张真中 作品数:9 被引量:7 H指数:1 供职机构: 复旦大学附属中山医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市青年科技启明星计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 更多>>
PC4基因RNAi慢病毒载体的构建及有效靶序列鉴定 被引量:1 2018年 目的:筛选慢病毒介导PC4 RNA干扰的有效靶序列。方法:通过数据库设计3条PC4干扰候选靶序列,将靶序列构建到慢病毒载体中,转入HEK-293T细胞后,感染H9C2心肌细胞。通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法鉴定靶序列干扰PC4的效果。结果:成功构建shPC4慢病毒载体,获得高效感染心肌细胞的慢病毒;感染心肌细胞后实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹显示,shPC4-1具有较高的干扰效果(P<0.05)。结论:成功筛选出高效的PC4RNAi靶序列。 张真中 杨春杰 钱三立 李冰玉 邹云增关键词:慢病毒 RNA干扰 心肌细胞 柯萨奇B3病毒检测试剂盒 本发明公开了一种检测柯萨奇B3病毒的试剂盒,其包括:RNA提取及反转录体系;MIRA等温扩增体系;CRISPR‑Cas12a检测体系,包含核酸酶Cas12a、特异性靶向CVB3基因的crRNA、5’端含有6‑羧基荧光素3... 邹云增 丁志文 徐冉 杨春杰 苑洁 张真中一种小鼠H1启动子及其应用 本发明涉及一种小鼠H1启动子及其应用。本发明提供了小鼠H1启动子、小鼠H1启动子的核心片段、含有小鼠H1启动子的核酸片段、基因表达盒、一种载体、一种宿主细胞、一种基因工程菌,以及所述小鼠H1启动子的应用。与现有技术相比,... 邹云增 丁志文 邬佳英 徐冉 杨春杰 王时俊 张真中一种诱导心肌细胞容量超负荷的药物及其用于体外心肌细胞的容量超负荷模型制备方法 本发明公开了一种诱导心肌细胞容量超负荷的药物及其用于体外心肌细胞的容量超负荷模型制备方法,诱导心肌细胞容量超负荷的药物为盐酸多巴胺,所述心肌细胞的细胞系为HL‑1心肌细胞系;本发明的药物使用该药物浓度该作用时间可模仿体内... 邹云增 丁志文 付源峰 徐冉 吴剑 周宇飞 赵迪 杨春杰 张真中丹参水提物一步制备丹参素乙酯的研究 被引量:1 2015年 本研究提供了丹参素乙酯的合成方法。丹参水提取物在乙醇溶剂中,浓硫酸的催化下,得到了丹参素酯化产物——丹参素乙酯。实验表明,丹参素乙酯比丹参素具有更好的自由基清除能力。这种由丹参水提取物一步制备丹参素衍生物的方法简单、高效、成本低。 钱三立 李冰玉 吴君怡 张真中 杨春杰 邹云增关键词:丹参素 衍生物 DPPH 心肌肥厚预适应小鼠模型的构建改良与无创评价 2020年 目的肥厚预适应(hypertrophic preconditioning,HP)是新近在小鼠模型上发现的一种抑制心肌肥厚的保护机制。但这一小鼠模型由于反复开胸缩窄/去缩窄主动脉,面临胸腔探查时间长、小鼠死亡率高等问题,制约了对HP进行在体水平的深入研究。我们拟对HP模型构建的关键环节进行改良,并使用超声生物显微镜无创评估心脏负荷程度,以确保模型的稳定高效建立。