张爱华
- 作品数:11 被引量:22H指数:4
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省农业三项工程项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 伏马菌素B_1单克隆抗体的制备及鉴定被引量:4
- 2011年
- 【目的】真菌毒素可导致严重的食品安全问题。本试验旨在制备可用于检测伏马菌素B1的特异性单克隆抗体。【方法】制备伏马菌素B1人工抗原,杂交瘤细胞法筛选杂交瘤细胞株制备腹水型单克隆抗体,并对其特性进行鉴定。【结果】筛选得到杂交瘤细胞株F3,分泌的单克隆抗体亚类为IgG1,轻链类型为κ链;10%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单抗蛋白重链分子质量约为50 kD,轻链分子质量约为25 kD;间接酶联免疫吸附法测定杂交瘤细胞F3细胞培养上清和腹水效价分别为1:3 200和1:51 200;亲和力常数为1.60×10-8 mol.L-1;IC50值可达3.589ng.mL-1;对其它真菌毒素不存在交叉反应;免疫转印法鉴定抗体具有高特异性。【结论】本试验制备FB1单克隆抗体具有较好亲和力和高特异性,具有良好的应用价值。
- 王莹郑浩何成华张爱华冯璐璐皇超英张海彬
- 关键词:伏马菌素B1人工抗原单克隆抗体酶联免疫吸附法
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导血管内皮细胞凋亡及其凋亡相关因子的初步研究
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是由镰刀菌属病原真菌产生的真菌毒素之一,在自然界广泛存在,可引起人畜中毒。为了解DON对血管内皮细胞的危害及其可能机制,本试验采用不同浓度的DON(0.25~10μg/mL)作用于猪髋动脉内皮...
- 刘秀芳何成华张爱华樊彦红张海彬
- 关键词:脱氧雪腐镰刀菌烯醇细胞凋亡TUNELCASPASE-9BAX
- 文献传递
- 犬细小病毒南京株VP2蛋白免疫原性片段的克隆表达
- 2008年
- 以Protean软件对犬细小病毒南京株(CPV-GN)VP2蛋白的分子结构进行分析,从中筛选出具有良好免疫原性潜能的部分片段(VP2′片段),利用PrimerPremier5.0软件设计一对引物,用以该片段的扩增。将PCR扩增产物克隆入pMD18-T载体,构建了pMD-VP2′重组质粒。双酶切回收目的条带,将之亚克隆入表达载体pET32a(+),构建了重组表达质粒pET32-VP2′。转化宿主菌BL21,经IPTG诱导后成功表达了分子量约为34ku的融合蛋白。免疫转印显示,目的蛋白可被CPV-2b抗血清所识别,证明其具有与特异性抗体结合的抗原性,为CPV亚单位疫苗和免疫学诊断方法的研究打下基础。
- 李希阳缪勤张爱华张洪英张汇东张海彬
- 关键词:克隆
- 杂交瘤细胞株D6D
- 本发明涉及杂交瘤细胞株D6D的研制,属于生物技术领域。用BSA与OTA偶联后的OTA-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用HAT培养基进行选择性培养。用KLH与OTA偶联后的完全抗...
- 张海彬张爱华王希春何成华王莹
- 文献传递
- 赭曲霉毒素A分析方法研究进展被引量:4
- 2012年
- 赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)是1种具有多种毒性的真菌毒素[1],广泛污染粮食和饲料[2],对人类和动物的健康及农业经济发展造成严重威胁[3]。OTA的检测方法正在不断发展,从灵敏度、准确性、重现性、简易性、批量性和可视性等各方面日益满足实际生产生活的需求。
- 张爱华冯璐璐马彦娜王莹何成华张海彬
- 关键词:赭曲霉毒素
- 一株降解DON毒素真菌的鉴定及其生理特性研究被引量:1
- 2008年
- 为了对实验室已分离的1株高效降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素(DON)的真菌(NJA-1)鉴定,对该菌进行了形态学观察以及rDNA ITS区基因序列的扩增、测定。形态学观察发现该菌属于曲霉属黑色组曲霉黑曲霉集合体。进一步分别用引物对BMB-CR和ITS2及ITS1和ITS4扩增rDNA的ITSⅠ-5.8S rDNA-ITSⅡ,得到总长为738 bp的基因序列,与GENBank中已有的基因序列比对和亲缘关系比较分析发现该菌rDNA ITS区基因序列与塔宾曲霉的同源性为100%,最终确定NJA-1为1株塔宾曲霉。菌株NJA-1 rDNA ITS区基因序列收录入GENBank,登陆号为EF178271。还对NJA-1的生长特性、炭源和氮源的利用、适宜生长的培养基pH等生理特性进行了测定,为该菌的大量培养提供数据基础。
- 张爱华张洪英何成华张海彬
- 关键词:形态学观察RDNAITS区
- 赭曲霉毒素A免疫检测方法的研究与呕吐毒素生物转化菌NJA-1的鉴定
- 真菌毒素是真菌产生的次级代谢产物,广泛污染粮食和饲料等农副产品。自然界存在的真菌毒素种类繁多、毒性复杂,可引起人畜的急性、慢性中毒。赭曲霉毒素A(OTA)和呕吐毒素(VT)是影响农牧业经济发展和人类健康的两种重要毒素,而...
- 张爱华
- 关键词:赭曲霉毒素A呕吐毒素
- 文献传递
- 杂交瘤细胞株D6D
- 本发明涉及杂交瘤细胞株D6D的研制,属于生物技术领域。用BSA与OTA偶联后的OTA-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用HAT培养基进行选择性培养。用KLH与OTA偶联后的完全抗...
- 张海彬张爱华王希春何成华王莹
- 伏马菌素B_1人工抗原的鉴定及抗体的制备被引量:4
- 2011年
- 采用戊二醛(GA)一步法将半抗原伏马菌素B1(FB1)分别与鸡卵清蛋白(OVA)、牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备2种具有免疫原性的FB1人工抗原FB1-OVA和FB1-BSA。分别采用凝胶电泳法、紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR)、基质辅助激光分析电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)4种方法鉴定人工抗原偶联效果并测定偶联比。将FB1-BSA作为免疫抗原免疫BALB/c小鼠,FB1-OVA作为固相包被抗原,采用间接酶联免疫吸附法(i-ELISA)测定小鼠抗血清滴度。结果表明:4种方法均鉴定FB1人工抗原合成成功。凝胶电泳法测定FB1-OVA和FB1-BSA相对分子质量分别约为50 000和75 000。MALDI-TOF-MS测定FB1-OVA和FB1-BSA相对分子质量分别为48 009.212和74 355.301,并精确计算FB1-OVA和FB1-BSA偶联比分别为5∶1和10∶1。FB1-BSA免疫后小鼠的抗血清效价为1∶1.25×105,并具有较高灵敏度。
- 王莹郑浩何成华张爱华张海彬
- 关键词:伏马菌素B1人工抗原抗体
- SH证券公司股票质押业务风险管理
- 证券公司是资本市场重要的组成部分,健康发展对于我国的金融市场来说有重要的意义。监管政策的放开,使证券公司能够充分利用好自身优势,扩大股票质押业务的规模。该业务发展至今,帮助许多融资主体解决了融资难的问题,能有效促进相关产...
- 张爱华
- 关键词:证券公司股票质押风险管理