王锦
- 作品数：10 被引量：54H指数：4
- 供职机构：复旦大学上海医学院生理与病理生理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肾上腺髓质素对大鼠延髓头端腹外侧区压力反射敏感神经元的作用(英文)被引量：1
- 2006年
- 采用多管微电泳结合细胞外记录的方法研究了肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对大鼠延髓头端腹外侧区(rostral ven- trolateral medulla,rVLM)压力反射敏感性神经元电活动的作用及其可能机制。结果显示：在29个rVLM压力反射敏感神经元中,20个神经元在30、60和90nA的电流微电泳大鼠ADM(rADM)过程中,放电频率由(10．8±2．7)spikes/s分别增加到(14．6±3．6)、(19．8±4．7)和(31．9±6．4)spikes/s(P＜0．05,n=20)。微电泳rADM特异性受体阻断剂人ADM(human ADM,hADM) (22-52)可明显减小神经元放电频率的增加幅度,比正常放电频率仅增加15．4%[(11．4±2．5)sipkes/s,P＜0．05,n=10],而降钙素基因相关肽1(CGRP1)受体阻断剂hCGRP(8-37)对rADM兴奋性神经元电活动影响较小。在另外23个神经元中,10个神经元的放电频率在10、20和40nA电流微电泳神经型NOS(nNOS)抑制剂7-NiNa过程中放电减少,由正常的(10．1±3．5)spikes/s分别减少为(7．5±2．5)、(5．3±2．1)和(3．1±1．4)spikes/s(P＜0．05,n=10)。在微电泳7-NiNa过程中同时微电泳rADM,则rADM增加神经元放电频率的效应减弱,增加幅度为基础水平的17%[(6．2±1．9)spikes/s]。8个神经元在10、20和40nA电流微电泳诱导型NOS抑制剂(iNOS)aminoguanidine(AG)过程中放电频率由(11．5±5．1)spikes/s增加到(17．8±5．6)、(22．5±6．3)和(29．1±6．4) spikes/s(P＜0．05,n=8),rADM与AG同时微电泳时,AG埘rADM本身增加神经元放电的效应无明显影响。上述结果提示,rADM在rVLM可通过其特异性受体或来源于nNOS的NO作用于压力反射敏感神经元,使其活动增强而发挥调节心血管活动的作用。
- 樊明欣李霞王锦曹银祥沈霖霖朱大年
- 关键词：肾上腺髓质素延髓头端腹外侧区微电泳细胞外记录
- 针刺或褪黑素的中枢降压作用与延髓氨基酸递质改变的关系被引量：13
- 2007年
- 目的研究针刺降压和褪黑素(Mel)在下丘脑前核(AHA)引起应激性高血压大鼠血压降低的作用是否与延髓头端腹外侧区(rVLM)氨基酸类递质释放的改变有关,并分析Mel降压机制与针刺降压机制之间的关系。方法采用足底电击结合噪声的方法建立应激性高血压大鼠模型;针刺应用电针的方法,穴位取双侧足三里;采用中枢核团微量注射的方法给药,观察动脉血压的改变,同时应用脑内微透析的方法取样,并利用高效液相色谱-荧光检测的方法,分析透析液中氨基酸含量的改变。结果大鼠在接受应激处理后,血压升高,同时,rVLM内谷氨酸(Glu)释放量增加,应激性高血压大鼠在经针刺处理后,血压回降,同时,rVLM内Glu释放量回减。微量注射Mel至应激性高血压大鼠的AHA能使血压降低,同时,rVLM内Glu释放量也减少,而γ-氨基丁酸(GABA)和牛磺酸(Tau)释放量则增加。在rVLM微量注射GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(bicuc)则可部分阻断Mel在AHA引起的降压效应。结论针刺降压与rVLM内Glu释放量减少有关,而Mel在AHA引起的降压效应则与rVLM内Glu释放量减少,以及GABA和Tau释放量增加有关。针刺降压和Mel在AHA引起的降压机制都与rVLM内Glu释放量减少有关。
- 王延荣王锦李莉沈霖霖曹银祥朱大年
- 关键词：针刺褪黑素延髓头端腹外侧区氨基酸类神经递质
- 尾加压素Ⅱ及其受体GPR14在延髓头端腹外侧区对血压和心率的影响被引量：3
- 2005年
