有无糖尿病、非酒精性脂肪肝、酒精性肝病及其他既往病史等.采用成组病例对照研究,通过非条件logistic回归分析及分层分析. 结果 观察组吸烟者210例(27.6%)、非酒精性脂肪肝336例(44.1%)、酒精性肝病245例(32.2%)、HCC家族史141例(16.5%)、饮酒者300例(39.4%)、HBV感染者436例(57.2%)、经常进食腌制、霉变食物290例(38.1%)、5年前经济状况好152例(19.9%);对照组,吸烟者116例(14.5%)、非酒精性脂肪肝160例(20.1%)、酒精性肝病101例(12.7%)、HCC家族史40例(5.0%)、饮酒者180例(22.6%)、HBV感染82例(10.3%)、经常进食腌制、霉变食物225例(28.2%)、5年前经济状况好352例(44.1%).其OR值分别为3.520、2.464、4.330、2.219、2.451、19.245、6.212、0.174,P值均<0.01,差异有统计学意义. 结论 HBV感染、经常食用腌制、霉变食物为贵州人群肝癌常见的危险因素,吸烟及过度饮酒也可增加患肝癌的风险. 赵雪珂 程明亮 张权 陈莎莎 谭家武 王文志 罗新华 刘三都 林世德关键词:饮酒 丹芍化纤方对体外大鼠肝细胞增生、Caspase-3mRNA及白蛋白合成的影响 被引量:8 2005年 目的:探讨丹芍化纤方抗肝纤维化的作用机制方法:采用Ⅳ型胶原酶消化及Ficoll密度梯度离心的方法, 分离、培养大鼠肝细胞,加入5%、10%、20%药物血清干预体外培养的肝细胞,用MTT法测定肝细胞的增生,荧光实时定量PT-PCR(Real Time RT—PCR)法检测肝细胞内天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA表达,并检测培养上清中的白蛋白. 结果:丹芍化纤方药物血清对肝细胞的增生及白蛋白合成有促进作用,能显著下调肝细胞内caspase-3mRNA的表达, 其表达水平与正常大鼠血清组比较有显著性差异,呈明显的浓度依赖关系. 结论:丹芍化纤方发挥抗肝纤维化作用与其促进肝细胞增生、蛋白合成功能,抑制肝细胞凋亡有关. 吴亚云 耿晓霞 程明亮关键词:CASPASE-3MRNA 肝细胞增生 化纤方 抗肝纤维化作用 药物血清 培养上清 燃煤污染型砷中毒肝损伤患者血清差异蛋白质的筛选 被引量:4 2010年 目的 对比分析燃煤污染型砷中毒肝损伤患者和健康人血清中差异表达的蛋白,筛选与燃煤污染型砷中毒致肝损伤发生密切相关的血清蛋白质.方法 6例血清标本来自于贵州省兴仁县交乐病区燃煤型砷中毒肝损伤患者及病区健康人(对照组),采用双向凝胶电泳(2-DE)分离血清中总蛋白,硝酸银染色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,基质辅助激光解吸电离飞行时问质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质点,寻找与燃煤污染型砷中毒致肝损伤有关的蛋白质.结果成功地建立了血清2-DE图谱.差异蛋白分析显示,砷中毒肝损伤组平均蛋白点数为(824±31)个,对照组为(782±42)个,两组血清2-DE图谱的匹配率为94.9%(782/824).筛选出两组间的差异蛋白点49个,对其中表达量差异3倍以上的30个蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,鉴定出相关蛋白10个.与对照组比较,其中α2-巨球蛋白、B细胞受体相关蛋白31、细胞角蛋白1、载脂蛋白A-I在砷中毒肝损伤组表达上调,触珠蛋白、α2-HS-糖蛋白、细胞外信号调节激酶4、锌指蛋白323、ZAP-70、SP40表达下调.结论成功地建立了分辨率高、重复性较好的燃煤污染型砷中毒肝损伤患者血清2-DE图谱,并筛选出一些与健康人血清中差异表达的蛋白质,这些蛋白质能否作为燃煤污染型砷中毒肝损伤诊断的血清标志物还有待于进一步验证. 谢汝佳 韩冰 罗新华 吴君 程明亮 杨勤关键词:砷中毒 肝损伤 双向凝胶电泳 蛋白质组学 肝纤维化组织相关功能蛋白质组的差异分析 被引量:5 2007年 目的建立肝纤维化组织双向凝胶电泳图谱,初步分析蛋白质组的变化与差异表达。