徐莉
- 作品数：9 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人纤维介素蛋白2在昆虫杆状病毒系统中的表达及活性检测被引量：1
- 2009年
- 目的:利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞(Sf9细胞)中表达人纤维介素蛋白2(hfgl2)凝血酶原酶并检测其蛋白活性。方法:首先将PCR扩增的目的基因hfgl2和pENTR/D-TOPO载体连接,再将pENTR/D-TOPO-hfgl2质粒与BaculoDirectTM线性DNA进行体外基因重组,采用脂质体转染法将重组DNA转染到生长良好的Sf9细胞中进行病毒包装,经过对重组杆状病毒三轮扩增后,用RT-PCR和Western blotting从基因和蛋白水平检测hfgl2表达情况,一期凝固试验检测其蛋白活性。结果:重组杆状病毒感染后,Sf9细胞停止生长,体积变大,细胞开始悬浮,破裂,呈现颗粒样外观。RT-PCR扩增和Western blotting从基因和蛋白水平证实Sf9细胞能够表达hfgl2,蛋白分子量约为63kDa。同时,在细胞上清液中检测到了可溶性hfgl2的表达,蛋白分子量约为50kDa。一期凝固试验证明表达的跨膜型hfgl2具有凝血活性。结论:hfgl2在昆虫杆状病毒表达系统中成功表达并具有生物学活性,为进一步研究hfgl2跨膜型以及可溶性蛋白功能提供了工具,亦可应用于开发重型肝炎蛋白芯片或ELISA诊断试剂盒。
- 苏凯徐莉杨道锋宁琴
- 关键词：杆状病毒表达系统
- 利用昆虫杆状病毒表达系统表达人KCTD9蛋白
- 2010年
- 目的应用杆状病毒表达系统在昆虫细胞(sf9细胞)中表达人KCTD9蛋白,以进行其功能学研究。方法从pMD18-T-hKCTD9质粒中扩增hKCTD9全长基因片段,连接至pENTR/D-TOPO载体,将pENTR/D-TOPO-hKCTD9质粒与线形杆状病毒DNA在体外重组后,转染易感细胞系昆虫sf9细胞。采用免疫共聚焦和WesternBlot法分析融合蛋白的表达;在电子显微镜下观察病毒颗粒的形成。结果凝胶电泳分析hKCTD9基因存在于各载体中;激光免疫共聚焦显微镜证实感染重组杆状病毒的sf9细胞核内可见绿色荧光,提示目的基因表达正确;WesternBlot进一步显示hKCTD9蛋白大小约为55KD;透射电子显微镜观察发现被感染的sf9细胞核涨大、透亮,核内清晰可见大量的杆状病毒颗粒。结论 hKCTD9在昆虫杆状病毒表达系统中被成功表达,为进一步功能学研究奠定了基础。
- 徐莉杨道锋陈韬苏凯宁琴
- 关键词：重组杆状病毒SF9细胞融合蛋白
- 超声比较口服两种碳水化合物胃排空时间差异研究
- 2021年
- 目的通过超声测量胃窦部横截面积(CSA),比较健康志愿者口服两种不同碳水化合物溶液后胃排空时间差异,从而为快速康复外科(ERAS)术前碳水化合物饮品选择提供参考,优化手术前禁食禁饮方案。方法招募77例健康志愿者,年龄23~34岁,性别不限。根据随机数字表法分为两组,分别服用5 mL/kg不同碳水化合物25%麦芽糊精(M组)与术能(S组)。于试验前一天22∶00时开始禁食,根据生理需求饮水,试验当日6∶00时开始禁饮,8∶00(T_(0))时77例志愿者进行首次床旁胃超声测量,测量标准矢状切面CSA,平卧位为CSA 1,右侧卧位为CSA 2。在口服碳水化合物后30 min(T_(30))、60 min(T_(60))、90 min(T_(90))、120 min(T_(120))、150 min(T_(150)),再次通过床旁胃超声测量,获取标准矢状切面CSA。以T_(30)-T_(150) CSA测量值≤T_(0)基础值定义为胃排空。结果M组T_(30) CSA_(1)较T_(0)增大,S组T_(30)、T_(60) CSA 1较T_(0)增大,M组T_(30)、T_(60)、T_(90)、T_(120) CSA 2较T_(0)增大,S组T_(30)、T_(60) CSA_(2)较T_(0)增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组平均胃排空时间均少于150 min,T_(120)时M组CSA 2显著大于S组(P<0.05)。结论麦芽糊精及术能溶液均可作为术前碳水化合物补充液,术能排空时间较25%麦芽糊精稍有提前。以此两种碳水化合物作为术前饮品选择,临床手术麻醉前2.5 h口服5 mL/kg碳水化合物,可视为手术麻醉时已完全完成胃排空,可作为ERAS术前安全禁饮时间。