方法将雄性C57BL/6J小鼠(10~14周龄)分为肥厚预适应传统操作组(C‑HP组,N=40),肥厚预适应改良操作组(O‑HP组,N=40,留置长线头埋于胸廓皮下,使用显微镊解开缩窄线结),主动脉缩窄组(TAC组,N=20)及假手术组(Sham组,N=20)。各组最后一次术后4周,存活小鼠行超声生物显微镜以及心脏病理切片评估心脏肥大程度。超声检测室壁厚度和心腔内径。超声检查后对小鼠行安乐死取心脏,测量心脏重量/体重比,行病理切片检测心肌细胞横截面积和纤维化程度。结果在去缩窄和再缩窄过程中,O‑HP组较C‑HP组明显缩短手术时间,降低围手术期(从实验开始到手术结束6h)死亡率。再缩窄术后4周,O‑HP组小鼠存活率为67.5%(27/40),高于C‑HP组小鼠的37.5%(15/40),差别有统计学意义(P=0.007)。超声生物显微镜无创性检测主动脉缩窄处血流发现,O‑HP组与C‑HP组的缩窄处血流峰值在缩窄‑去缩窄‑再缩窄等关键环节的变化趋势类似,对HP模型进行改良不影响心脏承受的压力负荷水平。与Sham组小鼠对比,主动脉缩窄4周组(TAC 4W组)小鼠心室壁增厚、心功能受损、心肌细胞横截面积增大,纤维化增加,差别有统计学意义(P均<0.05)。主动脉再缩窄4周组(Re‑TAC 4W组)小鼠上述肥大反应明显减轻。此外,Re‑TAC 4W组小鼠与TAC 4W组小鼠相比,心房利钠肽及B型利钠肽表达减少,细胞外信号调节激酶(ERK1/2)激活程度明显减轻。结论我们成功构建优化并无创验证了一种心肌HP� 吴剑 代方杰 黄家园 李璇 胡耀方 殷培培 杨春杰 李冰玉 张真中 游洁芸 王时俊 邹云增关键词:小鼠 一个扩张型心肌病伴房室传导阻滞家系SCN5A基因的突变研究 被引量:5 2009年 目的研究一个扩张型心肌病伴房室传导阻滞家系中心脏钠离子通道基因(voltagegated sodium channel type V,SCN5A)的遗传突变或多态位点。方法应用聚合酶链反应结合DNA直接测序技术对该家系的23位直系成员进行SCN5A基因编码区全部28个外显子的检测;对于新发现的变异位点筛查133名无血缘关系的正常人作为对照。结果在该家系中共检测到4个遗传变异,分别为c.87G>A(A29A),c.731T>C(I244T),c.3578G>A(R1193Q)和c.5457T>C(D1819D)。其中c.731T>C(I244T)为新发现的遗传变异,位于第7外显子,碱基的变异导致氨基酸第244位由苏氨酸代替异亮氨酸。家系中有4名成员携带I244T,但是133名健康对照者中未发现该变异。结论在一个扩张型心肌病伴房室传导阻滞家系中发现了SCN5A基因的新遗传变异。 张茜 孙爱军 范铮 娄小燕 王时俊 张真中 王克强 邹云增 葛均波关键词:扩张型心肌病 房室传导阻滞 基因突变 一种诱导心肌细胞容量超负荷的药物及其用于体外心肌细胞的容量超负荷模型制备方法 本发明公开了一种诱导心肌细胞容量超负荷的药物及其用于体外心肌细胞的容量超负荷模型制备方法,诱导心肌细胞容量超负荷的药物为盐酸多巴胺,所述心肌细胞的细胞系为HL‑1心肌细胞系;本发明的药物使用该药物浓度该作用时间可模仿体内... 邹云增 丁志文 付源峰 徐冉 吴剑 周宇飞 赵迪 杨春杰 张真中一种生物实验用实验材料研磨装置 本实用新型涉及一种生物实验用实验材料研磨装置,包括自上而下同轴匹配的锥形研磨轮、锥形磨盘;所述锥形磨盘下部固定连接一直立的螺纹杆,螺纹杆下端固定连接一转盘;螺纹杆与一安装块啮合,安装块固定不动;所述锥形研磨轮固定不动,所... 杨春杰 张真中 邹云增 丁志文 康乐