方法利用2-DE 分离肝纤维化组织和正常肝组织总蛋白质后,经图像分析识别差异表达的蛋白点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定差异蛋白质,并用 Western 印迹方法对其中3个蛋白质的表达水平变化进行验证。结果比较分析肝纤维化组织和正常肝组织的2-DE 图谱,找到差异蛋白点59个,其中在肝纤维化组织表达上调30个,下调29个。并对其中15个表达差异3倍以上的蛋白点进行了肽质量指纹图分析,鉴定出10个与细胞信号转导、细胞增殖、氧化应激有关的蛋白质,14-3-3β、DJ-1及 PEBP 蛋白的 Western 印迹验证结果与2-DE 的检测结果相一致。结论肝纤维化组织和正常肝组织之间存在一些差异表达的蛋白质,为进一步阐明肝纤维化的发生机制奠定基础。 罗新华 杨勤 张权 程明亮关键词:肝硬化 蛋白质组 干扰素治疗慢性乙型肝炎时干扰素抗体与疗效的关系 1999年 吴亚云 李媛媛 陆彤 程明亮 丁一生关键词:乙型肝炎 干扰素 疗效 乙肝散治疗慢性乙肝的临床和实验研究 被引量:17 1997年 以清热解毒、健脾化湿两法组成纯中药制剂乙肝散,治疗慢性乙型肝炎40例,并与齐墩果酸片随机对照,结果发现:治疗组病人除临床症状、体征、肝功能以及蛋白代谢等获得明显改善外,乙肝散对乙型肝炎病人HBeAg有较好的转阴作用,与对照组相比有显著差异(p<0.05)。体外试验采用由乙型肝炎病毒(HBV)DNA克隆转染人肝细胞(HePG_2)的2.2.15细胞系,对其进行乙型肝炎病毒HBsAg和HBeAg表达抑制的研究结果显示:乙肝散对HBeAg表达具有较明显的抑制效果,IC_(50)为656.95±40.19μg/ml,治疗指数为5.34±0.23,在各个不同剂量组均有不同程度的效果,呈现出剂量反应关系。 程明亮 周霞秋 米志宝 罗永芳 方永善 叶先茂 谢青 丁一生关键词:乙型肝炎 中医药疗法 乙肝散 人工肝支持系统治疗重型肝炎的临床观察 目的:观察人工肝支持系统治疗重型肝炎的临床疗效。方法:对65例重型肝炎病人在内科综合治疗的基础上给予人工肝治疗120次,平均1.85次,比较治疗前后的临床表现,主要实验室指标以及观察人工肝治疗的不良反应。结果:65例患者... 姚玉梅 吴亚云 刘琴 刘晓敏 程明亮 叶霞关键词:重型肝炎 人工肝支持系统 文献传递 应用酵母双杂交技术筛选人白细胞中与NS5ATP9蛋白结合蛋白的编码基因 被引量:2 2004年 目的:我们在以往的研究中,应用抑制性消减杂交技术(SSH)筛选得到了丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活蛋白9(NS5ATP9),NS5ATP9是一种未知功能新基因.为了进一步研究NS5ATP9的生物学功能,应用酵母双杂交技术, 筛选并克隆人白细胞中与NS5ATP9蛋白相互作用蛋白的基因,进一步阐明NS5ATP9的生物学功能及其作用途径. 方法:用多聚酶链反应(PCR)法扩增NS5ATP9基因,连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人白细胞cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-α-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选阳性菌落并测序,进行生物信息学分析. 结果:成功克隆出NS5ATP9基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在四重缺陷(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基上生长,又能在铺有C-α-gal的四缺培养基上变蓝的真阳性菌落46个,其中含人类免疫球蛋白轻链13个,核小体表面蛋白10个,铁蛋白重链2个,人类重组免疫球蛋白λ轻链11个,14-3-3家族蛋白1个,脑膜炎球菌PorA蛋白1 个,RNA多聚酶Ⅲ3个,烟草有丝分裂原激活蛋白激酶1 个,细胞色素P450Ⅱ2个,SLIT2蛋白1个,DNA依赖蛋白激酶催化亚基1个. 结论:成功克隆出丙型肝炎病毒NS5ATP9蛋白的结合蛋白,为进一步研究NS5ATP9的生物学作用提供了新的线索. 李强 梁耀东 成军 王琳 张建 邵清 刘敏 程明亮关键词:酵母双杂交技术 白细胞 抑制性消减杂交技术 SSH 编码基因 酵母细胞