- 许巧巧徐莉孙绕叶婷樊龙昌
- 关键词：胃排空碳水化合物ERAS术前禁食禁饮
- 病毒性肝炎时肝B1-a细胞对肝脏保护作用的实验研究
- 2012年
- 目的:检测小鼠感染鼠肝炎病毒3型(MHV-3)后肝脏B-1a淋巴细胞亚群变化,探讨B-1a细胞在病毒性肝炎中的作用。方法:通过流式细胞术检测MHV-3诱导的耐受型小鼠及引起暴发性肝炎敏感小鼠肝脏中B细胞、B-1a细胞的基础水平,以及在感染后不同时间点的比例变化。磁珠分选出未感染敏感小鼠肝脏B-1a细胞并过继给敏感小鼠,观察感染MHV-3病毒72h后小鼠肝脏的病理组织学特征。结果:未感染时MHV-3耐受型小鼠肝脏中B细胞明显高于敏感型小鼠(43.6%±2.1%vs15.6%±3.3%,P<0.01),B-1a细胞在耐受型小鼠略高于敏感型小鼠(6.38%±2.13%vs5.84%±1.32%,P>0.05);感染后耐受型小鼠B-1a明显升高至(10.80%±2.82%,P<0.05),而敏感型小鼠呈现下降趋势。过继B-1a细胞的敏感小鼠肝脏坏死程度明显低于其它细胞组及PBS对照组。结论:肝脏固有B-1a细胞对MHV-3引起的病毒性肝炎具有保护性作用。
- 徐莉陆玉蕾孙颖王晓晶李维娜宁琴
- 预激综合征并发房颤蜕变室颤消融成功1例
- 2004年
- 徐莉王琳
- 关键词：预激综合征房颤室颤消融
- 自身免疫性肌病合并干燥综合征的临床及病理特点分析被引量：1
- 2021年
- 目的探讨自身免疫性肌病合并干燥综合征患者的临床及病理学特点。方法回顾性分析2016年1月-2020年10月武汉同济医院收治的14例自身免疫性肌病合并干燥综合征患者的临床资料,概要描述了患者的主要临床表现、病理特征及其预后。结果自身免疫性肌病合并干燥综合征(Sjogren's syndrome,SS)患者共14例,其中男1例,女13例,年龄10~70岁,自身免疫性肌病诊断的平均年龄53岁,14例患者中9例为坏死性肌病(Necrotizing autoimmune myositis,NAM),4例为多发性肌炎(Polymyositis,PM),1例为皮肌炎(Dermatomyositis,DM);患者以肌病收治入院期间诊断为SS,以肢体无力(半数为近端无力)等神经系统症状起病,偶见肌肉萎缩或疼痛、呼吸或吞咽困难,肌酸激酶(Creatine kinase,CK)和肌红蛋白(Myoglobin,Myo)升高,核磁共振(Magnetic resonance imaging,MRI)可见水肿或伴脂质沉积、肌肉萎缩等典型肌病样改变,肌电图(Electromyogram,EMG)以肌源性改变为主;所有患者抗核抗体(Antinuclear antibo,ANA)阳性,85.6%患者抗SSA抗体(Anti-SSA antibody)和抗Ro52抗体(Anti-Ro52 antibody)阳性;NAM合并SS患者中有28.5%患者的抗信号识别颗粒抗体(Anti-signal recognition particle,anti-SRP)阳性,NAM合并SS患者病理以肌纤维坏死、萎缩、再生为主要改变,其中抗SRP抗体阳性合并SS患者可见多个灶性炎症细胞浸润,主要组织相容性复合物Ⅰ(Major histocompatibility complex class I,MHCI),CD3,CD68广泛表达于灶性浸润区域,而抗SRP抗体阴性合并SS患者未见此改变;DM,PM合并SS患者病理以肌纤维间、结缔组织、肌筋膜、肌束间明显炎症细胞浸润为主要改变,其中DM合并SS患者可见灶性炎症细胞浸润,MHCI,CD3,CD68广泛表达于灶性浸润区域;所有患者膜攻击复合物(Membrane attack complex,MAC)在血管周围呈强阳性表达;患者采用激素及免疫抑制剂治疗基本获得较好的转归。结论本研究概括性描述了14例自身免疫性肌病�
