刘缙
- 作品数：10 被引量：67H指数：6
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家转基因植物研究与产业化专项教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14转化小麦被引量：7
- 2011年
- 【目的】利用基因枪将优质高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14导入普通小麦栽培品种绵阳19,为利用优质基因进行小麦品质改良奠定基础。【方法】构建小麦优质高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14的胚乳特异性植物表达载体,利用基因枪将其转入不含该亚基的小麦品种绵阳19幼胚愈伤组织中,经潮霉素抗性筛选、PCR检测后,阳性植株进行PCR-Southern和Southern杂交验证,利用SDS-PAGE分析目的基因在转基因后代籽粒中的表达。【结果】从转化的652块愈伤组织中共获得6株转基因阳性植株,转化效率0.92%。转化后代种子分析表明,1Bx14在部分转基因后代种子中表达,但同时也导致部分内源高分子量麦谷蛋白亚基基因不同程度的沉默。【结论】本研究成功地将小麦高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14导入普通小麦绵阳19中,并在部分后代种子中得到了表达。
- 刘香利金伟波刘缙赵惠贤郭蔼光
- 关键词：小麦高分子量麦谷蛋白亚基
- 黄瓜高效遗传转化体系的建立及银杏抗菌肽转化被引量：7
- 2011年
- 建立黄瓜的高效再生和遗传转化体系,并进行银杏抗菌肽GK-2的遗传转化。研究结果表明,MS6(MS+0.005 mg/L TDZ+0.20 mg/L IAA)培养基适于黄瓜愈伤组织的形成和不定芽分化,7 d即可分化出不定芽,出愈率和分化率分别高达100%和86.67%。进一步用带有银杏抗菌肽GK-2目的基因的农杆菌转化黄瓜,筛选出了侵染时间20 min、共培养时间3 d以及卡那霉素抗性筛选质量浓度为100 mg/L的最佳转化体系。利用该体系转化黄瓜,获得的转化植株阳性率高达17.9%,并对黄瓜枯萎病表现出明显的抗性。
- 田花丽刘缙张彦锋刘君郭蔼光
- 关键词：黄瓜
- 黄瓜转新型抗菌蛋白基因GNK2-1及其抗枯萎病的研究被引量：7
- 2010年
- GNK2-1为一种来自银杏(Ginkgo biloba)种仁的新型抗真菌蛋白,具有较强的真菌抗性且性质稳定。序列分析表明,其结构与所有已知的抗真菌蛋白不同,而与富含半胱氨酸的植物类受体激酶的胞外结构域相似。为探索GNK2-1基因在黄瓜(Cucumis sativus)抗病反应中的作用,利用基因重组技术构建了GNK2-1的高效组成型表达载体,并利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转入黄瓜栽培品种农城3号(Cucumis sativus' Nongcheng No.3')基因组中。通过对获得的抗性植株进行PCR、RT-PCR和Western blot检测分析,结果表明GNK2-1基因可在T0代转基因植株中转录表达,并能在T1代转基因黄瓜中稳定遗传。离体枯萎病抗性鉴定结果表明,转GNK2-1基因的黄瓜对枯萎病的抗性增强,GNK2-1可以作为黄瓜抗病性改良的潜在基因资源。
- 刘缙田花丽王亚红郭蔼光
- 关键词：抗菌蛋白黄瓜枯萎病转基因
- 小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因的花粉管通道法转化被引量：8
- 2008年
- 【目的】利用优质高分子量麦谷蛋白亚基对小麦进行遗传转化和品质改良。【方法】采用花粉管通道法,将小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因导入洛阳8716、陕354、陕893、小偃107和陕150 5种不含该亚基的小麦品种中,转化后代在大田播种出苗后,利用小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因特异性引物进行PCR检测,分析其转化率。【结果】不同品种、不同处理间转化率存在很大差异,其中以陕354授粉后切去柱头,滴加50 ng/μL DNA液处理的转化率最高,为1.01%,所有转化材料的平均转化率为0.56%。【结论】利用花粉管通道法对小麦进行遗传转化是可行的。
- 刘香利刘缙郭蔼光赵惠贤金伟波
- 关键词：小麦花粉管通道法转基因小麦PCR法检测
- 小麦基因枪转化体系的建立及小麦HMW-GS14基因的基因枪转化
- 由多亚基组成的高分子量(HMW)谷蛋白是小麦种子中一类重要的贮藏蛋白，占种子总蛋白的量的10﹪以上。大量研究表明，小麦的面包烘烤品质与小麦的高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)组成密切相关。因此，利用基因工程将优质亚基导...
