柴玉波
- 作品数:89 被引量:351H指数:11
- 供职机构:第四军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 新基因Restin的克隆及比较生物学分析被引量:12
- 2002年
- 采用PCR介导的减法杂交技术,从全反式维甲酸诱导的HL-60细胞中克隆得到一新基因,该基因编码219个氨基酸.借助生物信息学分析技术,发现该基因表达蛋白与神经细胞生长抑制因子(Necdin)的功能结构域高度同源(49%),均为碱性蛋白,命名为Restin(细胞静息相关蛋白).更有意义的是,同源搜索发现Restin,Necdin和Mages(黑色素瘤相关抗原家族)为同一蛋白家族,提示Restin和Mages是两类具有某种联系而功能又不同的蛋白质.对所有这些蛋白进行综合分析发现,它们分别属于两个不同的亚家族,碱性蛋白家族和酸性蛋白家族,其中Restin,Necdin和Mage D1含有碱性同源结构域(理论pI为8.6~10.1),主要在终末分化细胞中表达,在肿瘤组织极少表达或不表达,实验结果表明,Necdin可以与转录因子(E2F1)及p53相互作用,从而抑制细胞增殖,推测此类蛋白可能与细胞静息状态相关;而 Mage A,C等表现为酸性同源结构域(理论pI为4.2~4.9),主要在肿瘤组织和胎儿组织中表达,推测此类蛋白可能与细胞增值有关.这两类蛋白是否构成一对与细胞周期调控相关的正负系统值得进一步深入研究.
- 赵忠良路凡朱峰杨辉柴玉波陈苏民
- 关键词:基因克隆生物信息学
- RNA干扰对过表达Hlrg的Hep G2细胞的影响
- 2006年
- 为观察RNA干扰对过表达Hlrg蛋白的Hep G2细胞的影响,构建了封闭Hlrg基因表达的shRNA表达载体pAVU6+27-Hlrg,将pAVU6+27-Hlrg稳定转染到过表达Hlrg蛋白的Hep G2细胞中;分别用相差倒置显微镜、FCM、SABC-FITC、RT-PCR、Western blot等观察细胞改变。测序结果表明pAVU6+27-Hlrg构建成功;针对Hlrg的RNA干扰已完成;相差倒置显微镜发现细胞突起增加;FCM显示干扰组G1期明显缩短。针对Hlrg的RNA干扰能促进过表达Hlrg蛋白的Hep G2细胞的生长。
- 杜可军常文辉侯立朝骆文静陈苏民刘承利陈景元柴玉波
- 关键词:RNA干扰过表达HEP
- Angiostatin K(1-3)基因的原核表达和蛋白活性测定
- 2001年
- 目的 获得angiostatinK(1 3)基因的原核表达蛋白 ,检测其活性。方法 构建和鉴定pBV2 2 0 AK(1 3)载体并在大肠杆菌DH5α内表达 ,诱导后用SDS PAGE分析、经亲和层析纯化后行WesternBlot鉴定 ,以牛微血管内皮细胞抑制实验和鸡胚绒毛膜尿囊膜实验验证其生物学活性。结果 获得抑制牛微血管内皮细胞生长活性的angiostatinK(1 3)原核表达蛋白 ,其蛋白重量占菌体总蛋白的 7%。
- 吴景文章翔高大宽易声禹屈延荆俊杰柴玉波粱景文
- 关键词:ANGIOSTATIN抗血管生成蛋白活性原核表达血管抑素
- 人骨形成蛋白7成熟肽cDNA的克隆和序列测定被引量:2
- 2000年
- 王琦柴玉波李毅陈南春薄勤陈苏民
- 关键词:骨形成蛋白-7克隆CDNA
- 核心蛋白聚糖的分离、纯化及活性鉴定被引量:12
- 1999年
- 为研究、开发治疗肺、肝等纤维化疾病的一种天然白蛋白多糖——核心蛋白聚糖(Decorin),综合归纳了国外研制Decorin的技术、方法,供从事Decorin研究及有兴趣开发Decorin新药的科技人员或制药公司参考。
- 王国华柴玉波何鹏陈南春陈志阳刘新平
- 关键词:核心蛋白聚糖博来霉素胶原蛋白
- Bc-l2核酶诱导SMMC7721细胞凋亡与p16,p21蛋白表达的关系研究被引量:2
- 2000年
