林纪胜 作品数:16 被引量:111 H指数:6 供职机构: 阿拉巴马大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 “重大新药创制”科技重大专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人血清抗肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG定量ELISA方法的建立与验证 被引量:9 2013年 目的建立WHO推荐的检测人血清抗肺炎链球菌 ( Streptococcus pneumoniae )荚膜多糖抗体IgG定量ELISA(PnPSELISA)。方法依照WHO推荐的Pn PS ELISA标准操作要求,优化荚膜多糖的包被浓度,筛选合格的ELISA板和二抗;在检测WHO参考实验室提供的质量控制血清验证实验条件的基础上,分别在WHO参考实验室和兰州生物制品研究所有限责任公司(LIBP)实验室检测16份由LIBP制备的质控血清中抗13种肺炎链球菌血清型(1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F)的荚膜多糖IgG抗体浓度。同时,在LIBP实验室建立了实验室内部质控血清907的检测范围,并评价了LIBP实验室实验间检测值的精确度。结果在WHO参考实验室和LIBP实验室分别检测的16份LIBP质控血清的抗13种肺炎链球菌血清型荚膜多糖IgG抗体浓度具有良好的相关关系(slope=0.94,r=0.97,P〈0.05)。LIBP实验室的检测值有81%落在WHO参考实验检测值±40%范围内,符合评价实验室之间所用方法的75%的数据在±40%的检测值范围内的标准。建立了LIBP实验室内部质控血清907的抗13种肺炎链球菌血清型荚膜多糖抗体IgG的检测值范围。LIBP实验室质控血清的各血清型IgG抗体浓度的实验间检测值的变异系数(CV)均〈30%。结论LIBP实验室成功建立了WHO推荐的检测人血清中抗肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG定量ELISA方法,并确定了LIBP实验室日常用质控血清907的检测值范围。 王欣茹 石继春 林纪胜 李茂光 王春娥 刘方蕾 叶强 赵志强 谢贵林关键词:肺炎链球菌 酶联免疫吸附试验 23价肺炎链球菌多糖疫苗和13价肺炎链球菌结合疫苗在成年人中的应用 被引量:7 2015年 肺炎链球菌是引起全球不同年龄人群,尤其是幼儿和老年人肺炎、败血症和脑膜炎等严重疾病的重要病原菌,由肺炎链球菌导致的这些疾病可以通过疫苗进行预防.在将肺炎链球菌疫苗纳入国家免疫计划的国家,儿童肺炎链球菌病的发病率以及疫苗型肺炎链球菌的携带率大大降低,且可在未免疫人群中产生间接保护作用.此文对23价肺炎链球菌多糖疫苗和1 3价肺炎链球菌结合疫苗在成年人中的应用进行探讨. 朱朗 陈磊 林纪胜 高强 王见冬 王新立 蔡芳关键词:接种 1993年云南省瑞丽等地吸毒者艾滋病病毒感染定群研究 被引量:23 1994年 1993年3月对已建立一年的吸毒者定群研究现场──云南省德宏州瑞丽市、陇川县及潞西县再次进行调查。本次调查755例吸毒者及102例配偶。从1992年进入定群研究HIV阴性的89例静脉吸毒者中,1993年又采到血样有54例,其中9例血清转阳。瑞丽市、陇川县及潞西县1992年和1993年静注者血清阳转率(/百观察人年)分别为43.2%及40.0%,12.2%及12.2%,0%及0%。1993年新进入定群研究的116例静注者中,采集到血样的有104例,发现HIV阳性38例。上述三市县1992年及1993年入定群研究的静注者的HIV感染率分别为81.8%及85.7%,44.6%及40.0%,5.1%及0%。可以看出血清阳转率的高低与HIV感染率高低相吻合。HIV阳性者的配偶1990、1992及1993年的HIV感染率分别为3.1%、9.8%和7.4%,有上升趋势。潞西县HIV阳性者少,静脉注射出现时间晚,但近年来静脉吸毒者比例上升快,值得注意。 郑锡文 张家鹏 曲书泉 程何菏 林纪胜 段松 陈艳麟 段一娟 李大勤 李志荣 张桂云 寇静冬 陈钧 潘颂峰 田春桥 张勇 金莉关键词:吸毒 静脉 艾滋病 艾滋病毒 A、C、Y、W135群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法的建立及其验证 被引量:1 2014年 目的建立A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法 (serum bactericidal assay,SBA),并进行验证。方法对SBA中活菌收获时间、靶菌的制备、反应时间及补体进行优化,并确定质控血清Men10的质控范围。对优化后的方法进行特异性、线性、精密度验证。