吴风瑞
- 作品数：33 被引量：103H指数：5
- 供职机构：阜阳师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 南方鲇Vasa基因两种亚型cDNA的克隆及其表达被引量：13
- 2008年
- 采用RT-PCR和RACE相结合的方法,从南方鲇分离到Vasa基因的两个亚型scVasa和scVasa-s。它们是同一基因在5′端经选择性剪接的产物,其cDNA全长分别为2525bp和2438bp,编码662和641个氨基酸。两者均具有DEAD-box家族成员特有的8个保守基序和Vasa的典型特征。南方鲇Vasa与银鲫相似性最高(73.3%)。两个亚型均特异地表达于雌雄性腺中。原位杂交结果表明:scVasa主要在卵巢Ⅰ、Ⅱ时相的卵母细胞和精巢的精原细胞和初级精母细胞中表达。半定量PCR结果显示,在生殖周期中,两种亚型在以Ⅱ时相卵母细胞为主体的卵巢恢复期表达均高于以Ⅲ-Ⅳ时相卵母细胞为主体的卵黄生成期。
- 胡重江吴风瑞刘智皓黄宝锋张耀光王德寿
- 关键词：南方鲇选择性剪接RT-PCR原位杂交
- 浅谈师生关系与教学相长被引量：1
- 2014年
- 教师需要与学生在教学活动中相互学习、共同成长。在新课程改革的今天,我们要转变教育观念,更新教育手段,构建平等、民主、合作的师生关系,通过与学生交往达到师生共识、共享、共进,实现教学相长和共同发展。
- 卢晓娟吴风瑞
- 关键词：师生关系教学相长
- 不同供体的克隆胚胎重编程过程中的转录组学分析
- 自然条件下已分化细胞不会自发发生转变为其他类型细胞。通过核移植等实验手段可以将终末分化的体细胞重编程为类胚胎干细胞的多能性干细胞状态,从而实现细胞类型的转化也即重编程。然而体细胞核重编程效率低下,严重制约该技术发展及其应...
- 吴风瑞刘勇张迪王荣李文雍
- 文献传递
- 酒精对雄鼠精液质量及植入前胚胎全基因组DNA甲基化的影响被引量：3
- 2013年
- 采用HE染色法、精子活力与形态学分析技术以及免疫荧光技术分别检测酒精对小鼠肝组织、精子的活力及形态、精子和植入前各时期胚胎的DNA甲基化的影响。HE染色结果表明,与对照组(生理盐水处理45 d)相比,实验组I(20%酒精灌胃30 d,生理盐水处理15 d)及实验组II(20%酒精灌胃45 d)小鼠肝脏出现不同程度的损害;精子活力与形态学分析发现,与对照组相比,实验组I和II精子活力明显降低,但实验组I精子活力高于实验组II,且对照组的精子正常形态精子率高于实验组I和II;免疫荧光结果显示,实验组精子DNA甲基化水平低于对照组,并且实验组I高于实验组II;植入前胚胎的2-细胞、4-细胞期,对照组DNA甲基化水平明显高于实验组,且实验组I高于实验组II,8-细胞期以后,对照组与实验组I无显著性差异,而实验组II却在8-细胞和桑椹胚期低于对照组,到囊胚期,对照组与实验组均无明显差异。酒精对雄鼠精子的破坏作用可能是导致植入前胚胎表观遗传异常的直接原因,且停止酒精摄入后可在一定程度上缓解其带来的一些不利影响。
- 黄继昌王彩红刘勇吴风瑞李文雍王荣
- 关键词：酒精胚胎发育精液质量灌胃
- 怀孕前后酒精摄入对雌鼠植入前胚胎DNA甲基化模式建立的影响被引量：1
- 2013年
- 女性怀孕前后饮酒会对胎儿的发育及神经系统造成不利影响,称为"胎儿酒精综合征"(fetal alcohol spectrum disorders,FASD)。小鼠通常作为研究该病的动物模型。该实验采用体外培养技术及体内冲胚法研究雌鼠怀孕前后酒精摄入对各期植入前胚胎全基因组DNA甲基化模式建立的影响。小鼠植入前胚胎体外培养实验发现,体外实验组I(怀孕前酒精处理组),除8-cell外,其他各期胚胎的DNA甲基化水平明显低于体外对照组;体外实验组II(正常胚胎在含乙醇的培养基中培养),各期植入前胚胎DNA甲基化水平均明显低于体外对照组。体内实验发现,体内实验组I(怀孕前酒精处理组)与体内的实验组II(怀孕后酒精处理组),各期植入前胚胎DNA甲基化水平明显低于体内对照组。体内、外实验结果表明:受精前后酒精对各期植入前胚胎DNA甲基化模式的正确建立造成紊乱,该结果可为进一步揭示FSAD发病机制提供一定的实验基础。
