王沛雅
- 作品数：4 被引量：28H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 葡萄霜霉菌诱导华东葡萄抗霜霉病基因cDNA文库构建及EST分析
- 葡萄霜霉病(DownyMildew)是由葡萄霜霉病菌[Plasmoparaviticola(Berk.etCurtis)Berl.etdeToni]引起的真菌性病害。危害几乎遍布全世界所有重要的葡萄栽区，是葡萄的重要病害...
- 王沛雅
- 关键词：华东葡萄霜霉菌CDNA文库构建EST序列霜霉病菌
- 文献传递
- 华东葡萄抗白粉病杂种后代cDNA文库的构建及EST序列分析被引量：7
- 2009年
- 以抗白粉病的华东葡萄杂种后代6-12-4株系为试材,利用SMARTTM技术构建了白粉病病原菌诱导的全长cDNA文库。经检测,原始文库滴度为2.50×106pfu·mL-1,重组率达到99%,扩增文库滴度为3.0×109pfu·mL-1,重组率达到95%,插入片段长度在500～2000bp。随机挑取300个克隆,测序获得260条质量较高的ESTs,聚类及拼接后,共得到183个一致序列(所获序列已经提交GenBank,登录号为FG579859-FG580039)。经蛋白功能预测分析,获得含有TPR结构域的小的富含谷氨酰胺的蛋白、MYB类转录因子、水通道蛋白、富含脯氨酸蛋白、亲环素蛋白、ACI14蛋白、转脂蛋白等抗病相关基因,涉及到植物的信号转导,胁迫诱导,防卫反应等方面。这些EST序列为利用中国野生华东葡萄进行抗白粉病育种研究和利用提供了有价值的抗病基因片段,为丰富世界葡萄属植物抗白粉病基因提供序列数据。
- 朱自果王跃进史江莉王沛雅张朝红
- 关键词：葡萄CDNA文库白粉病
- 中国野生华东葡萄抗霜霉病抑制消减文库构建及初步分析被引量：11
- 2009年
- 【目的】分离和获得中国野生华东葡萄抗霜霉病相关基因片段的EST序列。【方法】以高抗霜霉病的中国野生华东葡萄(V.pseudoreticulata)白河-35-1株系为材料,以田间接种葡萄霜霉菌的幼嫩叶片为处理,以田间自然生长的未接种幼嫩叶片为对照,分别提取RNA,采用抑制消减杂交技术构建抗霜霉病基因的消减正交和反交两个文库,在文库中,选择3个EST序列,用半定量PT-PCR检验构建文库中EST片段的表达情况。【结果】构建的文库中EST片段的大小在150～900bp,经筛选文库,得到正交库有效的ESTs85条,反交库ESTs29条,所获序列经过BLASTn和BLASTx网上序列比对,其中有78条ESTs与GenBank中其它植物相关基因序列有较高的同源性,31条为未知功能序列,已登录GenBank114条ESTs,登录号:FG106789-FG106902。进一步利用半定量RT-PCR对文库中3个基因的表达情况进行了分析,证明这些EST序列是可以表达的。【结论】经初步分析这些序列的功能,涉及抗病信号传导、能量代谢、蛋白质代谢、核酸代谢、光合作用及膜运输和代谢等方面,其中获得与抗病直接相关的ESTs23条,下一步是通过对获得的EST序列进行末端快速分析(RACE)技术,获得抗霜霉病基因全长序列,并进行原核和真核表达研究验证基因全长序列功能,为研究葡萄抗霜霉病的基因提供依据。
- 张建文王跃进朱自果王沛雅张朝红
- 关键词：中国野生葡萄抑制消减杂交霜霉病EST序列