- 目的 观察bcl 2核酶对人肝癌细胞株SMMC 772 1细胞的作用 ,并检测 p16和 p2 1的表达情况。探讨bcl 2核酶在肝癌治疗中的意义。方法 经脂质体介导的方法 ,将PMTr neo (正向bcl 2核酶真核表达载体 )导入SMMC772 1细胞中。细胞克隆转移扩大培养后 ,采用TUNEL法、免疫组化技术结合图像分析 ,在检测SMMC772 1/PMTr neo细胞凋亡的同时 ,检测 p16 ,p2 1的表达。结果 与对照组相比较 ,在bcl 2核酶诱发SMMC772 1细胞发生凋亡的同时 ,p16和 p2 1基因的表达水平显著增高。结论 bcl 2核酶通过封闭bcl 2的表达可促进SMMC772 1细胞凋亡 ,同时伴发 p2 1和
- 张传山王文亮彭玮丹胡沛臻柴玉波赵一岭
- 关键词:核酶P16P21
- hOP-1全长基因在CHO细胞的表达及活性检测
- 2007年
- 目的对hOP-1全长基因在真核CHO细胞的表达产物进行鉴定及活性检测,为临床和科研工作获得稳定高活性OP-1蛋白质提供依据。方法采用ELISA、SDS-PAGE和Western Blot免疫印迹法鉴定目的基因表达产物;并进行表达产物小鼠肌肉内埋置活性成骨实验。结果经ELISA、SDS-PAGE、Western Blot鉴定筛选,得到稳定表达hOP-1的CHO细胞株。小鼠肌肉内埋植实验,证实有骨细胞形成。结论hOP-1全长基因转染真核CHO细胞,表达产物rhOP-1具有良好的生物学活性。
- 岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英
- 关键词:CHO细胞生物学活性
- 血小板生成素基因功能区段的体外扩增与序列测定
- 1997年
- 目的:获取具有功能的血小板生成素基因区段.方法:以正常肝组织mRNA为模板,聚合酶链反应扩增所需目的cDNA,克隆入pUC19中,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列.结果:PCR扩增得约480bp片段,经测序证实为血小板生成素功能区段基因.结论:已得到所需血小板生成素功能区段基因.
- 柴玉波赵忠良刘慧萍陈苏民
- 关键词:血小板生成素克隆聚合酶链反应基因功能
- bcl-2核酶对SMMC7721细胞端粒酶活性的影响作用被引量:11
- 2001年
- 目的 观察 bcl- 2核酶对 SMMC- 772 1细胞的作用 ,探讨 bcl- 2表达水平的改变对细胞端粒酶活性的影响 .方法 经脂质体介导的方法将 PMTr- neo(正向 bcl- 2核酶真核表达载体 )导入 SMMC772 1细胞中 ,细胞克隆转移扩大培养后 ,采用 TU NEL,TRAP- PCR- EL ISA,免疫组化技术结合图像分析技术检测 SMMC772 1/ PMTr- neo细胞凋亡、细胞端粒酶活性及 P16 ,P2 1的改变 .结果 较对照组 SMMC772 1/PMTr- neo细胞 Bcl- 2表达水平显著下降 ,伴有显著细胞凋亡现象 ;同时端粒酶活性下降 ,P16 ,P2 1表达水平显著增加 .结论 bcl- 2核酶可促进 SMMC772 1细胞发生凋亡 ,并降低细胞端粒酶活性 ,提示 Bcl- 2表达水平的改变对细胞端粒酶活性有一定的影响 .
- 张传山王文亮彭玮丹胡沛臻柴玉波张衍国
- 关键词:肝肿瘤脱噬作用SMMC7721细胞端粒酶基因治疗
- 野生型MTS1基因导入对人膀胱癌细胞系生长抑制作用的研究被引量:3
- 1997年
- 通过逆转录病毒载体将外源野生型MTS1基因导入该基因功能丧失的人膀胱癌细胞系T24中,结果发现,转染MTS1基因的膀胱癌细胞的生长速率减低,流式细胞仪检测显示S期指数及增殖指数明显降低,电镜观察显示超微结构出现生长抑制特征,接种裸鼠无致瘤性。
- 袁建林惠宏襄王建波王建波于茂生柴玉波邵国兴邵国兴王中琨
- 关键词:野生型MTS1基因基因疗法