结果确定A600值为0.5~0.8时为收获细菌最佳收获时间;冻存菌种可替代新鲜制备菌种作为靶菌;最佳杀菌反应时间为60 min;17830和84321N批补体均可用于试验。质控血清Men10的质控范围A群为521~4 689,C群为1 047~9 423,W135群为1 779~16 008,Y群为1 416~12 741。A、C、W135和Y同群多糖吸收血清样品后能够抑制≥80%的同群SBA滴度,而异群多糖则<20%;血清样品稀释倍数与对应的SBA滴度呈显著负相关,斜率在-0.90^-1.10之间,Pearson相关系数在0.90~1.0之间,P均<0.001;同一实验内相同样品检测结果 CV≤25%,实验间相同样品的95%的检测结果落在检测值中位数3倍(一个稀释度)的范围内,CV≤40%,不同实验室间相同样品的检测结果至少有70%落在美国CDC公布结果的3倍(一个稀释度)范围内。结论建立了标准化的具国际间可比性的A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌SBA,该方法特异性、线性和精密度良好。 乔瑞洁 赵志强 王浩 王欣茹 刘佳 刘方蕾 吴兵 于旭博 林纪胜 李亚南 叶强 谢贵林关键词:脑膜炎奈瑟菌 b型流感嗜血杆菌疫苗及新型疫苗或联合疫苗的免疫原性评价方法 2015年 b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza type b,Hib)是全球范围内引起3个月到5岁龄儿童肺炎、脑膜炎和败血症等严重疾病的重要病原菌。接种疫苗是唯一有效的预防和控制Hib引起疾病的公共卫生措施,将Hib结合疫苗纳入儿童常规免疫程序的国家,Hib发病率和携带率均明显降低。本文现对Hib疫苗种类、免疫学特性、临床效力以及Hib新型疫苗或联合疫苗的免疫原性评价方法作一综述。 朱朗 刘一非 陆玮 林纪胜 高强 蔡芳关键词:B型流感嗜血杆菌 疫苗 免疫原性 人血清中A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖IgG抗体含量ELISA检测方法的建立 被引量:1 2014年 目的建立人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖Ig G抗体含量的ELISA定量检测方法,并进行验证。方法筛选适用的酶标板,优化抗原包被浓度,确定ELISA检测过程的关键条件,对建立的ELISA方法的特异性、线性、准确性、精密度、最低检测值和稳定性进行验证,并建立实验室质控血清的质控检测范围。结果酶标板的板内CV为9.8%,板间CV为16.4%,符合检测使用要求。免疫血清经多糖吸收后,群特异性抗体含量与同群多糖吸收剂量呈明显的剂量依赖关系。12份美国CDC质控血清中各群Ig G抗体含量与血清的稀释度呈负相关,相关系数(r)和斜率(slope)均接近-1,线性关系良好;检测结果与CDC公布数据一致性良好,一致性相关系数A、C、W135、Y群分别为0.912 5、0.939 6、0.963 7和0.920 6,准确度较好。实验室内部质控血清Men20中各群Ig G抗体含量试验内和试验间精密度分别小于10%和20%,精密度较好;各血清群别的CV值均〈30%,稳定性较好;A、C、Y、W135群多糖Ig G抗体含量最低检测值分别为0.092、0.118、0.067和0.035μg/ml,质控血清的检测范围分别为:92.49~36.53、37.29~17.69、66.18~25.54和50.15~23.31μg/ml。结论建立了标准化的检测人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖Ig G抗体含量的定量ELISA方法,并确定了实验室日常用质控血清Men20的质控检测值范围。 王欣茹 赵志强 李亚南 刘方蕾 于旭博 孔素娟 范锋锋 林纪胜 叶强 谢贵林关键词:脑膜炎球菌 荚膜多糖 酶联免疫吸附试验 志贺氏菌双价疫苗候选株DOM3的残余毒力、免疫原性和保护力 1999年 目的研制多价、安全、高效和无抗生素抗性的志贺氏菌疫苗。方法利用动物模型,评价志贺氏菌双价(S.flexneri2a-S.dysenteriaeI)疫苗候选株DOM3的残余毒力、免疫原性和保护力。结果DOM3的残余毒力分别比野生型毒株S.flexneri2a301和S.dysenteriaeI112低120倍和57倍(昆明系小鼠),873和195倍(SPFBALB/c小鼠)。DOM3丧失了侵袭上皮细胞的能力。DOM3具有和S.flexneri2a301几乎相同的免疫原性,但较S.dysenteriaeI112的免疫原性略差。皮下免疫小鼠血清中特异性抗体IgA、IgG滴度峰值出现在最后一次皮下注射的第2周,而IgM滴度峰值出现在第1周,然后滴度逐步下降,在6周后趋于稳定。