王勤
- 作品数:76 被引量:134H指数:8
- 供职机构:苏州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学电子电信更多>>
- 可溶性OX40L蛋白在过敏性紫癜患儿血清中的表达及其临床意义
- 2010年
- 为检测过敏性紫癜患儿外周血清中可溶性OX40L(sOX40L)蛋白的表达水平及其与疾病严重程度的相关性。采用已建立的特异性检测人sOX40L的ELISA试剂盒检测32例过敏性紫癜患儿和25例健康儿童外周血清中sOX40L的含量。结果显示,与健康对照组相比,过敏性紫癜患儿血清中sOX40L呈现高水平表达(P<0.01),且该因子表达水平与患者病情严重程度呈正相关,病情较轻的皮肤型患儿sOX40L含量为(4.42±1.85)ng/ml,病情略重的腹型和关节型患儿其含量分别为(10.83±4.15)ng/ml和(11.47±5.38)ng/ml,而病情最重的肾炎型和混合型患儿其含量则达(18.66±4.06)ng/ml和(20.70±9.44)ng/ml。以上结果表明,sOX40L参与了过敏性紫癜的发生和发展,可能是导致患儿体内免疫功能紊乱的原因之一。
- 王勤陈永井李晓忠闵月吴鸿雅张雪琨张学光
- 关键词:SOX40L过敏性紫癜免疫功能紊乱ELISA
- 人B7-H4基因转染细胞的构建及其对T细胞的共刺激效应的初步研究被引量:7
- 2005年
- 目的构建含有人B7H4基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达B7H4基因的L929细胞并初步研究其对T细胞的共信号作用及可能机制。方法从含人B7H4基因的cDNA序列FLJ22418中,采用PCR扩增出B7H4全长基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZHATerm,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达B7H4蛋白的L929细胞株;采用免疫荧光标记和流式细胞仪分析免疫分子的表达、3HTdR掺入检测细胞增殖以及ELISA测定细胞因子的水平。结果构建了含人B7H4基因的重组逆转录病毒载体和获得含有B7H4基因的重组病毒,筛选获得能稳定高表达人B7H4蛋白的L929转基因细胞;该转基因细胞对T细胞体外具有抑制增殖、活化和细胞因子分泌的作用。结论构建了稳定表达人B7H4蛋白的细胞株,B7H4分子在体外通过抑制T细胞分泌IL2和促进其凋亡作用可显著地下调T细胞功能的效应。
- 毛一香王勤陈洁陈永井施勤杨明峰李文香张学光
- 关键词:B7-H4逆转录病毒T细胞功能基因转染细胞重组逆转录病毒载体
- 两株鼠抗人B7-DC单克隆抗体的研制及其生物学特性的初步鉴定
- 目的:研制特异性鼠抗人B7-DC单克隆抗体,并鉴定其生物学特性。方法:以高表达人B7-DC分子的L929/B7-DC基因转染细胞株为免疫原,常规免疫6-8周龄的雌性BALB/c小鼠,前后共加强免疫四次,利用B淋巴细胞杂交...
- 陈永井王勤代群马泓冰於葛华张学光
- 文献传递
- OX40分子在Graves’病外周Tfh细胞上的表达特性及其生物学作用
- 目的 :研究Graves’病患者外周血中Tfh细胞、OX40以及OX40L分子的表达情况,探索OX40分子与Tfh细胞各亚群之间的关系,及OX40/OX40L信号对Tfh细胞的作用。方法 :利用流式细胞术检测Graves...
- 黄丹付朝阳王勤
- 关键词:TFHOX40/OX40L
- 文献传递
- PD-1/PD-L1在T细胞上的共表达及其生物学意义
- 目的:研究共刺激分子PD-1和PD-L1在T细胞上的共表达,并探讨其生物学意义。方法:利用本所自行研制的抗人PD-1(5F10)和抗人PD-L1(2H11)单克隆抗体通过流式细胞术分析该对分子在多种肿瘤细胞株上的表达情况...
