孙芳 作品数:16 被引量:16 H指数:3 供职机构: 上海市第一人民医院 更多>> 发文基金: 福建省科技厅青年创新基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
二羰基化合物对人腹膜间皮细胞VEGF表达的影响 洪富源 孙芳 刘军 姚建高糖对人腹膜间皮细胞局部内皮素系统表达的影响 被引量:2 2006年 目的:研究高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)局部内皮素系统表达的影响,并应用非特异性内皮素受体拮抗剂即ETA/ETBR拮抗剂PD142893进行干预,探讨高浓度葡萄糖透析液导致腹膜受损的机制。方法:以人腹膜间皮细胞株(HMrSV5)为研究对象,采用放免法检测不同时间(12h、24h和48h)、不同浓度(50、100、150、200、250mmol/L)的葡萄糖、甘露醇作用下HPMC分泌的ET-1水平。采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测局部内皮素系统ET-1、ETAR、ETBR及ECE的基因表达。采用ELISA检测不同浓度ET-1、葡萄糖作用下IL-1β水平,并在此基础上加入PD142893,观察IL-1β的变化。结果:(1)正常HPMC分泌低水平的ET-1,高浓度的葡萄糖可诱导HPMC分泌ET-1增加,呈时间和剂量依赖。高浓度的甘露醇作用下,HPMC分泌的ET-1与正常对照组相比未见明显差异。(2)正常HPMC表达完整的ET-1、ETAR、ETBR、ECE mRNA。高糖作用下ET-1、ETAR、ET-BR mRNA表达增强,而高糖对ECE mRNA的表达无明显影响。(3)ET-1、高糖刺激HPMC分泌IL-1β,呈剂量依赖。PD142893可明显减少高糖诱导的IL-1β的分泌。结论:正常HPMC存在局部内皮素系统,高浓度葡萄糖诱导其表达增加,高浓度葡萄糖透析液导致腹膜受损可能部分通过内皮素途径,内皮素可能是导致CAPD患者腹膜纤维化的重要因素。 孙芳 洪富源 姚建 黄一新关键词:腹膜透析 腹膜间皮细胞 内皮素-1 IL-1Β 转化生长因子-β与腹膜纤维化的研究进展 2004年 转化生长因子 β(transforminggrowthfactorbeta ,TGF β)是一种强效的致纤维化因子 。 孙芳 姚建关键词:腹膜后纤维化 腹膜透析 转化生长因子Β 内皮素-1对人腹膜间皮细胞形态及表型转化的影响 【目的】探讨内皮素—1(ET-1)在腹膜纤维化形成中的作用。【方法】相差显微镜下观察人腹膜间皮细胞(HPMC)的形态改变,免疫细胞化学观察细胞角蛋白(CK)、波形蛋白的表达。【结果】1 ET-1 郝静 孙芳 洪富源 姚建文献传递 血小板反应蛋白-1及其与肾脏疾病的关系 被引量:1 2004年 血小板反应蛋白 (TSP)是一种重要的细胞外基质糖蛋白 ,TSP家族成员具有相似的结构、共同的生物学特性和各自独特的功能。TSP1为同源三聚体 ,具有六个功能区 ,通过这些功能区结合位点与不同受体结合发挥多种生物学功能。TSP1具有抑制血管生成和抗肿瘤活性 ,激活潜在的TGF β的特性。多种肾脏疾病与TSP1关系密切。 孙芳 姚建关键词:血小板反应蛋白 肾脏疾病 二羰基化合物对人腹膜间皮细胞VEGF表达的影响 目的血管内皮生长因子(VEGF)是腹膜透析患者腹透流出液中新发现的细胞因子,初步研究提示腹膜间皮细胞能够产生VEGF,而且VEGF能够增加腹膜的通透性、促进血管舒张、新生血管的生成。目前广泛使用热消毒方法处理透析液产生许... 洪富源 孙芳 刘军 姚建文献传递 细胞内活性氧在甲基乙二醛促人腹膜间皮细胞分泌血管内皮生长因子中的作用 被引量:7 2005年 目的:观察葡萄糖降解产物甲基乙二醛(MGO)对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响及细胞内活性氧(ROS)在其中的作用。方法:分别用不同浓度的MGO及抗氧化剂N-酰-L-半胱氨酸(NAC)作用于细胞,用RT-PCR和ELISA方法测定HPMC中VEGF的表达;再以氧化敏感的荧光染料2、7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,流式细胞仪测定细胞内ROS强度。