血清中同时具有抗S.flexneri2a菌和抗S.dysenteriaeI菌的抗体,且其滴度变化的趋势基本一致。使用昆明系小鼠,以30LD50(6.13×107CFU)的野生型毒株S.flexneri2a301和21LD50(6.26×107CFU)野生型毒株S.dysenteriaeI112攻击,保护率分别为90%和70%;使用SPFBALB? 林纪胜 徐建国关键词:志贺氏菌 免疫原性 疫苗 保护力 HL-60分化细胞表面标志、活性及其对肺炎链球菌调理吞噬杀菌能力的动态变化 被引量:7 2012年 目的分析HL-60分化细胞的表面标志、活性及其对肺炎球菌调理吞噬杀菌能力的动态变化。方法以流式细胞仪连续监测分化1~7 d的HL-60细胞表面标志CD11b、CD35和CD71的表达以及活细胞、凋亡细胞和死亡细胞的比例,同时用09CS、QC2、B、C和F 5份质控血清以调理吞噬杀菌试验检测肺炎链球菌血清型6B、7F、14和23F的杀菌滴度。结果分化3~6 d的HL-60细胞表面标志、活细胞比例可达到实验室要求,5份质控血清的调理吞噬杀菌滴度稳定而且在质控范围之内。结论分化3~6 d的HL-60细胞可以用于评价肺炎链球菌疫苗免疫血清的调理吞噬杀菌试验,为调理吞噬杀菌试验的建立和标准化提供了依据。 王浩 乔瑞洁 史晓玲 林纪胜 谢贵林 赵志强关键词:HL-60细胞 分化 细胞表面标志 肺炎链球菌 A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗对5~59岁健康人群的免疫原性再评价 被引量:4 2014年 目的:对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗在5~59岁健康人群中的免疫原性进行再评价。方法对2005年在广西河池市进行的临床试验中采集的血清,采用国际标准化的酶联免疫吸附试验(ELISA)和血清体外杀菌试验(SBA)方法检测血清中抗A群C群脑膜炎球菌荚膜多糖的特异性IgG抗体含量和对A群C群脑膜炎球菌的抗体杀菌功能。结果免疫前、后,A群血清中抗荚膜多糖特异性IgG抗体平均几何浓度(GMC)分别为23.66μg/ml和78.83μg/ml (P<0.05),C群分别为1.23μg/ml和51.25μg/ml (P<0.05);免疫前、后血清中抗荚膜多糖IgG抗体浓度≥2μg/ml的比例,A群分别为99%和100%(P>0.05),C群为20%和99%(P<0.05);免疫后较免疫前抗荚膜多糖IgG抗体浓度≥4倍升高的比例,A群为34%和C群为100%。免疫前、后血清中针对脑膜炎球菌的杀菌抗体平均几何滴度(GMT),A群分别为1164和5530(P<0.05),C群分别为4和6225(P<0.05);免疫前、后血清杀菌抗体GMT≥128的比例,A群分别为91%和99%(P>0.05),C群分别为14%和96%( P<0.05);免疫后较免疫前血清杀菌抗体滴度≥4倍升高的比例分别为A群53%和C群100%。免疫前、后血清中抗荚膜多糖IgG抗体浓度和杀菌抗体滴度之间的Pearson相关系数,A群分别为r=0.15和r=0.23,C群r=-0.14和r=0.58(P<0.05)。结论本研究以标准化检测方法产生的具体免疫原性数据,证明A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗良好的免疫原性。 赵志强 乔瑞洁 王欣茹 王浩 杨进 权怡 史晓玲 刘佳 林纪胜 谢贵林关键词:免疫原性 酶联免疫吸附试验 不同来源HL60细胞用于调理吞噬杀菌试验的比较 被引量:1 2013年 目的通过比较不同来源的HL60细胞分化后细胞的表面标志、活性及其对肺炎链球菌调理吞噬杀菌指数的动态变化,评价HL60细胞的来源对肺炎链球菌调理吞噬杀菌能力的影响。方法使用流式细胞仪连续监测来源于美国ATCC和中国科学院上海细胞研究所的HL60细胞在分化后1~7d的表面标志CDllb、CD35和CD71的表达情况,并观察活细胞、凋亡细胞和死亡细胞的比例;同时使用两种不同来源的细胞检测09CS和B两份质控血清对肺炎链球菌血清型6B、7F、14和23F菌株的调理吞噬杀菌指数,同时观察09CS对13价结合疫苗血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F菌株的调理吞噬杀菌指数。结果两种不同来源HL60细胞分化3~6d细胞的表面标志、活细胞比例均可达到国际实验室的要求指标;两份质控血清对检测菌株的调理吞噬杀菌指数均能稳定于质控范围之内;两种细胞检测的09CS对13价肺炎链球菌结合疫苗血清型菌株的调理吞噬杀菌指数具可比性。结论两种来源不同的HL60细胞分化3-6d均能用于评价肺炎链球菌疫苗免疫血清的调理吞噬杀菌试验,这为调理吞噬杀菌试验及其标准化在国内的建立提供了便利。 王浩 乔瑞洁 刘佳 王欣茹 林纪胜 谢贵林 赵志强关键词:HL60细胞 分化 细胞表面标志 肺炎链球菌