徐旭士 作品数:48 被引量:465 H指数:12 供职机构: 南京师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 江苏省高等教育教改立项研究课题 国家自然科学基金 江西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 化学工程 文化科学 更多>>
核型多角体病毒的增值与棉铃虫血淋巴酯酶的变化 1999年 By the polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and thin-layer scanning, the esterases (EST) of the third instar larvae of the Helicoverpa armigera were investigated in qualityand quantity after infection with nuclear polyhedrosis viruses (NPV). The changes in sort andcontent of hemolymph EST were examined at six hours postinfection and the numbers of ESTbands were from more to less as develop and infective time in larvae. The varies in EST patternbetween infection and control were not significant but the content of each band and the accumulation of EST were obvious. According to the changeable regularity in EST content of zymogram,the total and single content in diseased larvaes always gradually decreased with passages of infective time but in the healthy larvaes had no distinct changes. The results demonstrated that the infection with NPV could affect the EST metabolism in larvae hemolymph, and the metabolicchanges may show the infective level and extent, there fore it had indicated function. 徐旭士 赵贵军 李飞 刘润忠 张友清关键词:棉铃虫 血淋巴 酯酶 核型多角体病毒 EST 棉铃虫核型多角体病毒G4株Ha99蛋白的原核表达和orf99敲除回复子的构建 被引量:1 2010年 [目的]探索棉铃虫核型多角体病毒G4株Ha99蛋白的最佳表达条件。[方法]采用PCR从其基因组中扩增出orf99编码区,将其克隆到pGEM-Teasy载体,测序后将其亚克隆到原核表达载体pGEX-KG,转化大肠杆菌BL21加入IPTG诱导融合表达。并在orf99缺失杆粒HaBac△99的基础上构建了orf99敲除子HaBac-KO99及回复子HaBac-Rep99。[结果]SDS-PAGE分析表明,GST-Ha99融合蛋白得到成功表达,Westernblot进一步分析表明融合蛋白已得到成功表达。此外,PCR及酶切验证各载体构建成功。[结论]为orf99功能的进一步研究奠定基础。 钱丽莹 闫尧 曾利平 徐旭士关键词:棉铃虫核型多角体病毒 SDS-PAGE WESTERN BLOT 棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒HaSNPV orf101的原核表达及抗体制备 被引量:2 2008年 [目的]摸索棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒(HaSNPV)orf101编码蛋白原核表达条件并制备其多克隆抗体。[方法]根据HaS-NPVorf101序列,设计引物,引入适当的酶切位点,利用PCR扩增出基因片段并将其克隆至pGEM-TEasy载体,然后亚克隆至原核表达载体pGEX-KG,检测在不同条件下融合蛋白的表达产量及其折叠性质。原核表达产物经SDS-PAGE分离纯化,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。[结果]在IPTG诱导的条件下,融合蛋白GST-HA101可在大肠杆菌BL21中以包涵体形式高效表达,表达产物的大小为55.8 kDa。制备的多克隆抗体经1∶8 000倍稀释后用于Western Blot分析,获得特异性显色信号。[结论]原核表达蛋白及其多克隆抗体的获得为深入研究Ha101的基因功能打下了基础。 李志远 邱小慧 周玥 钱丽莹 徐旭士关键词:克隆 抗体 健康人血清免疫复合物的等电聚焦电泳分析 被引量:1 1997年 采用等电聚焦电泳和薄层扫描分析法,研究不同年龄组健康人血清免疫复合物。