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于松梅: 作品数：10 被引量：37H指数：5; 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>; 发文基金：公益性行业(农业)科研专项科技基础性工作专项公益性行业科研专项更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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一种多基因家族大片段基因缺失的非洲猪瘟弱毒株及其构建方法和应用: 本发明提供一种多基因家族大片段基因缺失的非洲猪瘟弱毒株及其构建方法和应用，所提供的自然弱毒株，所述的自然弱毒株相比于非洲猪瘟强毒株，其基因组缺失左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段。本发明还...; 戈胜强王志亮吴晓东吕艳左媛媛韩秀琚张永强徐天刚任炜杰于松梅韩乃君刘雨田屈海龙巩明霞赵永刚郑冬霞胡永新赵云玲迟田英王英丽包静月李金明

2013—2014年H7亚型禽流感病毒遗传进化分析被引量：5: 2015年; 对2013—2014年15株不同来源的H7亚型禽流感病毒国内分离株进行了基因组测序与遗传进化分析。结果显示,15株H7亚型禽流感病毒具有遗传多样性,可分为2种亚型:13株为H7N9亚型,2株为H7N3亚型。HA蛋白裂解位点附近氨基酸分析显示所有H7亚型流感分离株均为低致病性毒株。基因组遗传进化分析显示,13株H7N9亚型禽流感病毒均与2013年人源分离株同源性较高,但具有2种遗传学特性,13株病毒的PB2、PA、HA、NP、NA、M和NS基因高度同源,而PB1基因来源于2个不同分支。2株H7N3亚型流感病毒与国内鸭源分离株同源性较高。15株H7亚型禽流感病毒PB2蛋白均未出现627K、701N等与哺乳动物适应性相关的氨基酸变异。13株H7N9亚型禽流感病毒HA裂解位点附近氨基酸(EIPKGR/GL)与人源H7N9病毒一致,且HA蛋白和M2蛋白分别具有与哺乳动物适应性和金刚烷胺耐药性相关的标志性变异,而2株H7N3亚型禽流感病毒未出现上述氨基酸变异。; 王静静刘华雷郑东霞赵云玲戈胜强左媛媛于松梅王英丽吕艳; 关键词：H7亚型禽流感病毒遗传进化氨基酸序列分析

新城疫强毒株荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用被引量：5: 2018年; 基于国内流行的新城疫病毒强毒株F蛋白裂解位点分子特征设计特异性引物及Taqman探针,建立了一种可检测新城疫强毒株的一步法实时荧光定量RT-PCR方法。通过体外转录法制备cRNA标准品作为阳性模板制作标准曲线以及临床样品的检测绘制出ROC曲线,对诊断指标进行系统评价。结果显示：该方法的标准曲线为Y=-3.390X＋38.23,相关系数R2为0.9999;灵敏度试验显示,该方法的最低检测限为2拷贝/μL,比常规RTPCR高10倍;特异性试验显示该方法与常见禽病病毒无交叉反应;重复性试验的组内和组间的变异系数分别低于1%和1.5%。通过检测1 974份临床样品绘制ROC曲线显示,ROC曲线下面积为0.9861,当Youden Index为93.12时,cutoff值设为35,诊断的敏感性和特异性分别为94.82%、98.3%,与病毒分离方法的Kappa系数为0.919。本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好、诊断准确性极好,给实验室提供一种快速、实用的检测临床样品的方法。; 罗瑶瑶王静静吕艳赵云玲郑东霞魏润宇于松梅于松梅左媛媛单虎刘华雷刘华雷; 关键词：强毒荧光定量RT-PCR ROC曲线

新城疫病毒DF-1细胞蚀斑纯化方法的建立被引量：7: 2014年; 本研究对DF-1细胞的培养条件及新城疫病毒(NDV)DF-1细胞的蚀斑纯化方法进行了优化摸索,结果显示相较于DMEM培养基,DF-1细胞更适宜在含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基中生长,DF-1细胞以3×105/孔的剂量覆盖6孔板能获得最佳的铺板效果,吸附病毒后1.5h覆盖第1层琼脂,48h后覆盖第2层琼脂能获得最佳的蚀斑形成效果。通过对蚀斑纯化株F和HN基因测序分析,结果表明蚀斑纯化后无任何变异。通过此方法可在1个星期之内获得稳定的纯化毒株,方法简单、可重复性强、纯化效率高。; 赵明戈胜强王静静赵云玲郑东霞左媛媛于松梅王晓真刘春菊王英丽刘华雷包静月吴晓东单虎王志亮; 关键词：新城疫病毒

I类和II类新城疫病毒复合RT-PCR鉴别诊断技术: 刘华雷王志亮赵云玲郑东霞王君玮张维徐天刚吕燕李金明孙军峰孙承英吴延功左媛媛于松梅; 1.任务来源：青岛市科技发展计划项目，项目名称：小反刍兽疫等重大动物疫病快速检测技术研究，项目编号：07-2-3-5-jch。2.应用领域和技术原理：主要应用于国内新城疫疫情诊断、检测、监测、流行病学调查等。技术原理：针...; 关键词：; 关键词：新城疫病毒动物疫病

