倪博
- 作品数：33 被引量：40H指数：4
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- 相关领域：农业科学医药卫生航空宇航科学技术一般工业技术更多>>
- 支原体脂蛋白及其变异与宿主互作研究进展被引量：13
- 2013年
- 脂蛋白是支原体的重要结构,在支原体与宿主间的互作中有重要作用,近些年越来越多的报道指出脂蛋白在支原体毒力及致病性中占有重要地位。介绍支原体脂蛋白的特性和功能,黏附作用,致炎性反应和诱导细胞凋亡的作用。进一步阐述脂蛋白在基因家族的调控下通过ON/OFF开关、大小变异、结构重组、基因水平转移及抗原调节等发生抗原相位变异的机制,以及脂蛋白变异在支原体致病力方面的影响和重要生物学意义。
- 倪博白方方刘茂军冯志新熊祺琰魏建忠邵国青
- 关键词：支原体脂蛋白抗原变异
- 猪肺炎支原体强弱毒株感染后呼吸道特异性sIgA抗体分泌规律差异性研究
- (目的)检验猪肺炎支原体强毒株与弱毒株感染后呼吸道sIgA抗体活性,并比较其抗体分泌规律差异。(方法)分别使用猪肺炎支原体强毒JS株和弱毒168株接种实验猪,同时设置健康猪为对照组,按时采集鼻拭子样本。通过ELISA检测...
- 倪博白昀甘源杨浩韦艳娜华利忠熊祺琰刘茂军邵国青冯志新
- 关键词：猪肺炎支原体强弱毒株SIGA
- 猪流感H3N2型病毒特异性sIgA抗体分泌规律研究被引量：2
- 2017年
- 目的研究不同品种猪应答猪流感病毒感染,呼吸道分泌特异性sIgA抗体的分泌规律,以及针对不同抗原蛋白sIgA抗体的分泌差异。方法将猪流感病毒A/swine/Nanjing/51/2010(H3N2)滴鼻感染试验猪(1×10~7 TCID50/mL,2mL/头),采集感染后21d内不同时间点的鼻拭子样品,用M1、NS1和PB1三种重组蛋白分别建立的间接ELISA方法检测特异性sIgA抗体,并分析其分泌规律及差异。结果显示针对3种重组蛋白的特异性sIgA抗体在整个检测周期内,分泌规律相似,差异无统计学意义,均表现为感染后第5d特异性sIgA抗体水平迅速升高,第14d达到高峰,随后开始逐渐下降。在不同品种猪之间,仅巴马猪分泌抗PB1蛋白的sIgA抗体在第14d和21d时高于二元猪(P<0.05),而抗M1和抗NS1蛋白的sIgA抗体在两种品种猪之间无统计学差异(P>0.05)。结论初步探索了猪在感染猪流感病毒后特异性sIgA黏膜抗体的分泌规律,为进一步研究SIV黏膜抗体诊断试剂奠定基础。
- 白昀舒采松甘源甘源倪博吴猛华利忠冯志新
- 关键词：猪流感病毒
- 1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的制备与鉴定猪鼻支原体单克隆抗体,用于猪鼻支原体诊断及致病机理的研究。方法将猪鼻支原体全菌蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。鉴定其抗体亚型并对纯化单抗的效价、特异性进行鉴定。将该单抗用于菌落免疫杂交试验、间接免疫荧光试验。结果获得了1株猪鼻支原体单抗,命名为Mhr-08。该单抗的亚型属于IgG1,轻链为κ型。ELISA测定该纯化单抗效价为1∶102 400,Western-blot检测结果表明,该单抗与猪鼻支原体全菌蛋白在43kDa处出现特异性反应条带,与猪其他支原体、大肠杆菌及KM2培养基无交叉反应;该单抗为猪鼻支原体表面膜蛋白抗体,可成功应用于菌落免疫杂交试验;将其用于间接免疫荧光试验可成功检测出黏附于猪气管上皮细胞上的猪鼻支原体。结论成功制备和鉴定出1株猪鼻支原体单克隆抗体,该特异性单抗的获得为猪鼻支原体的诊断及致病机理的研究提供了工具。
- 田瑞雨熊祺琰倪博王佳韦艳娜韦艳娜冯志新
- 关键词：单克隆抗体特异性
- 猪肺炎支原体对上皮细胞氧化损伤的分析被引量：4
- 2014年
