方天翎 作品数:25 被引量:34 H指数:4 供职机构: 广州医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
HLA-E siRNA沉默肝癌细胞HLA-E基因的表达 被引量:3 2010年 目的针对HLA-EmRNA靶序列不同位点,设计合成多个siRNA链,定量分析其对HLA-E(+)肝癌BEL-7402细胞的基因沉默效率,筛选最佳抑制效果的siRNA。方法用IFN-γ(5×105IU·L-1)诱导BEL-7402细胞表达HLA-E基因,经流式细胞技术纯化后作为靶细胞。设计并合成3条HLA-E siRNA链(A、B、C),将各siRNA(0.1mmol·L-1)经脂质体Lipofectamin 2000转染至靶细胞。采用细胞免疫荧光、流式细胞技术、Western杂交、实时PCR等定量方法,比较48h后各siRNA的基因沉默效果,并观察HLA-E基因沉默对NK肿瘤细胞杀伤的影响。结果与空白对照、非特异组相比,3组(A、B、C组)HLA-E siRNA均明显抑制细胞HLA-E抗原、蛋白产物、mRNA、细胞表面HLA-E分子的表达(P<0.01),B、C组抑制效果接近90%,高于A组(P<0.01)。A、B、C组NK肿瘤杀伤率升高(P<0.01),而B、C组肿瘤杀伤效果高于A组(P<0.01)。结论经筛选的HLA-EsiRNA能特异、高效沉默肝癌细胞HLA-E基因表达,可能抑制其非经典HLA-Ⅰ途径免疫逃避,为肝癌"基因-免疫"治疗提供新的治疗策略。 方天翎 李华 张彤 曾宪成 陈规划关键词:小分子干扰RNA HLA-E NK 靶向性 siRNA沉默肝癌细胞报告基因瞬时表达效应的定量分析 被引量:4 2007年 目的研究小分子干扰RNA(siRNA)特异性抑制肝癌细胞基因瞬时表达的可行性和基因沉默效率。方法凝胶电泳成像观察siRNA体外孵育后的降解性,利用Cy3示踪观察其转染HepG2细胞后动力学变化。将报告基因(GFP)和siRNA共同瞬时转染至HepG2细胞,流式细胞仪、Western blot RT-PCR等分析特异性siRNA抑制报告基因瞬时表达的效应。结果siRNA在空白培养液中和转染细胞内可较长时间保持相对稳定。与空白和非特异siRNA相比,GFPsiR-NA明显抑制GFP蛋白产物和mRNA的表达(P<0·05)。结论特异性siRNA能高效沉默人肝癌细胞转染基因的瞬时表达,为基因治疗提供了一种新的治疗策略。 方天翎 陆敏强 蔡常洁 杨扬 李华 许赤 陈规划关键词:小分子干扰RNA 肝细胞癌 绿色荧光蛋白 腹主动脉手术中二次阻断法效果分析 2012年 目的探讨短暂阻断膈下腹主动脉后再阻断手术部位血管的二次阻断法这一新技术对腹主动脉相关手术安全性的影响。方法回顾性总结近10年手术治疗30例腹主动脉损伤、直径≥8cm的腹主动脉瘤、腹主动脉瘤破裂的临床经验。其中,采用二次阻断14例(二次阻断组),一次阻断16例(一次阻断组)。观察记录阻断手术时间、手术出血量、手术并发症和围手术期病死率等临床指标,进行统计学分析。结果二次阻断组从开腹到完全阻断腹主动脉时的手术时间、出血量、手术并发症发生率、围手术期病死率分别为(15±2)min、(150±13)ml、7.1%和0,一次阻断组上述各指标分别为(30±10)min、(500±130)ml、50.0%和37.5%。两组比较,差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论二次阻断法可以很好的显露腹主动脉损伤部位和腹主动脉瘤颈部,减少手术出血量及肾血管和肠系膜血管等副损伤,降低围手术期病死率,提高手术安全性。 刘安重 方天翎 李宝龙 李锟关键词:动脉瘤 外科手术 集束结扎法减少门一奇断流术出血的临床分析 2011年 目的分析集束结扎法减少门脉高压症门一奇断流术出血的经验,为推广应用这一方法提供依据。方法回顾性分析近10年采用集束结扎法门一奇静脉断流术治疗门静脉高压症食管胃底静脉曲张出血的经验。其中,单纯集束结扎法断流术(束扎组)38例,经典断流术(对照组)35例;统计分析两组术中、术后各l冶床观察指标。结果对照组术中平均出血量为(850±250)ml,平均手术时间为(2.85±0.45)h,手术后5d内平均引流量为(1325±381)ml,丢失血红蛋白总量为(44.6±12.8)g,平均(5.7±1.3)d出血停止;束扎组分别为(285±64)ml,(2.05±0.25)h,(452±75)ml,(17.6±4.3)g,(3.4±0.5)d;两组问各指标数据差异均有统计学意义(P均dO.01)。对照组死亡2例,束扎组无手术死亡。全组病例随访1年以上均未发生再出血。结论集束结扎法门一奇静脉断流术可以明显缩短手术时间,减少术中、术后手术创面出血,降低手术死亡率,值得进一步研究推广。 