- 陈永井王勤周迎会王雪峰谢芳於葛华张学光
- 关键词:PD-1PD-L1共表达共刺激信号
- 文献传递
- OX40/OX40L分子在人活化T细胞上的表达特性及其生物学功能研究被引量:2
- 2016年
- 目的分析OX40/OX40L分子在人活化T细胞上的表达特性及其生物学意义。方法采用激发型抗人CD3单抗、激发型抗人CD3单抗联合抗人CD28单抗、植物血凝素(PHA)以及抗原负载树突状细胞(DC)4种不同活化方式激发人T细胞,通过流式细胞仪和RT-PCR从蛋白水平和mRNA水平检测不同亚群T细胞上OX40和OX40L的表达;通过CCK-8法检测体外混合淋巴细胞反应。结果通过激发型抗人CD3单抗、激发型抗人CD3单抗联合抗人CD28单抗、PHA等非特异方式激发健康人外周血T细胞后,CD4^+和CD8^+T细胞上OX40和OX40L均呈短暂表达,而DC特异激发后上调表达的OX40和Ox40L则呈低水平持续表达,而且只表达在CD4^+T细胞上。混合淋巴细胞反应结果显示健康志愿者T细胞活化24h后表达的OX40L能激发同种异体或自体活化T细胞上表达的OX40,从而促进T细胞增殖。结论特异和非特异方式活化的T细胞均能上调表达OX40和OX40L,但在表达水平、持续时间、表达的T细胞亚群上有所差异,且上调表达在T细胞上的OX40和OX40L具有生物学功能,能相互结合促进自身或邻近T细胞的增殖。
- 周杨刘诚林刘俊逸王勤
- 关键词:T细胞OX40OX40L
- 一株鼠抗人BTLA单克隆抗体的研制及其生物学功能的初步研究
- 目的:共信号分子CD28超家族成员中抑制性受体除了CTLA-4和PD-1,BTLA是新近发现的又一个共抑制受体分子。研制鼠抗人BTLA功能性单克隆抗体为进一步探讨BTLA介导的负性信号对人T淋巴细胞活化、增殖的调控作用及...
- 王雪峰陈永井王勤代群杨科芳张学光
- 关键词:BTLA单克隆抗体杂交瘤
- 文献传递
- 人4-1BBL转基因细胞株的构建及其生物学功能的研究被引量:1
- 2006年
- 目的为探讨人4-1BBL分子的生物学功能,构建人4-1BBL转基因细胞株。方法利用RT-PCR方法克隆人4-1BBL全长基因,继而重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。重组逆转录病毒载体pEGZ-Term/4-1BBL与两个辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的转基因细胞。3H-TdR掺入实验分析4-1BBL转基因细胞对T细胞增殖的影响,ELISA法分析细胞因子的分泌。结果流式细胞仪表型分析结果表明,L929/4-1BBL转基因细胞稳定表达人4-1BBL分子。体外实验表明,L929/4-1BBL细胞能够促进T细胞活化、增殖及IL-2、IL-6和IFN-γ的分泌。结论该研究成功克隆了人4-1BBL基因,构建了能稳定表达4-1BBL分子的转基因细胞株L929/4-1BBL,该株转基因细胞能提供有效的4-1BBL共刺激信号,促进T细胞活化、增殖及细胞因子的分泌。
- 居颂文居颂光仇红霞胡玉敏王凤鸣王明元王勤张学光
- 关键词:4-1BBL转基因细胞T细胞
- 一种人可溶性B7-DC定量检测试剂盒
- 本发明公开了一种可定量检测可溶性B7-DC的试剂盒,包括:本辣根过氧化物酶标记、反应底物四甲基联苯胺、牛血清白蛋白、酶标板、洗液和终止液,其特征在于,所述试剂盒还包括:包被抗体、标准品蛋白和检测抗体,其中,所述包被抗体为...
- 陈永井张学光王勤白利雄施敏骅柏发蕊
- CD40配基化的肿瘤特异性树突状细胞介导Th1细胞分化的研究
- 2006年
- 目的:探讨CD40配基化的肿瘤特异性DCs在介导Th1细胞分化中的作用。方法:采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导小鼠髓系DCs,并利用mCD40L-CHO和TNF-α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载的DCs制备DCs瘤苗;3H-TdR掺入试验检测DCs对T淋巴细胞的促增殖效应;ELISA测定细胞培养上清中IL-10、IFN-γ、IL-12的含量;胞内染色和流式细胞术检测经成熟DCs活化的T细胞中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T的比例。结果:体外刺激T细胞增殖能力在CD40配基化DCs组最高(P<0.05),CD40配基化DCs能更有效地促进活化T细胞分泌IFN-γ和介导CD4+IFN-γ+T细胞的分化(P<0.05),同时,CD40配基化DCs分泌IL-12的量也明显高于TNF-α组(P<0.05)。结论:CD40配基化的肿瘤特异性DCs体外能有效介导Th1细胞的分化。
- 陈成朱一蓓瞿秋霞周桓王勤於葛华李文香张学光
- 关键词:树突状细胞CD40TH1细胞