- 分析猪肺炎支原体致病株168和弱毒株168L对上皮细胞的氧化损伤。用猪肺炎支原体168和168L株体外感染猪肺泡上皮细胞(SJPL),通过对感染细胞进行MTT和NO检测,筛选感染时间和感染剂量,利用间接免疫荧光(IFA)检测细胞上Mhp,通过H2O2和DAPI验证细胞损伤。结果:在5×106 CCU感染36h时,细胞活力相同,Mhp168株感染细胞的NO浓度显著高于Mhp168L株(P<0.05);H2O2检测显示Mhp168对细胞的氧化损伤显著高于Mhp168L株,同时都显著高于对照(P<0.01);IFA观察分析显示Mhp168株在细胞上的黏附量高于Mhp168L。DAPI染色显示Mhp168对细胞造成的损伤程度高于Mhp168L。通过优化感染时间和感染剂量,找到了猪肺炎支原体强弱毒株对上皮细胞损伤的显著差异点,分析了猪肺炎支原体强弱毒株对上皮细胞的氧化损伤,为深入研究猪肺炎支原体强弱毒株感染细胞的差异机制奠定了基础。
- 李彦伟刘茂军刘蓓蓓武昱孜倪博白方方纪燕张映邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体上皮细胞
- 半固体培养法制备非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体
- 2024年
- 为了快速、高效制备非洲猪瘟病毒(ASFV)单克隆抗体,本研究通过大肠杆菌系统表达并纯化了ASFV重组蛋白pA104R。以ASFV重组蛋白pA104R为抗原,分别比较了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂和常规弗氏佐剂两种免疫策略,并重点比较半固体培养法和常规有限稀释法来制备ASFV pA104R单克隆抗体的效率。结果显示,本研究获得了相对分子质量为3.5×104的ASFV重组可溶性蛋白pA104R,通过其与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫小鼠,在第21 d即可达到融合要求,本试验方法(重组蛋白pA104R与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫)较重组蛋白pA104R与常规弗氏佐剂免疫节省14 d时间。通过半固体培养法筛选单克隆的试验周期比有限稀释法缩短28 d,并减少了亚克隆的工作量。半固体培养法获得5株阳性杂交瘤细胞,挑选效价较高的3株(9A4、9H6、11F5)进行鉴定,重链均为IgG,轻链均为KAPPA。纯化后的3株单克隆抗体针对pA104蛋白和全病毒蛋白质的效价分别达1∶160000~1∶320000和1∶200~1∶400。本研究优选了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂结合半固体培养法筛选pA104R的单克隆抗体,为单克隆抗体制备提供了快速高效的新策略。
- 刘蓓蓓韦艳娜韦艳娜谢星陈蓉郝飞张珍珍倪博袁厅郝飞
- 关键词：非洲猪瘟病毒单克隆抗体
- 猪肺炎支原体强弱毒株感染后呼吸道特异性sIgA抗体分泌规律差异性研究
- 引言本研究使用自建的猪肺炎支原体sIgA抗体ELISA检测方法检测宿主应答猪肺炎支原体强弱毒株感染后,呼吸道分泌特异性sIgA抗体的差异性,为猪肺炎支原体的感染与免疫鉴别诊断研究提供基础.材料与方法分别使用猪肺炎支原体强...
- 倪博白昀甘源杨浩韦艳娜华利忠熊祺琰刘茂军邵国青冯志新
- 猪肺炎支原体LAMPs诱导caspase3激活介导猪肺泡上皮细胞凋亡
- 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma Pneumoniae of Swine,MPS)的主要病原体,该病是一种慢性的呼吸道疾病,以咳嗽和气喘为主要的临床...
- 倪博
- 关键词：猪肺炎支原体肺泡上皮细胞
- 猪鼻支原体vlp家族重组蛋白的构建表达及黏附宿主细胞功能检测
- 目的 猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)在临床猪场的感染率极高,可引起猪的多种慢性炎症,同时其与多种人类肿瘤具有相关性,属人兽共患性病原。目前对猪鼻支原体的黏附因子及致病机制等尚不清楚。本研究以猪鼻支...
- 王佳熊祺琰纪燕倪博张必雄马庆红刘茂军冯志新邵国青
- 一种猪鼻支原体抗原含量检测试剂盒及其应用
- 本发明提供一种猪鼻支原体抗原含量检测试剂盒及其应用，属于生物工程技术领域。所述猪鼻支原体抗原含量检测试剂盒，包括抗猪鼻支原体单克隆抗体6D5和兔抗猪鼻支原体P37蛋白多克隆抗体；所述抗猪鼻支原体单克隆抗体6D5是由杂交瘤...
- 韦艳娜熊祺琰刘蓓蓓王佳倪博袁厅冯志新邵国青王丽