- 刘缙
- 关键词：导入小麦基因枪转化转化受体面包烘烤品质麦谷蛋白亚基
- 文献传递
- 小麦幼穗的离体培养及其影响因素研究被引量：11
- 2007年
- 为了确立适于小麦幼穗遗传转化的组织培养体系,对8个小麦品种的幼穗通过组织培养方法,研究了不同基因型、培养基对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,不同小麦品种幼穗愈伤组织诱导出愈率差异不大,而分化率却差异明显,其中绵阳19分化率最高,平均可达72.9%,洛阳8716次之,平均为61.2%;分化培养基对分化率也有很大影响,在选用的2种分化培养基中,郑麦9023幼穗愈伤组织的分化率差异最大,而洛阳8716的差异最小;小偃22、西农88、郑麦9023和陕150的幼穗愈伤组织,在分化培养基B中分化率较高,而陕354、绵阳19和小偃107则在分化培养基A中较高;幼穗愈伤组织分化最佳温度为20-22℃,光照强度3 000 lx。因此,在所选用的8个小麦栽培品种中,绵阳19和洛阳8716的幼穗愈伤组织可作为遗传转化的受体材料。
- 刘香利刘缙郭蔼光赵惠贤
- 关键词：小麦幼穗愈伤组织分化
- 小麦不同外植体离体培养与再生研究被引量：18
- 2008年
- 为了研究小麦组织培养的影响因素,对6个小麦品种的幼胚、幼穗以及成熟胚进行组织培养,研究不同基因型、外植体以及培养基对愈伤组织诱导及分化再生的影响。结果表明,不同小麦品种幼胚、幼穗以及成熟胚愈伤组织诱导率均在90%以上,且差异不大,而分化率和再生率却表现出很大差异。总体来说,供试外植体幼胚再生率最高,幼穗次之,成熟胚最低。绵阳19幼胚再生率最高,为54%,其最佳激素培养基为MS+KT 1.0 mg/L+IAA 1.0 mg/L;其次为小偃107和小偃22的幼胚愈伤组织。幼穗愈伤组织中绵阳19愈伤组织再生率最高,为27.5%,其次为洛阳8716。成熟胚愈伤组织培养中陕354再生率最高,为25.1%,优于其幼穗愈伤组织,其次为绵阳19的成熟胚愈伤组织。
- 刘香利刘缙郭蔼光赵惠贤
- 关键词：小麦幼胚幼穗成熟胚
- 低分子量麦谷蛋白基因XYGluD3-LMWGS1原核表达增溶体系的探索
- 2008年
- 为研究SUMO标签增溶体系和小麦低分子量麦谷蛋白亚基功能,利用SUMO标签构建XYGluD3-LM-WGS基因原核表达可溶性增强的系统,采用PCR方法从已有质粒XYGluD3-LMWGS1/pGEM-Teasy中克隆到该基因不含上游启动子片段XYGluD3-LMWGS1-no Promoter 798 bp(简称LnoP),构建原核表达载体LnoP/pGEX-4T-1,并借助已有质粒SUMO1/pET-41a(+)构建原核表达载体LnoP-SUMO1/pET-41a(+)与LnoP-SUMO1-N2/pET-41a(+)以及LnoP-SUMO1/pET-32a(+),分别诱导表达融合蛋白分析其可溶性,结果显示;(1)融合蛋白GST-LnoP、GST-SUMO1-LnoP、SUMO1-LnoP和Trx-SUMO1-LnoP表达成功;(2)电泳和Western blot分析显示,GST-LnoP和GST-SUMO1-LnoP的可溶蛋白表达均为电泳不可见,SUMO1-LnoP与Trx-SUMO1-LnoP有微量可溶表达.结果表明,试验首次实现人的SUMO1标签在麦谷蛋白低分子量亚基中的融合表达;尽管人的SUMO1做为融合标签对于增加低分子量麦谷蛋白D位点亚基可溶性的作用并未达到预期效果,但研究结果为SUMO标签增溶体系的建立和小麦低分子量麦谷蛋白亚基功能研究奠定了基础.
- 刘曾甄刘缙郭蔼光
- 关键词：LMW-GS半胱氨酸残基原核表达
- 银杏种仁抗菌蛋白基因工程研究及小麦胚乳特异启动子的鉴定和评估
- 本文分离纯化了一种来自银杏(Ginkgo biloba)种仁的抗真菌蛋白Gnk2-1,具有较强体外抗真菌活性且性质稳定。MALDI-TOF-MS鉴定,该蛋白与一种新型抗菌蛋白Gnk2(ginkbilobin-2)具较高匹...
- 刘缙
- 关键词：银杏抗真菌蛋白小麦
- 文献传递