- 黄继昌王彩红刘勇吴风瑞丁彪李文雍王荣
- 关键词：酒精DNA甲基化灌胃
- 小鼠组蛋白去乙酰化酶基因序列分析
- 2013年
- 利用生物信息学方法,通过NCBI和其他生物学数据库及DNAstar、Clustal X等生物信息学软件对小鼠11种去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)的基因结构、开放阅读框、GC含量、氨基酸序列、同源性及染色体定位等问题进行了分析。结果发现小鼠HDACs外显子从10～29个不等,开放阅读框长度从1044～3450bp不等,GC含量约为50%。序列比对分析后发现HDAC1和HDAC2蛋白质序列之间相似性达89.8%,其余HDACs蛋白质序列之间相似性相对较低,HDAC7和HDAC8之间仅为8.8%。系统发生分析表明小鼠11种HDACs也按照酵母种系发育中不同HDACs的结构聚类为Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb和Ⅳ等4个类群,来源于基因复制。染色体定位分析发现除HDAC6和HDAC8位于X染色体外,其余均位于常染色体。研究结果为进一步研究小鼠HDACs转录调控的分子机制和蛋白质功能奠定基础。
- 吴风瑞丁彪刘勇李文雍
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶基因小鼠
- 未成熟卵母细胞的形态与成熟能力、染色质构型和H3K27三甲基化水平的相关性研究被引量：3
- 2014年
- 该文研究未成熟卵母细胞的形态指标与成熟能力、染色质构型和表观遗传模式的相关性,为家畜繁育和人医辅助生殖选卵标准提供参考。以经不同激素处理(N组、P组、H组)的小鼠未成熟卵母细胞作为实验材料,利用滴中孔技术进行体外跟踪培养检测不同形态未成熟卵母细胞的成熟能力,Hoechst33342标记DNA AT双键研究染色质构型,H3K27三甲基化抗体检测全基因组H3K27三甲基化水平差异。结果表明,H组小鼠卵母细胞中,细胞质直径较小的更适合在滴中孔系统内培养成熟[(71.63±1.02)μm,A形态vs(68.33±0.97)μm,B形态,P<0.05],核仁直径和透明带厚度与卵母细胞成熟能力无关。A形态卵母细胞NSN型(non-surround nucleolus)比例高于SN型(surround nucleolus)(78.57%vs 21.43%),B形态卵母细胞SN构型比例高于NSN构型(65.12%vs34.88%)。N、P、H三组小鼠卵母细胞H3K27三甲基化水平差异不显著,但N组小鼠中,A形态未成熟卵母细胞H3K27三甲基化水平显著低于B形态组(P<0.05)。P组和H组小鼠中,A形态卵母细胞与B形态卵母细胞H3K27三甲基化水平差异不显著。如果不考虑激素处理分组,则A形态卵母细胞H3K27三甲基化水平显著低于B形态卵母细胞H3K27三甲基化水平(P<0.05)。综上可知,卵母细胞形态可以反映其成熟能力、染色质构型和H3K27三甲基化水平,激素处理影响H3K27三甲基化水平。
- 刘勇张领贾二腾花学洋李漫漫张贺丁彪吴风瑞王慧利李文雍
- 关键词：体外培养
- 南方鲇两种生长激素受体的结构分析及其组织分布和激素调节被引量：13
- 2006年
