目的:探讨完全睡眠剥夺对大鼠caspase-3的影响及其导致记忆、认知等功能障碍的机制。方法:取Sprague-Dawley大鼠35只,随机分为正常对照组、大平台对照组和完全睡眠剥夺组。其中正常对照组(NC)5只大鼠,正常笼养;大平台对照组(TC)只有72、96及120 h 3个时间点,每个时间点5只大鼠;完全睡眠剥夺组(TSD)也有72、96及120 h 3个时间点,每个时间点5只大鼠。采用小平台水环境法建立完全睡眠剥夺模型,在不同的时点处死大鼠后运用免疫组化SP法检测各组大鼠海马和皮质caspase-3的分布规律和动态变化。结果:caspase-3在各组的海马和皮质均有表达,随着睡眠剥夺时间的延长,caspase-3的表达逐渐增加,与正常对照组、大平台对照组差异有显著性(P<0.01)。结论:完全睡眠剥夺能引起大鼠海马和皮质caspase-3的表达增加,并随睡眠剥夺时间的延长而渐趋明显。可能是完全睡眠剥夺引起大鼠神经元调亡,进而引起大鼠记忆、认知等功能障碍的机制之一。
背景:以往对脑缺血再灌注后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific protease3,Caspase-3)的表达均缺乏长时间的动态观察。目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞移植对暂时性脑缺血大鼠脑组织Caspase-3表达的影响。设计:随机对照动物实验。材料:清洁级成年SD大鼠60只,随机分为4组:正常对照组5只、缺血再灌注组5只、单纯细胞移植组25只、基因修饰细胞移植组25只。另取清洁级新生SD大鼠数只,用于分离培养神经干细胞。方法:除正常对照组外,其余3组大鼠按改良性线栓法制备暂时性脑缺血模型。再灌注3d,单纯细胞移植组从右侧侧脑室每只注入20μL神经干细胞悬液,含(4.0～5.0)×105个神经干细胞;基因修饰细胞移植组每只注入等量胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞悬液;缺血再灌注组每只注入20μL生理盐水。正常对照组、缺血再灌注组在缺血再灌注1周麻醉处死动物,单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组分别在缺血再灌注1,2,3,5,7周麻醉处死动物,5只/时间点。主要观察指标:采用免疫组织化学SP法观察Caspase-3在海马和额顶皮质表达及分布特点。结果:免疫组织化学染色显示,Caspase-3免疫阳性产物位于细胞核、细胞质和部分突起。在海马:单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均随再灌注时间的延长而逐渐减少;除缺血再灌注第1周外,其余各时间点基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均明显少于单纯细胞移植组(P<0.05)。在额顶皮质:单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数亦均随再灌注时间的延长而逐渐减少;除缺血再灌注第1,2周外,其余各时间点基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均明显少于单纯细胞移植组(P<0.05)。结论:胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞移植通过
