李慧
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北京军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mCD20-腺病毒载体的构建
- 2007年
- 目的:构建编码鼠CD20(mCD20)基因的腺病毒载体,即AdmCD20重组质粒,为后续将其感染DC作为疫苗免疫小鼠做准备工作,为CD20基因治疗淋巴瘤的研究奠定基础。方法:实验于2006-03/2007-04在解放军北京军区总医院血液科实验室完成。运用分子生物学技术,利用本实验室保存的mCD20,以PCR凝胶电泳、酶切进行鉴定后,将该基因cDNA片段插入腺病毒穿梭质粒pDC315中,转化至高效感受态DH5a细菌细胞中进行扩增,提取质粒,获得重组质粒腺病毒穿梭质粒pDC315-mCD20,然后采用Ad MaxTM腺病毒载体包装体系,构建Ad5/35mCD20。结果:顺序成功重组pcDNA3.1-mCD20质粒,腺病毒穿梭质粒pDC315-mCD20,然后采用Ad MaxTM腺病毒载体包装体系成功构建编码鼠CD20基因的腺病毒载体。结论:表达mCD20基因的腺病毒载体构建成功,此方法准确可行,为后续实验奠定基础。
- 李慧刘兵王友臣谭晓华
- 关键词：腺病毒穿梭质粒CD20重组质粒基因治疗
- mCD20-腺病毒穿梭质粒pDC315的构建
- 2007年
- 目的:构建腺病毒穿梭质粒pDC315-mCD20重组质粒,为探讨编码mCD20基因的腺病毒载体做好准备,为CD20基因治疗淋巴瘤的研究奠定基础。方法:采用RT-PCR方法将CD20基因克隆出来,通过分子生物学技术构建过渡质粒pcDNA3.1-mCD20质粒,用PCR、酶切进行鉴定后,将该基因cDNA片段插入腺病毒穿梭质粒pDC315中,转化至高效感受态DH5a细菌细胞中进行扩增,提取质粒,获得重组质粒腺病毒穿梭质粒pDC315-mCD20。结果:经分析鉴定,重组质粒中含有mCD20基因,达到实验预期目的。结论:成功构建表达mCD20基因的重组质粒腺病毒穿梭质粒pDC315-mCD20,有助于后续研究构建腺病毒载体AdmCD20。
- 李慧刘兵王友臣谭晓华
- 关键词：腺病毒科质粒基因治疗
- 重组鼠CD20腺病毒载体感染的树突状细胞诱导小鼠抗肿瘤免疫的研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨复制缺损型腺病毒载体(adenovirus,Ad)介导的鼠CD20修饰的树突状细胞(dendritic cells,DCs)诱发抗肿瘤免疫的效果。方法:用AdmCD20感染小鼠骨髓来源的DC后,免疫C57BL/6小鼠,7d后取脾细胞行乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验,检测特异性CTL杀伤活性;并给免疫小鼠接种经过筛选后表达mCD20基因的B16/F10肿瘤细胞,观察荷瘤小鼠成活情况。结果:AdmCD20/DCs免疫小鼠1周后其细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性明显强于对照组(E∶T=100∶1,t=15·3354,P<0·01;E∶T=50∶1,t=14·2327,P<0·01;E∶T=10∶1,t=8·7444,P<0·01)。AdmCD20/DCs免疫小鼠1周后接种2×105个mCD20-B16/F10肿瘤细胞,2个月后仍有50%的小鼠无肿瘤生长;而对照组3周时全部有瘤生长,χ2=8·571,P<0·01。结论:AdmCD20修饰的DCs能有效地打破机体对肿瘤的免疫耐受,诱发强烈的抗原特异性细胞免疫应答。
- 王友臣谭晓华刘兵李慧王芳
- 关键词：腺病毒科树突细胞淋巴瘤
- Ad5/35 mCD20载体的构建及鉴定
- [目的]：B细胞来源的淋巴瘤是淋巴瘤中最常见的一种类型，而免疫治疗在该类型淋巴瘤的治疗中具有重要的作用;编码肿瘤相关抗原腺病毒载体感染树突状细胞(Dendriticcells，DC)是一种很有前景的肿瘤疫苗。然而，目前常...
- 李慧
- 关键词：淋巴瘤免疫治疗腺病毒载体肿瘤疫苗
- 文献传递
- 以树突状细胞为基础的血液恶性肿瘤免疫治疗研究进展
- 2007年
- 机体的免疫应答，是抗原递呈细胞（antigenpresenting cell，APC）首先捕获抗原，经过加工处理后将抗原信号传递给T细胞和B细胞。引发一系列的免疫反应。树突状细胞（dentritic cell，DC）是已知的功能最强的专职APC，能够摄取抗原，还可以摄取和转运抗原的特殊膜受体，同时能高效摄取低浓度抗原，是促进T、B淋巴细胞增殖的高效刺激因子。而且，少量的抗原与DC作用足以激活T细胞。因此，DC被认为是联系天然防御功能和获得性免疫的关键。
- 李慧谭晓华
- 关键词：树突状细胞肿瘤免疫治疗抗原递呈细胞B淋巴细胞增殖激活T细胞恶性血液
