周雁翔
- 作品数：7 被引量：18H指数：2
- 供职机构：武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学农业科学更多>>
- 微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法检测α_1-蛋白酶抑制剂活性被引量：3
- 2011年
- 目的建立微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法(以下简称微量滴定板法),用于α1-蛋白酶抑制剂(α1-Pro-teinase inhibitor,α1-PI)的活性检测。方法以微量滴定板为载体,将不同量的α1-PI样品与定量的弹性蛋白酶混合,通过适宜的显色底物对剩余的弹性蛋白酶活性进行测定。用酶标仪测定405 nm处A值的变化,分析试验的有效性,并计算α1-PI样品的活性。优化微量滴定板法的实验条件。用BCS凝集分析仪检测α1-PI的活性,确认样品的工作浓度。采用两种方法检测19份样品的α1-PI活性,分析二者的相关性。结果微量滴定板法的最优实验条件为:样品加样体积50μl,标准曲线范围为(2～14)μg/ml;弹性蛋白酶稀释度为1∶1 400,体积100μl;孵育时间15 min;底物稀释度为1∶10,体积50μl;连续监测A405值10 min。微量滴定板法和BCS法检测19份样品的相关系数大于0.99。结论微量滴定板法检测α1-PI活性的时间更短,同一样品不同稀释度之间检测结果的变异率更低,且检测结果与BCS法相关性良好,可替代全自动的BCS法,降低检测成本。
- 周志军林连珍方亮周雁翔李策生彭良俊
- 关键词：Α1抗胰蛋白酶胰弹性蛋白酶滴定分析法BCS
- 发色底物法快速测定α1-抗胰蛋白酶活性的方法
- 目的：应用发色底物法测定α1-抗胰蛋白酶(α1-Arnitrypsin，α1-AT)生物活性，研究正常人混合血浆为参考标准的血浆(108人份)稀释度范围和测定的影响因素。
方法：采用酶标仪测定抗胰蛋白酶与过量的...
- 周雁翔张爱华张智李策生彭良俊邹汉武
- 关键词：发色底物法Α1-抗胰蛋白酶胰蛋白酶活性测定
- 文献传递
- 不同基础体温的家兔对热原检查结果的影响被引量：11
- 2009年
- 对实验中使用的普通级家兔基础体温进行统计,观察不同基础体温家兔注射血液制品后的升温情况。按照中华人民共和国药典（2005）年版三部的热原检查规定进行测定,将实验家兔基础体温38.0℃-39.6℃分为3组：38.0℃-38.5℃为1组;38.6℃-39.0℃为2组;39.1℃-39.6℃为3组。注射制品后,家兔升温≥0.4℃记为升温家兔,统计升温≥0.4℃的家兔升温百分率并对其进行统计学处理。经卡方检验,升温家兔≥0.4℃的百分率1组与2组、1组与3组有显著性差异（p〈0.05）;2组与3组无显著性差异（p〉0.05）。家兔对热原的敏感性随基础体温的高低而有明显的差异,基础体温偏低的家兔对热原更敏感,其升温幅度大于基础体温偏高的家兔。
- 项庆军李策生胡勇周雁翔杜兵黄时薇
- 关键词：基础体温热原检查
- 检测人血浆蛋白α_1-蛋白酶抑制剂活性的弹性蛋白酶动态显色法的优化及其验证被引量：1
- 2015年
- 目的优化检测人血浆蛋白α1-蛋白酶抑制剂（α1-protease inhibitor,α1-PI）活性的弹性蛋白酶动态显色法,并进行验证。方法以微量滴定板为载体,将不同浓度的α1-PI与特定量的猪胰弹性蛋白酶（porcine pancreaselastase,PPE）混合,测定剩余的弹性蛋白酶催化特定底物的强度,判定样品中α1-PI的含量,通过比较不同浓度酶和底物的组合中标准曲线的线性范围,确定最佳反应条件。对优化的动态显色法进行准确度、精密度验证,并确定标准曲线的线性范围。采用优化后的方法对α1-PI制备工艺进行监控,并筛选冻干配方。结果 PPE与底物的浓度选择分别为0.2 U/ml和1.2 mg/ml。该方法检测α1-PI的线性范围在2-14μg/ml之间,r〉0.99。各浓度样品检测结果的CV均〈4%,回收率在99.4%-104-3%之间,准确性较好;同一样品由同一个实验员在同一试验中连续测定6次的CV为1.8%,同一样品由不同的实验员在不同日期内分别测定3次的CV为1.8%,重复性较好。纯化工艺过程中各样品比活均符合《欧洲药典》规定的〉0.7,总回收率为62.9%;筛选出可较好保护α1-PI活性的配方。结论优化后的弹性蛋白酶动态显色法可用于工艺样品中α1-PI活性的检测。
