张丽颖
- 作品数：6 被引量：18H指数：3
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划长春市科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 抗牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其特性研究被引量：5
- 2009年
- 利用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因疫苗和重组E2蛋白分别免疫BALB/c小鼠,制备了5株单克隆抗体(4G3、3B2、3F8、2H6、3A11),并对这些单克隆抗体的亚类、免疫原性及其与瘟病毒的反应性进行了检测。结果显示,4G3、3B2、3F8、2H6为IgM类抗体,3A11为IgG类抗体;纯化后的单克隆抗体与纯化前比较,与抗原的反应性略有提高;5株单克隆抗体与BVDV和猪瘟病毒(CSFV)均有交叉反应性。表明,制备的5株单克隆抗体所针对的是BVDV和CSFV共有的抗原表位。
- 张丽颖鲍永华赵志辉
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体
- 草原红牛不同组织雄激素受体基因表达量检测及比较研究被引量：4
- 2010年
- 采用实时荧光定量RT-PCR技术检测雄激素受体基因(Androgen receptor gene,AR)在草原红牛公牛和母牛多种组织中的表达情况,探讨该基因在草原红牛公牛和母牛不同组织中的表达差异。结果表明,AR基因在所检测的公牛和母牛的心、肝、脾、肺、肾、肠、胃及睾丸(卵巢)等8种组织中均有表达,且肝脏中的表达量高于其他组织;草原红牛公牛和母牛相同组织间比较结果显示:AR基因在草原红牛公牛肝脏中表达量与母牛相比较差异不显著,其他不同组织间表达量均有显著差异(P<0.05),且公牛各组织中的表达量均高于母牛。本试验为深入研究AR基因的生物学功能及了解该基因对不同性别个体肉质性状的形成的作用机制奠定了基础。
- 秦立红刘伟英张丽颖张金玉张国梁赵玉民张嘉保赵志辉
- 关键词：草原红牛实时荧光定量RT-PCR表达量
- 牛孕激素受体SNP分析及其与精液品质的关系被引量：3
- 2010年
- 孕激素受体(PR)对于正常雌性动物生殖功能的实现具有重要调节作用,该基因在雄性动物中生物学作用尚不十分清楚。本研究通过PCR-SSCP方法对种公牛群体的PR基因所有外显子及5′UTR多态性进行检测。结果表明:PR基因外显子4、外显子8及5′UTR均检测到了多态性位点,其他外显子没有发现遗传多态性;测序表明外显子4发生了A20G突变,没有导致氨基酸的改变,外显子8发生G86T和A207T突变,其中G86T突变导致所编码的G(甘氨酸)变成V(缬氨酸),A207T突变导致所编码的Q(谷氨酰胺)变成H(组氨酸),5′UTR处存在G-1809A和C-1808G碱基突变。最后用最小二乘分析方法对其基因型和生产性状进行了相关性分析,第4及第8外显子的遗传多态性与部分精液品质性状呈显著相关。
- 宋永利刘伟英张丽颖秦丽红张金玉张嘉保赵志辉
- 关键词：种公牛孕激素受体精液品质
- 丙型肝炎病毒全基因重组质粒的构建及其转染细胞系的建立
- 2009年
- 目的构建丙型肝炎病毒(HCV)全基因重组质粒,并建立其转染细胞系。方法双酶切质粒JFH1,回收HCVDNA,分别与真核表达载体pIRESneo和逆转录病毒载体pLNCX连接,构建重组质粒pIRESneo-HCV和pLNCX-HCV。将重组质粒pIRESneo-HCV转染BHK细胞,pLNCX-HCV转染pA317细胞,通过PCR、间接ELISA和免疫荧光试验鉴定转染细胞。结果重组质粒PCR和酶切鉴定证明构建正确。转染细胞上清经PCR检测均可见目的基因条带;ELISA结果表明,转染细胞冻融上清均可与抗HCV小鼠血清发生强的结合反应;转染细胞均可与抗HCV小鼠血清反应,产生荧光,但荧光不多且斑点不亮。结论已成功构建HCV全基因重组质粒,并建立了可表达HCV蛋白的转染细胞系,为转基因动物模型的建立奠定了基础。
- 张丽颖赵志辉扈荣良
- 关键词：丙型肝炎病毒全基因真核表达
- 梅花鹿微卫星DNA富集文库的构建与鉴定
- 2011年
- 梅花鹿基因组DNA经限制性内切酶MboI酶切,用1.5%的琼脂糖凝胶电泳回收400～1000 bp的DNA片段,与MboI连接接头相连接,连接产物与生物素标记的(AC)15微卫星探针变性及退火,再通过链亲和素偶联磁珠亲和捕捉,经吸附,洗涤及洗脱,然后以洗脱产物为模版,以其中一个接头为引物进行PCR扩增,将扩增产物回收纯化并与pMD18-T载体相连接,转化大肠杆菌DH5a,构建梅花鹿(AC)n微卫星DNA富集文库,经测序分析表明该文库含重组克隆约为1 380个,其中计算得到阳性克隆率为82.9%。梅花鹿微卫星文库的建立将为一步进行梅花鹿基因组结构的分析、梅花鹿遗传连锁图谱的构建、分子进化和系统发育研究、标记辅助选择以及经济性状的QTL定位提供大量的微卫星标记。
- 牛伟萍张丽颖杨润军张嘉保赵志辉张明军
- 关键词：梅花鹿微卫星
- 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原捕获ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2009年
- 用牛病毒性腹泻病毒（BVDV）单克隆抗体包被酶标板，以兔多克隆抗体作为夹心抗体，建立BVDV抗原捕获ELISA（AC-ELISA）检测方法，优化反应条件并对该方法的稳定性等指标进行了测试和评价。结果表明，单抗最佳包被质量浓度为5μg／mL，兔多抗血清最佳质量浓度为10μg／mL；单抗在4℃包被12～24h，多抗在37℃作用1h为双抗体的最佳反应条件；酶标抗体最适稀释度1：10000，最适作用时间为1h；采用1％BSA和1％明胶分别在抗体包被后和加入待检抗原反应后进行两次封闭效果好。用AC—ELISA方法检测临床采集的11份牛腹泻病料和12份健康牛组织样品，同时以病毒分离和RT-PCR检测方法做对比，3种方法符合率很高。研究表明AC—ELISA方法稳定性好，可用于BVDV的临床快速检测。
- 张丽颖刘畅鲍永华赵志辉
- 关键词：单克隆抗体牛病毒性腹泻病毒