- 目的 本工作试图观察尾加压素Ⅱ(UⅡ及其受体GPR14是否在重要心血管中枢延髓头端腹外侧区(RVLM)影响心血管活动调节,并了解UⅡ及其受体GPR14在RVLM的改变是否与针刺治疗高血压的作用机制有关。方法 应用中枢微量注射的方法观察UⅡ在RVLM对血压和心率的影响,应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT PCR)和免疫组化的方法检测GPR14mRNA和受体蛋白在RVLM的表达,利用足底电击结合噪音引起慢性应激性高血压大鼠模型,用尾套法无创性测量尾动脉收缩压和心率,并用免疫组化的方法检测应激性高血压大鼠和在接受针刺治疗后RVLM内GPR14受体蛋白表达的改变。结果 于RVLM内微量注射UⅡ可量效依赖地升高血压和加快心率,RT PCR和免疫组化都显示RVLM内有UⅡ受体GPR14的分布,针刺“足三里”穴位能降低应激性高血压大鼠的血压,但免疫组化的结果显示RVLM内GPR14免疫阳性反应强度无明显变化。结论 大鼠RVLM内存在UⅡ受体GPR14,UⅡ在RVLM对血压和心率具有调节作用,但针刺治疗应激性高血压的机制可能与RVLM内UⅡ及其受体GPR14的改变无关。
- 孙雅轩王锦沈霖霖卢宁曹银祥朱大年
- 关键词：延髓头端腹外侧区血压心率应激性高血压
- 电针诱导心肌缺血大鼠延髓头端腹外侧区nNOS和iNOS差异表达(英文)被引量：7
- 2008年
- 许多研究表明,延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla,RVLM)的NO/NOS系统参与心血管活动的中枢调节。本实验以结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支法建立急性心肌缺血(acute myocardial ischemia,AMI)动物模型,观察针刺"内关"穴改善AMI大鼠的心功能作用,同时检测大鼠RVLM区神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitri coxide synthase,nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的变化,进而探讨针刺治疗AMI的中枢机制。实验观察显示,AMI大鼠心功能各项指标减弱,伴随外周血去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)水平显著升高,同时RVLM区nNOS阳性神经元数和nNOSmRNA表达升高,而iNOS水平则降低。针刺"内关"穴(Pe6)(每天30min,连续5天)改善心功能,降低AMI大鼠血清中NE和BNP的水平,同时升高iNOS并降低nNOS在RVLM的表达。以上结果提示,针刺治疗心肌缺血的同时可以调节iNOS/NO和nNOS/NO在RVLM的变化,这可能与针刺通过调节RVLM区的NO含量进而降低交感传出,从而改善AMI大鼠的心功能有关。
- 夏春梅陈军王锦樊明欣肖芬曹银祥李莉沈霖霖朱大年
- 关键词：延髓头端腹外侧区心肌缺血电针神经元型一氧化氮合酶诱导型一氧化氮合酶
- 应激性血压升高对大鼠下丘脑肾上腺髓质素水平的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨应激性血压升高对下丘脑肾上腺髓质素编码基因表达及水平的影响。方法58只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=23)和应激组(n=35),应激组给予噪声或噪声加足底电击随机组合输出刺激制备应激性高血压动物模型。48只动物在实验第1、5、10、15天以及实验结束后5、10天测量尾动脉压后处死(每个时间点对照组和应激组分别为n=3和n=5),分离下丘脑并制备组织匀浆后分别采用逆转录聚合酶链反应检测肾上腺髓质素编码基因表达变化,放射免疫法检测肾上腺髓质素水平变化。另外10只在实验第10天后断头取下丘脑制备冰冻切片,采用免疫组织化学法检测肾上腺髓质素免疫阳性细胞分布变化。结果应激5天后动物血压开始明显升高,15天达到高峰(156.3±3.3 mmHg比114.0±2.6 mmHg,P<0.01),应激结束10天血压仍维持在较高水平。与对照组相比较,肾上腺髓质素编码基因mRNA表达在应激10天内逐渐上调(第5天0.99±0.05比0.92±0.04,P<0.05;第10天1.26±0.04比0.92±0.04,P<0.01),而后表达下调,在应激第15天仍高于对照组(1.00±0.04比0.92±0.04,P<0.05)。应激结束后5天表达仍高于对照组,但差异无统计学意义;与同时间点对照组相比较,肾上腺髓质素水平在应激10天内逐渐增加(第1天1.25±0.22比0.93±0.19,P<0.05;第5天1.69±0.29比0.97±0.21,P<0.01;第10天2.00±0.28比0.94±0.24,P<0.01)。应激组(n=5)大鼠下丘脑室旁核区域肾上腺髓质素阳性细胞的光密度明显高于对照组(n=5),由正常的110.21±3.10增加到127.56±3.50(P<0.01),而其他区域无明显变化。结论应激性血压升高过程中,下丘脑肾上腺髓质素编码基因mRNA表达和肾上腺髓质素水平均发生相应变化,尤其以室旁核明显,提示下丘脑室旁核肾上腺髓质素可能通过维持血压平衡及内环境稳态参与应激致高血压发生的病理生理过程。
