王乐乐
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 华根霉(Rhizopus chinensis)脂肪酶基因的克隆和表达
- 脂肪酶(Lipase E.C.3.1.1.3)是一类特殊的酯酶,全称三酯酰甘油酰基水解酶(Triacylglycerol acylhydrolase),不仅能催化油脂水解,也能在非水相中催化酯合成反应、转酯化反应、酸解反...
- 王乐乐喻晓蔚徐岩
- 关键词：华根霉脂肪酶克隆毕赤酵母
- 文献传递
- 华根霉(Rhizopus chinensis)前导肽脂肪酶基因的克隆及其在Pichia pastoris中的表达被引量：8
- 2009年
- 通过3次PCR程序克隆得到了华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)脂肪酶全基因序列,该基因的开放阅读框长1170bp,不含内含子,编码一个389个氨基酸残基的蛋白质,包括26个氨基酸的信号肽,94个氨基酸的前导序列和269个氨基酸的成熟肽,其推断的氨基酸序列与一些已报道的根霉脂肪酶序列同源性为86%。在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中分泌表达前导肽序列。SDS-PAGE分析表明表达蛋白的分子量约37kD。N-端氨基酸序列分析表明该重组蛋白分泌过程中前导序列N-端的67个氨基酸被切割掉,表达的重组脂肪酶由前导序列C-端的27个氨基酸和成熟肽的269个氨基酸组成。发酵132h后上清中重组脂肪酶的表达量最高,蛋白含量约5.4mg/mL,橄榄油乳化法测水解酶活为161U/mL,其比活比野生型华根霉脂肪酶高约43倍。
- 王乐乐喻晓蔚徐岩
- 关键词：华根霉脂肪酶克隆毕赤酵母
