王孝安
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅科研基金陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠骨髓间充质干细胞分化的神经细胞在体外对C6胶质瘤细胞的趋向性被引量：1
- 2011年
- 目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导分化后的神经细胞在体外对C6胶质瘤细胞的趋向性。方法首先采用梯度离心分离BMSCs,在条件培养基中添加合适诱导因子诱导BMSCs分化为神经细胞,分化后的细胞进行免疫荧光细胞化学分析后与C6胶质瘤细胞采用Transwell培养板共培养,最后对迁移的细胞做统计学分析。结果 BMSC成功诱导分化为神经细胞Nestin(24.3±5.2)%、NSE(33.6±3.8)%和NeuN(41.9±4.7)%,共培养实验显示实验组迁移细胞明显多于对照组迁移细胞(p<0.05)。结论大鼠骨髓间充质干细胞分化后的神经细胞在体外对C6胶质瘤细胞具有明显趋向性。
- 钟俊刘卫平龙乾发刘阳王孝安韩蕊
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经细胞C6胶质瘤细胞
- 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向GABA能神经元分化被引量：3
- 2009年
- 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外向γ-氨基丁酸(GABA)能神经元方向的分化。方法大鼠股骨骨髓分离出BMSCs,培养传代,通过10%胎牛血清(FBS)、20 ng/ml表皮生长因子(EGF)和改良Eagle培养基(DMEM/F12)预诱导24 h,随之加入含10 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10 ng/ml骨形成蛋白-2(BMP-2)和10 ng/ml脑源性神经营养因子(BDNF)作用48 h后,再以10μmol/L全反式维甲酸(ATRA)培养48 h,最后用40 mmol/L KCl刺激15 min完成诱导分化。对照组用10%FBS和DMEM/F12培养不添加任何诱导因子。形态学观察和Western blot对分化后的细胞进行鉴定分析。结果实验组细胞在形态学上表现出典型的神经元样细胞形态,对照组无明显变化;Western blot分析知实验组Ⅰ和实验组Ⅱ都有分化为GABA能神经元的趋势,但实验组Ⅱ的分化率高于实验组Ⅰ。结论BMSCs可在体外分化为GABA能神经元。
- 龙乾发刘卫平玉石刘阳韩蕊王孝安李娟
- 关键词：骨髓间充质干细胞Γ-氨基丁酸能神经元
- 脑室内注射碱性成纤维细胞生长因子治疗大鼠创伤性脑外伤的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨脑室内注射碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对创伤性脑外伤大鼠是否具有治疗作用。方法24只成年SD大鼠按随机数字表法分为治疗组和对照组，采用改良的Feeney氏自由落体撞击方法建立大鼠创伤性脑外伤模型，致伤后24h分别给予脑室内注射bFGF和等量的生理盐水；采用行为测试试验（前肢放置试验、平衡试验）评分观察肢体功能恢复情况；采用免疫组化法，以5．溴脱氧嘧啶尿苷（Brdu）标记神经干细胞，观察并比较两组大鼠致伤后第3、7、14天侧脑室室管膜下区（SVZ）、海马齿状回及损伤区域Brdu阳性细胞的表达。结果治疗组前肢放置试验评分在第3～12天、平衡试验在第3～11天的评分低于对照组，比较差异有统计学意义沪〈0．05）。治疗组双侧SVZ、海马齿状回和损伤区域出现的Brdu阳性细胞数较对照组明显增多，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组损伤侧Brdu阳性细胞数均高于损伤对侧，比较差异有统计学意义俨〈0．05）。行为学评分与Brdu阳性细胞数之间呈负相关关系。结论脑室内注射bFGF有助于创伤性脑外伤大鼠模型内源性神经干细胞的增殖，并能促进其肢体功能的恢复。
- 王孝安刘卫平刘阳玉石龙乾发
- 关键词：颅脑损伤碱性成纤维细胞生长因子
- 神经生长因子与表皮生长因子干预创伤性脑损伤后内源性神经干细胞的增殖被引量：12
- 2012年
- 背景:表皮生长因子、神经生长因子可促进神经干细胞增殖,但对创伤性脑损伤后成年大鼠脑内内源性干细胞的影响研究甚少。目的:观察创伤性脑损伤后神经生长因子和表皮生长因子对内源性神经干细胞增殖的影响。方法:采用改良Feeney氏法自由落体撞击的方法建立大鼠创伤性脑损伤模型,48只大鼠随机抽签法分为4组,外伤后24h分别行神经生长因子、表皮生长因子单独或联合注射,对照组注射等量生理盐水。结果与结论:神经生长因子组、表皮生长因子组和联合组前肢放置实验及平衡实验评分均优于对照组,联合组优于单独治疗组(P<0.05)。单独治疗组和联合组大鼠室管膜下区、海马和损伤区域出现的BrdU阳性细胞数明显多于对照组,联合治疗组多于单独治疗组(P<0.05)。提示创伤性脑损伤后使用神经生长因子、表皮生长因子均可增加大鼠模型内源性神经干细胞的增殖和肢体功能的恢复,而且两种神经营养因子联合应用使这种效果更为明显。
- 刘阳刘卫平王孝安杨扬龙乾发郑朝晖张玉奇钟俊
- 关键词：内源性神经干细胞创伤性脑损伤神经生长因子表皮生长因子
- 不同血清浓度下人骨髓间充质干细胞定向分化为神经元样细胞的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨不同血清浓度对体外诱导人骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的影响。方法采集成人志愿者的骨髓细胞进行体外培养,传至第3代时,分为6组:第一组(无血清诱导组),10ng/mlbFGF+10ng/mlEGF预诱导72h后,0.1umol/LRA、10ng/mlGDNF+10ng/mlBDNF正式诱导,其余各组分别加入1%FBS、2%FBS、5%FBS、10%FBS、20%FBS。在倒置显微镜下每6～8h观察、记录BMSCs的诱导分化情况,并应用荧光免疫组化技术对分化后的细胞进行鉴定。结果各组经正式诱导1d后有部分BMSC开始收缩,加血清组的BM-SC生长速度快,部分细胞出现神经元及神经胶质细胞形态。7d完成分化后,2%血清组NSE显色最多,GFAP最少,而20%血清组NSE显色最少,2%血清组细胞平均分化率为26.5%,20%血清组平均分化率为12.5%。结论体外诱导BMSCs向神经元样细胞分化时,2%血清浓度可起促进作用,而高浓度血清则起抑制作用。
- 玉石刘卫平刘阳龙乾发王孝安陈晓燕李娟
- 关键词：胎牛血清神经元