结果:MGO能使细胞内ROS水平明显升高,呈浓度依赖效应;MGO同时以时效和量效方式促进HPMC中VEGF的表达;而NAC能够明显抑制MGO导致的细胞内ROS升高,同时抑制HPMC中VEGF的分泌。结论:MGO可能部分通过诱导细胞内ROS,促进HPMC表达VEGF,从而引起腹膜新生血管的增加,最终导致腹膜失超滤现象。 洪富源 孙芳 刘军 姚建 黄一新 唐知还关键词:人腹膜间皮细胞 活性氧 血管内皮生长因子 分泌血管内皮生长因子 细胞内活性氧 甲基乙二醛 ELISA方法 蛋白激酶C在晚期糖基化终产物促进人腹膜间皮细胞分泌纤维连接蛋白中的作用 被引量:4 2012年 目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对人腹膜间皮细胞合成和分泌纤维连接蛋白(FN)的影响及细胞内蛋白激酶C(PKC)在其中的作用。方法:在体外制备晚期糖基化人血清白蛋白(AGE-HSA),分别用不同浓度的(0,100,500,1 000μg/ml)AGE-HSA作用于人腹膜间皮细胞,用荧光实时定量PCR和ELISA方法测定人腹膜间皮细胞FN的表达;用ELISA方法观察AGEs对人腹膜间皮细胞PKC活性影响,应用PKC激活和抑制剂观察PKC在AGE-HSA促进人腹膜间皮细胞合成FN中的作用。结果:AGE-HSA呈时间剂量依赖性激活人腹膜间皮细胞中的PKC(P<0.05);AGE-HSA同时以时效和量效方式促进人腹膜间皮细胞中FN基因和蛋白的表达(P<0.05);PKC激活剂佛波酯(PMA)也能刺激人腹膜间皮细胞合成FN,先用PMA耗竭细胞内PKC或用PKC抑制剂calphostin C后,可抑制AGE-HSA诱导的FN分泌(P<0.05)。结论:AGEs可能部分通过活化PKC促进人腹膜间皮细胞合成和分泌FN,参与腹膜纤维化。 洪富源 孙芳 刘军 姚建 黄一新关键词:人腹膜间皮细胞 蛋白激酶C 纤维连接蛋白 细胞内活性氧在糖基化终末产物促人腹膜间皮细胞分泌单核细胞趋化因子1中的作用 2010年 目的观察糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对人腹膜间皮细胞(humanperitoneal mesothelial cell,HPMC)分泌单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的作用及细胞内活性氧族(reactive oxygen species,ROS)在其中的作用。方法分别用不同浓度的糖基化人血清白蛋白(advanced glycation end product s-human serum albumin,AGE HSA)及抗氧化剂N乙酰-L半胱氨酸(N acetyl-L cysteine,NAC)作用于细胞,用逆转录多聚酶链反应(RT PCR)法和酶联免疫吸附法(E L I S A)测定HPMC中MC P 1的表达;再以氧化敏感的荧光染料2,7-二氢二氯荧光素(2,7-dichlorofluorescin,DCFH)染色,流式细胞仪测定ROS强度。结果 AGE HSA能使细胞内ROS水平明显升高,呈现浓度依赖效应;AGE HSA同时以时效和量效方式促进HPMC中MCP-1的表达;而NAC能够明显抑制AGE-HSA所导致的细胞内ROS升高,同时抑制HPMC中MCP-1的分泌。结论 AGE HSA可能部分通过诱导细胞内ROS,促进HPMC表达MCP-1。 洪富源 孙芳 刘军 姚建 黄一新 唐知还关键词:人腹膜间皮细胞 活性氧 单核细胞趋化蛋白1 腹膜透析 腹膜炎引起腹膜失超滤发病机制的研究 姚建 于青 赵东杰 刘军 洪富源 孙芳 该项目在临床实验部分采用回顾性分析的方法来收集腹膜透析患者流行病学资料,检测腹透失超滤患者、腹膜炎患者发生前后腹透液、血液IL-1、NOS、NO、VEGF的表达,并分析腹膜透析患者失超滤与透龄、腹膜炎、血清白蛋白、高糖累...关键词:关键词:腹膜炎 腹膜透析 尿毒症