田睿
- 作品数:4 被引量:30H指数:2
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 醛糖还原酶抑制剂筛选模型的建立和初步应用被引量:21
- 2002年
- 本研究从牛晶状体中提取醛糖还原酶(AR),以DL-甘油醛为底物、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)为辅酶,应用96孔石英板建立了醛糖还原酶抑制剂(ARI)微量高效筛选模型。酶促反应体系体积为200μ1,其组成成分为:50mmol/L磷酸盐缓冲液(pH6.2)、400mmol/L硫酸锂、5mmol/L 2-巯基乙醇、0. 24mmol/L NADPH、1、2mg粗酶、2mmol/L DL-甘油醛,用蒸馏水补足体积。反应温度为37°C,规定反应体系吸光度每分钟下降0.001为一个酶活力单位。以不含底物的样品为空白对照。开展了从微生物代谢产物中筛选ARI的工作,已经累计筛选真菌和稀有放线菌发酵样品约1500个,其中获得阳性样品6个,阳性率约为0.4%。
- 杨喆余利岩左联田睿李秋萍姚天爵宋京
- 关键词:醛糖还原酶抑制剂微生物来源并发症糖尿病
- 以绿脓杆菌外排泵外膜蛋白MexAB-OprM为靶点的抗绿脓杆菌药物筛选模型
- 本发明涉及一种以绿脓杆菌外排泵外膜蛋白MexAB-OprM为靶点的抗绿脓杆菌药物筛选模型,以及利用所述筛选模型筛选抗耐药绿脓杆菌的药物之方法。本发明还涉及一种用于上述筛选模型和筛选方法的过量表达MexAB-OprM蛋白之...
- 肖春玲杨丽霞田睿姚天爵刘艺霜游雪甫
- 文献传递
- 铜绿假单孢菌多药外排系统研究进展被引量:8
- 2003年
- 铜绿假单孢菌是一种重要的院内感染条件致病菌 ,具有先天的和后天获得的多重高度耐药性 ,一旦感染 ,临床治疗十分困难。铜绿假单孢菌的耐药机理十分复杂 ,除常见耐药机制外 ,很重要的就是其拥有可以外排多种药物的主动外排系统 ,使抗菌药物很难发挥应有作用。本文将从近年铜绿假单孢菌中各类外排泵的研究情况 ,特别是其中最重要的外排系统“MexAB -OprM”的分子结构模型、膜定位、该基因的表达与调控等方面的研究进展做一综述。
- 田睿余利岩左联姚天爵
- 关键词:铜绿假单孢菌耐药性
- 以绿脓杆菌外排泵外膜蛋白OprM为靶点的药物筛选模型被引量:1
- 2004年
- 目的 以绿脓杆菌主动外排系统中MexAB-OprM型外排泵的外膜蛋白OprM为靶点,建立外排泵抑制剂筛选模型。方法 利用PCR法从标准绿脓杆菌PA01菌株中得到外排泵外膜蛋白基因oprM,利用T-easy载体作为克隆载体,pMMB67EH为表达载体在大肠杆菌HS151中进行OprM蛋白的诱导表达。为检测OprM蛋白的功能,采用液闪计数法测定胞内四环素浓度,纸片法进行抑菌圈测定实验,并以此为基础建立筛选模型。结果 可见OprM蛋白的高表达,以其为主要检定菌,建立了一个作用于外排泵外膜OprM蛋白的药物筛选模型。累计应用此模型筛选放线菌和真菌发酵液样品1 600个,其中获得阳性菌株56个,阳性率约为3.5%。结论 本研究验证了OprM蛋白对外排作用的重要性,通过筛选实验表明该模型有较好的特异性和可操作性。
- 田睿余利岩肖春玲左联姚天爵杨丽霞
- 关键词:绿脓杆菌外排泵药物筛选