- 李霞李良樊明欣王锦沈霖霖朱大年洪震
- 关键词：应激高血压肾上腺髓质素受体下丘脑
- 延髓头端腹外侧区肾上腺髓质素参与中脑导水管背侧周围灰质电刺激诱发防御性心血管反应的调节(英文)
- 2009年
- 本文采用原位杂交、免疫组织化学方法检测了接受足底电击结合噪声应激刺激5天的大鼠延髓、尤其是延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla,rVLM)编码肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)的肾上腺髓质素前肽原(preproadrenomedullin,ppADM)mRNA表达和ADM免疫活性(adrenomedullin immunoreactivity,ADM-IR)变化,并通过电刺激中脑导水管背侧周围灰质(dorsal periaquaductal gray of midbrain,dPAG)诱发防御性心血管反应,以及于rVLM微量注射大鼠ADM(rat adrenomedullin,rADM)及其特异性受体拮抗剂——人肾上腺髓质素(22-52)[human adrenomedullin22-52,hADM(22-52)]相结合的手段研究rVLM中ADM在应激防御性心血管反应中的可能调节作用。结果显示,在闩前1.0～3.0mm之间的延髓组织中ppADM mRNA杂交信号和ADM-IR阳性细胞在rVLM、面神经核分布最多,中缝核、巨细胞背核、舌下神经核和下橄榄核等处尚有中等量阳性细胞,而孤束核较少;应激第5天,应激组rVLM区ppADMmRNA表达和ADM免疫阳性细胞均较对照组明显增加(P<0.01);右侧dPAG电刺激(0.5ms,100Hz)后,正常大鼠动脉压(artery pressure,AP)立即由电刺激前的(116.4±8.9)mmHg升高到(140.0±9.8)mmHg,心率(heart rate,HR)也从电刺激前的(378.0±7.5)beats/min明显加快到(413.0±8.2)beats/min。停止电刺激后AP和HR快速恢复到正常水平;右侧rVLM微量注射1pmol hADM(22-52)后10、20、30min,再给予dPAG电刺激,则由电刺激引起的ΔAP、ΔHR明显降低(P<0.05,P<0.01);rVLM微量注射0.1pmol rADM后10min内引起AP明显升高,在此基础上再给予中脑dPAG电刺激,则给药后60min内由电刺激dPAG引起的ΔAP、ΔHR虽有所增加,但统计学差异无显著性。上述结果提示,大鼠急性足底电击结合噪声刺激引发应激及血压升高伴随rVLM中ADM基因表达和免疫活性的明显增加,并且阻断rVLM中ADM特异性受体可减弱电刺激dPAG引起的应激防御心血管反应。因此,rVLM中ADM可能作为一种重要的�
- 李霞樊明欣李良王锦沈霖霖曹银祥朱大年洪震
- 关键词：延髓头端腹外侧区肾上腺髓质素
- 延髓腹外侧一氧化氮介导电针内关对急性心肌缺血大鼠心功能的作用(英文)被引量：4
- 2004年
- 实验在以乌拉坦和氯醛糖混合麻醉的雄性SD大鼠上进行。结扎左冠状动脉前降支以建立急性心肌缺血(AMI)动物模型。病理学检查显示该模型具有典型的心肌缺血改变。功能学改变包括心率(HR)减慢、平均动脉压(MAP)降低,以及心功能减弱,如左室舒张末压(LVEDP)增大,左室收缩压(LVSP)、左室压变化最大速率(±dp/dt)、左室收缩成分缩短速度(VCE)、心力环总面积(L0)等均明显减小。电针AMI大鼠的内关穴位20 min,可使其HR、MAP、LVEDP、LVSP、±dp/dt、VCE和L0等均明显改善。若电针前于延髓头端腹外侧区(RVLM)微量注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA(0.1 mmol/L,0.1 μl),除HR和MAP外,电针改善AMI心功能的其余各项指标均减弱或被取消,而以等量的生理盐水取代L-NNA被注入RVLM时,则不能影响EA对AMI各项心功能指标的改善作用。以上结果提示电针内关改善AMI的作用由RVLM的一氧化氮(NO)所介导。
- 吕娟秀周培华王锦李霞曹银祥周旭朱大年
- 关键词：急性心肌缺血心功能一氧化氮延髓头端腹外侧区
- 针刺逆转血管紧张素-(1-7)在大鼠延髓尾端引起降压的机制探讨被引量：6
