孙晓军
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程更多>>
- β-半乳糖苷酶全细胞催化制备低聚半乳糖工艺优化
- 2014年
- β-半乳糖苷酶能以乳糖为底物生产低聚半乳糖。利用前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种,进行摇瓶发酵并诱导培养。酵母菌体经过离心、洗涤后作为全细胞催化剂用于转化乳糖制备低聚半乳糖。为了提高转化率,首先通过单因素实验,优化了反应的初始p H、温度、乳糖浓度、加酶量和反应时间等因素。在此基础上,采用正交实验进一步优化了反应条件,优化后的最佳条件为:反应初始p H 6.0,反应温度为80℃,乳糖浓度为80%(w/v),加酶量为5 U/m L。在最佳转化条件下,反应24 h,低聚半乳糖的最高转化率为59.9%。与游离酶转化方法相比,该反应体系中的杂蛋白和美拉德反应较少,更有利于低聚半乳糖产品的后续分离。该研究建立的全细胞酶转化方法,具有转化率高、简单易行以及容易操作等优点。
- 段绪果孙晓军吴敬
- 关键词：Β-半乳糖苷酶毕赤酵母低聚半乳糖
- 产β-半乳糖苷酶重组毕赤酵母的发酵条件优化被引量：4
- 2014年
- β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23),又名乳糖酶,是利用乳糖为底物制备低聚半乳糖的关键用酶。利用本研究室前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种,在摇瓶和3 L发酵罐中对发酵条件进行了优化。优化后的的摇瓶发酵条件为:种龄为22 h,初始甲醇浓度为40 g/L,诱导温度26℃,每24 h添加10 g/L甲醇。该条件下诱导表达周期120 h,酶活可达到44.6 U/m L。在摇瓶发酵的基础上,在3 L罐优化了初始诱导菌体浓度。结果显示,当初始诱导菌体浓度(OD600)为200时,发酵液的β-半乳糖苷酶的活力为204.9 U/m L,约为摇瓶酶活水平的4.6倍。
- 段绪果孙晓军吴敬
- 关键词：Β-半乳糖苷酶毕赤酵母发酵条件优化高密度发酵