基因VII型新城疫病毒荧光定量RT-PCR快速检测技术: 刘华雷王志亮徐天刚赵云玲郑东霞王君玮张维吕燕李金明孙军峰孙承英吴延功左媛媛于松梅; 1.任务来源：青岛市科技发展计划项目。项目名称：小反刍兽疫等重大动物疫病快速检测技术研究，项目编号：07-2-3-5-jch。2.应用领域和技术原理：主要应用于国内新城疫疫情诊断、检测、监测、流行病学调查等。技术原理：通...; 关键词：; 关键词：诊断试剂流行病学调查

五种核酸提取试剂盒对新城疫病毒RNA提取效率的比较被引量：5: 2017年; 本研究采用罗氏、天隆、赛默飞世尔等公司生产的5种核酸提取试剂盒,对新城疫病毒RNA的提取效率进行比较,以优选出提取效率高、耗时短、成本低的核酸提取方法,为各级实验室开展新城疫病毒核酸检测提供技术参考。采用5种商品化核酸提取试剂盒,对不同浓度(稀释度10~0~10^(-8)/EID50 10^(8.3))的新城疫病毒标准样品进行RNA提取,通过实时定量荧光RT-PCR进行检测,以Ct值评价5种试剂盒的RNA提取效率,并对试剂盒的RNA提取时间和价格等进行综合比较分析。结果显示:High Pure Viral RNA Kit(罗氏)、动物疫病病毒RNA核酸提取试剂盒(天隆)和Lab Serv Viral Total NA Kit(赛默飞世尔)的RNA提取效率较高。其中,Lab Serv Viral Total NA Kit对低浓度样本的RNA提取效率最高,价格最便宜;Tian Long的RNA提取所需时间也较短,但操作最为简便。综合提取效率、时间及成本等因素,分析认为Lab Serv Viral Total NA Kit(赛默飞世尔)性价比最高,适用于大批量临床样品的集中检测。; 吕艳王静静罗瑶瑶李林赵云玲郑东霞左媛媛于松梅刘华雷王志亮; 关键词：新城疫病毒 RNA提取荧光RT-PCR

禽副黏病毒4型荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 2014年; 本研究根据GenBank发表的禽副黏病毒4型(APMV-4)基因组序列,在保守区域分别设计了特异性RT-PCR引物和荧光探针,初步建立了可用于检测APMV-4的荧光RT-PCR方法。特异性试验表明本方法特异性强,与新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、减蛋综合征病毒(EDSV)等没有交叉反应。灵敏度试验表明本方法的检测下限为1 EID50,比常规RT-PCR的敏感度高100倍左右。本研究所建立的荧光RT-PCR方法具有快速、准确、灵敏等优点,可用于APMV-4样品的检测。; 王静静刘华雷王英丽郑东霞赵云玲吕艳左媛媛于松梅王志亮; 关键词：荧光RT-PCR 特异性灵敏度

一种多基因家族大片段基因缺失的非洲猪瘟弱毒株及其构建方法和应用: 本发明提供一种多基因家族大片段基因缺失的非洲猪瘟弱毒株及其构建方法和应用，所提供的自然弱毒株，所述的自然弱毒株相比于非洲猪瘟强毒株，其基因组缺失左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段。本发明还...; 戈胜强王志亮吴晓东吕艳左媛媛韩秀琚张永强徐天刚任炜杰于松梅韩乃君刘雨田屈海龙巩明霞赵永刚郑冬霞胡永新赵云玲迟田英王英丽包静月李金明

2011～2015年中国Ⅰ类新城疫病原学监测与遗传进化分析被引量：15: 2017年; 为了研究Ⅰ类新城疫病毒在中国的分布及分子演化特征,2011~2015年按照《国家动物疫病监测与流行病学调查计划》,随机从国内26个省市945个采样点共采集家禽口咽、泄殖腔拭子及环境样本53 176份,通过病毒分离和RT-PCR对中国I类新城疫病毒的分布和分子特征进行了调查分析。结果显示,2011~2015年共分离到I类新城疫病毒1 472株,其中,2011年病毒分离率最高,随后病毒分离率有所下降;Ⅰ类新城疫病毒分布范围广,在中国22个省市均分离到病毒,病毒主要分布于华东、华中、华南和西南地区;活禽批发市场和农贸市场的I类新城疫阳性率明显高于养殖场和屠宰场;分离株主要来源于鸡(1 182株),鸭、鹅、鸽子和环境样本中也存在I类新城疫病毒;所有分离株可划分为3个基因型(1~3型),其中基因3型为近年来中国流行的主要基因型。; 王静静吕艳赵云玲郑东霞左媛媛于松梅刘华雷王志亮; 关键词：遗传进化分析

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