- 2004年
- 目的 研究电针逆转血管紧张素 - (1- 7) [Ang- (1- 7) ]在大鼠延髓尾端腹外侧区 (CVL M)引起血压降低的作用机制。方法 采用中枢核团微量注射和微透析 ,以及高效液相色谱 (HPL C) -荧光检测等技术观察 Ang- (1- 7)及其选择性受体拮抗剂(D- Ala7) - Ang- (1- 7) (Ang- 779)在大鼠 CVL M引起血压改变时氨基酸类神经递质释放的变化以及电针对血压和氨基酸类递质释放的影响。结果 在 CVL M微量注射 Ang- (1- 7)可引起血压降低 ,同时伴该区内兴奋性氨基酸谷氨酸 (Glu)释放增多和抑制性氨基酸牛磺酸 (Tau)释放减少 ;相反 ,在 CVL M微量注射 Ang- 779则可引起血压升高 ,同时伴 Glu释放减少和 Tau释放增多。在相当于人“足三里”穴位电针 2 0 min,可分别抑制在 CVL M微量注射 Ang- (1- 7)或 Ang- 779所引起的血压降低或升高 ,同时也能部分抵消注射 Ang- (1- 7)或 Ang- 779所引起的 Glu、Tau释放的改变。结论 电针逆转 Ang- (1- 7)或 Ang- 779在CVL M引起的降压或升压作用可能与 Glu、Tau释放量的改变有关。
- 王锦沈霖霖曹银祥朱大年
- 关键词：针刺血管紧张素降压机制氨基酸类神经递质
- 慢性应激刺激致高血压大鼠下丘脑肾上腺髓质素特异性受体组件基因表达变化被引量：2
- 2007年
- 目的探讨慢性应激致高血压过程中肾上腺髓质素特异性受体组件降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和受体活性修饰蛋白3在下丘脑的动态变化。方法将48只大鼠分为对照组(18只)和应激组(30只),应激组给予噪声加足底电击刺激,分别在刺激开始后的第1、5、10和第15d以及停止刺激后的第5和第10d处死动物,分离下丘脑,抽提总RNA,用逆转录聚合酶链式反应检测降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和受体活性修饰蛋白3的基因表达变化。结果与对照组相比较,应激组动物降钙素受体样受体基因表达10d内逐渐上调(1.236±0.040比0.941±0.041,P<0.01),而后表达下调,在应激第15d明显低于于对照组(0.860±0.041比0.938±0.042,P<0.05)。受体活性修饰蛋白2mRNA表达在应激第1和第5d显著升高(0.975±0.023比0.880±0.035和1.160±0.045比0.897±0.036,P<0.05或P<0.01),在第5d达到高峰,而后开始下调,在应激第15d和应激结束后5d低于对照组(0.670±0.021比0.897±0.041,0.719±0.039比0.910±0.032,P<0.01)。受体活性修饰蛋白3mRNA表达在应激第1d显著升高(1.197±0.053比0.870±0.039,P<0.01),而后开始逐渐下调,在应激第10、15d后开始明显低于对照组的表达水平(P<0.05或P<0.01)。应激结束后10d受体活性修饰蛋白3mRNA表达水平仍低于对照组,但无统计学差异。结论慢性应激所致血压升高变化过程中伴随下丘脑中肾上腺髓质素特异性受体组件mRNA表达的不同时段特异性改变,提示其可能参与应激致高血压过程。
- 李良李霞樊明欣王锦汪怡朱大年
- 关键词：生理学高血压肾上腺髓质素受体活性修饰蛋白下丘脑
- 高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸被引量：17
- 2005年
- 目的建立快速测定脊髓和脑内氨基酸浓度的方法.方法通过邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生、反相高效液相色谱结合荧光(激发波长280 nm,发射波长340 nm)检测氨基酸浓度.用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH值6.00～6.25)和甲醇(46%)混合液(加入四氢呋喃2%)作流动相,流速为1 ml/min.结果在0.1～40.0 μmol/L范围内,氨基酸浓度与相对峰面积之间的相关系数(r)均值为0.999 2,日内和日间变异系数(CV)分别为2.41%～5.23%、3.51%～6.48%,平均回收率为90.13%～98.47%.结论本法灵敏度高、快速、简便易行,可用于脊髓和脑内氨基酸测定.
- 王锦沈霖霖曹银祥钱源朱大年
- 关键词：氨基酸高效液相色谱-荧光检测法脊髓