- 采用生物信息学方法,从东方(Fugurubripes)基因组中分离出两种不同基因编码的GHR1(fGHR1)和GHR2(fGHR2)。随后设计引物,采用RT-PCR和SmartTMRace相结合的方法从南方鲇(Silurusmeridionalis)肝脏中克隆出两种不同基因编码的生长激素受体,即GHR1(scGHR1)和GHR2(scGHR2)cD-NA,其全长分别为1985bp(编码602个氨基酸)和2300bp(编码553个氨基酸)。这两种受体都含有生长激素受体典型的标志性基序FGDFS,以及细胞内属于细胞因子受体家族共有的Box1和Box2序列框。同时两者又存在差异,表现在胞外半胱氨酸残基和胞内酪氨酸残基数目的不同。采用半定量RT-PCR方法研究了scGHR1和scGHR2在南方鲇各组织中表达量的差异,结果表明:scGHR1和scGHR2有广泛的组织分布,在肝脏中两者的表达量最高。用17β-雌二醇(E2)、17α-甲基睾酮(MT)和可的松(cortisol)对南方鲇进行药物处理,结果表明E2能够下调肝脏scGHR1和scGHR2mRNA水平,而MT上调scGHR1和scGHR2mRNA水平。同时,经cortisol处理后scGHR1mRNA表达水平上升,而scGHR2mRNA表达水平不变。
- 章力黄希贵焦保卫吴风瑞王德寿
- 关键词：南方鲇生长激素受体激素调节
- 鲈鱼cxcr4 cDNA克隆和序列分析
- 2013年
- 趋化因子受体(cxcr4)是一类重要的免疫调节因子受体,对原始生殖细胞的迁移和存活具有十分重要的作用。在对脊椎动物cxcr4进行初步生物信息学分析基础上设计引物,采用RT-PCR和RACE相结合的方法从鲈鱼卵巢克隆了cxcr4a全长和4b部分cDNAs序列,并预测其编码的氨基酸序列。结果表明,由于鱼类基因组经历一次特有的复制,cxcr4在鱼类存在两个复制基因。鲈鱼cxcr4a cDNA全长为1432 bp,编码311个氨基酸;cxcr4b部分cDNA片段长为905 bp,编码285个氨基酸。将鲈鱼cxcr4序列与所有已克隆的硬骨鱼类进行同源性比较,结果显示硬骨鱼类保守性较高,所有已经克隆的cxcr4按照进化地位的不同成簇聚类,表现出了较高的同源性。
- 吴风瑞丁彪刘勇李文雍
- 关键词：鲈鱼CXCR4基因克隆
- 热应激对猪卵母细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性及染色质构型的影响被引量：1
- 2016年
- 将屠宰场采集的猪卵巢分为热应激组和对照组,分别检测两组未成熟卵母细胞的各项指标。利用亮甲酚蓝染色法研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性,对比分析热应激对细胞代谢活性的影响;利用Hoechst33342标记DNA区分染色质构型,对比分析热应激对细胞染色质构型的影响。结果表明:热应激组卵母细胞BCB+比例显著低于对照组(P<0.05)。热应激组卵母细胞的各期染色质构型比例与对照组比例差异不显著(P>0.05)。BCB+和BCB-组卵母细胞GV1-GV3染色质构型差异不显著(P>0.05),但对照组BCB+卵母细胞的GV4构型比例明显高于BCB-(P<0.05),且GVBD差异不显著(P>0.05);而热应激组BCB+卵母细胞的GVBD比例明显低于BCB-(P>0.05),且GV4差异不显著(P>0.05)。综上,热应激对猪未成熟卵母细胞造成的损伤主要是影响了细胞的代谢活性,对细胞染色质构型的影响不大。
- 刘勇张领吴晓庆卫朝辉王艳红王启磾高迪丁彪吴风瑞王荣李文雍
- 关键词：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶猪卵母细胞热应激