刘安重 方天翎 李宝龙 李锟关键词:外科手术 HLA-E在肝癌细胞系中的表达 被引量:2 2012年 目的:研究人类白细胞抗原E(HLA-E)在肝癌细胞系中的表达情况。方法:通过real-time PCR和Western blotting技术研究5种肝癌细胞系和胎肝细胞系中HLA-E mRNA和蛋白的表达情况,进行相对定量分析。结果:Real-time PCR检测显示,HepG2细胞、Bel7402细胞、PLC细胞、MHCC97细胞和Hep3B2.1-7细胞这5种肝癌细胞系与L02胎肝细胞系的HLA-E mRNA水平比较,除Hep3B2.1-7细胞表达几乎接近缺失(P<0.01)外,其余无显著差异(P>0.05)。HepG2细胞、Bel7402细胞、PLC细胞、MHCC97细胞和Hep3B2.1-7细胞与L02细胞的HLA-E蛋白水平比较,差异显著(P<0.01),其中Hep3B2.1-7细胞表达缺失。结论:肝癌细胞系的HLA-E mRNA和蛋白表达不同步,可能存在转录后调控。 张彤 曾宪成 李华 陈文捷 方天翎 聂常富 陈规划关键词:肝细胞癌 胎肝细胞 基因表达 腹腔镜胆囊切除术中的胆囊动脉出血 目的:总结腹腔镜胆囊切除术中预防和处理胆囊动脉出血的临床经验。
方法:回顾性分析本院1月~2007年12月收治的行腹腔镜胆囊切除术术中发生胆囊动脉出血138例的临床资料。
结果:本组腹腔镜下处理胆囊动... 刘安重 李君 方天翎关键词:胆囊切除术 腹腔镜 手术并发症 胆囊动脉出血 文献传递 腹腔镜辅助下的小切口肝左叶切除术治疗肝内胆管结石(附25例报告) 目的 通过对比研究腹腔镜辅助下的小切口肝左叶切除术和同期完全腹腔镜下肝左叶切除术、开腹肝左叶切除术多个临床指标,明确三种手术方法在治疗肝内胆管结石中的谁是最优者.方法 回顾性统计分析我院2008-2013年行肝左叶切除术... 刘安重 刘衍民 方天翎阿德福韦酯对HBV阳性肝细胞癌根治术后预后的影响 被引量:2 2012年 目的探讨阿德福韦酯对HBV阳性肝细胞癌根治术后预后的影响。方法回顾性分析2008年1月~2009年1月于我院行肝癌根治术的92例HBV阳性原发性肝癌患者,其中54例行阿德福韦酯治疗(观察组),38例未行任何抗病毒治疗(对照组)。所有患者随访,比较两组患者术后3年肝功能、肿瘤复发率及生存率差异。结果两组患者均无住院期间死亡。观察组1、2、3年的HBeAg血清学转换率及肝功能均较对照组明显改善;两组3年肿瘤复发率差异无统计学意义,但观察组的3年生存率及中位生存期(72.2%,30.6个月)显著高于对照组(50.0%,25.0个月)(P<0.05)。结论阿德福韦酯抗病毒治疗可明显改善HBV阳性肝细胞癌根治术后的肝功能及生存预后,值得临床推广应用。 冯钜涛 李君 方天翎 岑钧华关键词:肝细胞癌 阿德福韦酯 肝脏良性小占位性病变64例临床诊治分析 被引量:4 2008年 目的探讨肝脏良性小占位病变的临床特点。方法回顾性分析我院自1998年1月~2007年12月手术治疗的直径小于5cm的肝脏良性占位性病变64例的临床资料,统计分析其病理类型,术前、术后诊断符合率,术前、术后治疗正确率,并与同期82例直径大于5cm的肝脏良性病变进行比较。结果肝脏良性小病变组术前、术后诊断符合率和术前、术后治疗正确率分别为32.81%和81.25%,显著低于同期肝脏良性大病变组的97.56%和100%,有非常显著性差异(P<0.01)。结论确诊直径小于5cm的肝脏良性小病变的难度明显增大,假阳性、过度治疗、潜在的医疗风险均有增多的趋势,病理诊断是后续治疗最重要的依据。 刘安重 李君 方天翎 夏同义关键词:肿瘤 医用微波加热还原铁粉顺铂甘油混悬液的热效应观察 被引量:3 2012年 目的探讨不同含铁颗粒在微波作用下的热反应大小,并结合机体对铁生理代谢过程,初步选择出比较合适的微波发热反应物质,为临床热化疗提供理论上最佳的产热化疗药物载体。方法将500 mg普通还原铁粉加入到含顺铂50 mg的溶液中均匀混合、烘干、粉碎,制作成微球,再加入到5 mL 30%甘油溶液中制作成含铁颗粒顺铂微球混悬液,经医用微波治疗仪照射,并用红外温度探测仪检测其温度变化。并与纳米还原铁粉、普通磁性铁粉、纳米磁性铁粉混悬液对照。结果还原铁粉顺铂颗粒混悬液中顺铂含量(9.52±0.26)mg/mL,铁颗粒含量(95.53±3.15)mg/mL。在26℃室温环境下,微波治疗仪可以在15 min内分别将普通还原铁粉、纳米还原铁粉、普通磁性铁粉、纳米磁性铁粉4种常见铁颗粒抗癌药物混悬液的温度分别提高18.7、15.1、13.5和12.3℃。结论在医用微波作用下含铁颗粒顺铂混悬液的温度可以快速升温,完全可以达到热化疗所需要45℃的要求,普通还原铁粉发热效果最好,且易于在体内分解代谢,可作为最佳候选肿瘤热化疗载体材料。 刘安重 方天翎 夏同义 李宝龙关键词:碘化油 顺铂