结果发现,各组的蛋白带均仅出现在高pH区,且具有特征基本相同的扫描峰;将其分为3个区域,各组峰面积百分比均为3区>2区>1区,进一步比较在同一区域中各组之间的百分比,则出现≤30岁前比例不稳定和≥40岁后比例稳定的现象;采用等级相关检验法证明,3个区域的面积和总面积在各组之间均分别随年龄增大而显著上升。这些结果反映了个体正常发育、发展和衰老过程中免疫反应的若干特征,可作为用于疾病诊断的正常值依据。 李思光 徐旭士 彭宣宪关键词:免疫复合物 等电聚焦电泳 薄层扫描 BsNPV感染油桐尺蠖及Bs484细胞的酯酶分析 被引量:4 1994年 本文使用聚丙烯酰胺凝胶电泳及薄层扫描技术测定了油桐尺蠖Buzurasuppressaria和Bs484细胞感染核型多角体病毒后的酯酶(EST)含量及类型的变化。结果表明,油桐尺蠖中肠FST的含量和类型在病毒感染8小时后就有明显的改变,随着感染时间延长,这二项指标都有较大的变化。而Bs484细胞的EST含量变化开始于病毒感染后3小时,细胞EST的类型则无改变。 徐旭士 张超英 谢天恩关键词:酯酶 油桐尺蠖 核多角体病毒 胶质芽孢杆菌发酵条件研究 被引量:23 2002年 通过单因子及正交实验对一株胶质芽孢杆菌NS0 1的培养基组成 (C、N、生长因子、无机盐 )及工艺条件 (温度、起始pH、装液量 )进行了研究。结果表明比较理想的培养基配方为 (% ) :葡萄糖 1,硫酸铵 0 .15 ,酵母膏 0 .0 1,KCl0 .0 1,MgSO4 ·7H2 O 0 .0 1,NaH2 PO4 0 .0 1,CaCO30 .1。起始 pH 7.5 ,培养温度 36℃ ,装液量 5 0mL/ 2 5 0mL锥形瓶。在此条件下活菌数可达 6 .5亿 ,是传统的胶质芽孢杆菌淀粉铵培养基下活菌数的 2 6 0 %。 刘五星 徐旭士 杨启银 陈育如 虞光华关键词:胶质芽孢杆菌 发酵条件 培养基优化 摇瓶发酵 硅酸盐细菌 生物钾肥 蓖麻蚕核型多角体病毒包涵体蛋白的提纯及SDS-PAGE分析 被引量:3 2001年 对蓖麻蚕核型多角体病毒 (PhilosamiacynthiariciniNuclearPolyhedrosisViruses)的多角体蛋白 polyhedrin的碱解性质以及分子量等进行了分析。结果发现 :多角体加热灭活和碱解后 ,经等电点沉淀的 polyhedrin通过凝胶电泳仍存在较多的小分子量蛋白带 ,表明通常的 70℃加热不能完全灭活碱性蛋白酶 ;在电泳图谱的主带polyhedrin一侧尚有一伴随的的卫星带 ,可能提示包涵体的外膜蛋白。Sephadex -G2 0 0柱层析纯化的 polyhedrin经SDS -PAGE分析 ,多角体蛋白有 4条带 ,其中主带分子量约为 30KD ,另有一带处于 6 1KD位置 ,推测为 polyhedrin的二聚体 ,说明polyhedrin多聚体在杆状病毒包涵体中的普遍性。 吴敏 徐旭士 王晓芳关键词:多角体蛋白 SDS-PAGE分析 包涵体 杆状病毒 体腔型脓病 油桐尺蠖核型多角体病毒感染Bs484细胞的增殖与病理研究 被引量:2 1996年 用油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)感染Bs484细胞,对感染后病毒增殖的部分性质及细胞病理变化进行了研究。结果表明:1.病毒子代的增殖在感染后的不同时间具有不同的变化形式,且增殖量与感染剂量具有一定程度的相关,2.病毒感染细胞后12小时开始在培养物上清检测到明显的胞外病毒粒子;3.就BsNPV的增殖而言,24~26℃是其最佳发育温度;4.病毒感染细胞后的明显病变特征是核内充满多用体,细胞堆积以及细胞体积膨大,同时观察到二类感染细胞,一种核内含较多的多角体,另一种核内则只有几个多用体。 徐旭士 刘润忠 罗玉萍 李思光 赵贵军关键词:昆虫病毒 油桐尺蠖 核型多角体病毒 病理 不同碳源对两株真菌纤维素酶合成的诱导和调控 被引量:33 2002年 定时测定B 6 (Aspergillussp .)、AS3 .3711(Trichodermasp .)在各类碳源中的纤维素酶活力 ,结果发现 ,酶的合成受培养基中碳源性质的调节控制 .结构相对完整的纤维类物质 (α 纤维素粉、微晶纤维素 )诱导活性较高 ,电泳结果表明 ,纤维素酶系是协同表达的 ,但酶系各组分的百分比在不同的诱导条件下却各不相同 .在测定糖耗与酶活力的关系中发现纤维二糖直接诱导B 6纤维素酶的合成 ,对AS3 .3711则起了间接诱导作用 ,其经菌体代谢后的某种转化产物才是AS3 .3711纤维素酶合成的真正诱导源 .图 6表 1参 王晓芳 徐旭士 吴敏 杨亚南关键词:碳源 真菌 胶质芽孢杆菌对土壤矿物的分解作用及机理研究 被引量:33 2004年 应用胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)作分解土壤矿物试验。从土壤矿物经该菌处理前后的表面光滑程度、表面积以及上清液中K、Si离子浓度的变化等方面证明了胶质芽孢杆菌能够分解土壤矿物,并把其中的K、Si从矿物晶格中释放出来。同时还表明胶质芽孢杆菌NS01分解矿物与其生长过程中产生的荚膜多糖与小分子有机酸的复合作用有关。 刘五星 徐旭士 杨启银 吴向华关键词:胶质芽孢杆菌 土壤矿物