- 周雁翔周志军林连珍彭焱邹莉胡勇邹炜李策生
- 不同配方的冻干保护剂对人凝血因子Ⅷ制品干热法灭活猪细小病毒效果的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究不同配方的冻干保护剂对人凝血因子Ⅷ制品干热法灭活非脂包膜指示病毒猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)效果的影响。方法取人凝血因子Ⅷ原液,分别加入A、B、C 3种配方(氯化钠浓度为C6 LgTCID50/ml的指示病毒PPV,进行冻干、干热法灭活(100℃30 min),检测残余PPV滴度;用筛选出的最佳配方制备3批人凝血因子Ⅷ半成品,进行冻干和干热法灭活,检测残余PPV滴度,验证PPV灭活效果;按照《中国药典》三部(2010版)人凝血因子Ⅷ的成品检测要求对人凝血因子Ⅷ效价、外观、水分、复溶时间和复溶后外观进行检测。结果在100℃30 min条件下,可有效灭活配方A制备的人凝血因子Ⅷ半成品中的指示病毒PPV,确定配方A为最佳冻干保护剂配方;3批凝血因子Ⅷ经干热灭活后,可使残余PPV滴度下降(4.08±0.02)LgTCID50/0.1 ml,且灭活过程对人凝血因子Ⅷ的生物学活性无明显影响,步骤活性回收率为(91.1±2)%。结论已成功研制出1种冻干保护剂配方,应用干热灭活法对人凝血因子Ⅷ制品中非脂包膜病毒PPV具有较好的灭活效果,该方法与有机溶剂/表面活性剂(solvent/detergent,S/D)法联合去除/灭活病毒,可有效提高人凝血因子Ⅷ产品的安全性。
- 李策生邹莉李陶敬胡勇邢延涛彭焱周雁翔李娟
- 关键词：冷冻干燥猪细小病毒灭活
- 低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀中α_1-抗胰蛋白酶的分离纯化被引量：1
- 2011年
- 目的采用低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀(FractionⅣ,FⅣ)中提取α1-抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin,α1-AT),制备较高纯度的α1-AT制剂。方法 FⅣ沉淀经过滤、ConA Sepharose 4B亲和层析、DEAE Sepharose Fast Flow一步离子交换层析提纯α1-AT,采用SDS-PAGE及区带扫描法分析纯化α1-AT的纯度;紫外分光光度计测定纯化α1-AT蛋白的浓度及回收率;Western blot检测其反应原性;胰蛋白酶抑制实验(TICT)检测纯化α1-AT的活性。结果纯化α1-AT的纯度为97.3%;纯化过程中α1-AT蛋白的平均回收率为20.4%;纯化的α1-AT能与抗人α1-AT抗体特异性结合;平均比活为0.833 PU/mg。结论 从FⅣ中成功纯化获得了纯度较高、具有生物学活性的α1-AT制剂。
- 周雁翔端义坤李策生彭良俊张爱华邹汉武
- 关键词：Α1抗胰蛋白酶层析活性
- 不同基础体温的家兔对热原检查结果的影响
- 对本实验室使用的普通级家兔的基础体温进行统计，观察不同基础体温家兔注射血液制品后的升温情况。按照中华人民共和国药典(2005)年版三部的热原检查规定进行，将实验兔基础体温38.0℃～39.6℃分为3组：38.0℃～38....
- 项庆军李策生胡勇周雁翔杜兵黄时薇
- 关键词：基础体温热原检查血液制品
- 文献传递