- 徐莉李悦高华杰杨梦歌季苏琼
- 关键词：干燥综合征
- 复方抗病毒制剂体外抗流感病毒和呼吸道合胞病毒作用及毒性研究被引量：1
- 2008年
- 目的测定复方抗病毒制剂体外对流感病毒和呼吸道合胞病毒的抗病毒作用。方法用鸡红细胞血凝素滴定法测定不同浓度复方抗病毒制剂在狗肾传代细胞(MDCK)中对流感病毒的抑制作用;用中和实验测定复方抗病毒制剂在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒的活性。结果复方抗病毒制剂浓度<1.5 mg.mL-1时对MDCK细胞及Hep-2细胞无明显毒性。浓度>0.15 mg.mL-1能抑制流感病毒的血凝活性和呼吸道合胞病毒对靶细胞的攻击作用。结论复方抗病毒制剂体外对流感病毒和呼吸道合胞病毒具有较强的抑制作用,且有较大的安全性。
- 杨道锋徐莉邵静芳张悦龚非力
- 关键词：抗病毒制剂病毒流感合胞病毒体外活性
- 血清抗体阴性坏死性肌病患者的临床病理特征分析
- 2023年
- 目的 探讨从临床和病理两方面分析血清抗体阴性坏死性肌病(Immune-mediated necrotizing myopathy,IMNM)患者的特征。方法 回顾性收集武汉同济医院神经内科确诊的血清抗体阴性IMNM患者的流行病学、实验室检查、血清学、病理学、影像学等临床资料,通过分析患者临床和病理特征有助于临床全面认识该类疾病,提高诊断效率。结果 研究纳入18例血清抗体阴性IMNM患者,包括8例男性患者(44.4%)、10例女性患者(55.6%);患者年龄25~74(54.56±14.35)岁;病程1~12(3.6±3.5)月。患者临床以肌肉萎缩(33.3%)和肌肉疼痛为著(33.3%);2例(11.1%)患者心脏功能异常,主要表现为心肌缺血和纤维化;3例(16.7%)患者肺部检查确诊间质性肺病(Interstitial lung disease,ILD)。患者病理改变以分化抗原(Cluster of differentiation,CD)68+巨噬细胞及CD4+T淋巴细胞表达为主(88.9%),主要表达于坏死肌纤维、肌内膜上;偶见CD8+T淋巴细胞和CD20+B淋巴细胞的表达;11例(61.1%)肌炎抗体阴性IMNM患者表达自噬标志物泛素结合蛋白(Sequestosome 1,p62/SQSTM1)蛋白,4例(22.2%)患者表达轻链蛋白3(Light chain 3,LC3)蛋白;13例(72.2%)患者肌膜和/或肌浆中主要组织相容性复合物I(Major histocompatibility complex class I,MHC-I)表达水平上调,10例(55.6%)患者肌膜和/或肌浆膜攻击复合物(Membrane attack complex,MAC)表达水平上调。相关性分析发现CD4+,CD68+细胞数目与患者血清学肌酸激酶(Creatine kinase,CK)水平正相关(r=0.68,P=0.003;r=0.599,P=0.011);与患者下肢近端肌力呈负相关(r=-0.515,P=0.041;r=-0.558,P=0.025)。CD4+、CD8+和CD68+细胞数目与患者间质性肺病(Interstitial lung disease,ILD)患病率呈正相关(r=0.646,P=0.004;r=0.557,P=0.016;r=0.618,P=0.006)。MHC-I表达水平与MMT评分呈负相关(r=-0.529,P=0.024)。自噬标志物P62表达与MHC-I表达水平呈正相关(r=0.484,P=0.049);P62和LC3表达与MAC表达水平呈正相关(r=0.752,P=0.00;r=0.689,P=0.00)。结论 血�
- 徐莉李悦高华杰杨梦歌季苏琼
- 关键词：间质性肺病
- 武汉市成年人群-抗HAV IgG和HBsAg阳性率的调查
- 2010年
- 丁红方马科徐莉李杰刘学恩宁琴
- 关键词：成年人群HBSAG阳性率抗HAVIGG乙型肝炎疫苗甲型肝炎疫苗
