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人血清类胰蛋白酶含量测定方法的建立被引量：8: 2003年; 目的　检测正常人血清类胰蛋白酶含量 ,为肥大细胞相关疾病的诊断提供依据。方法　随机抽取正常人血清标本和 1例过敏性休克死亡患者血清 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测类胰蛋白酶的水平。结果　 2 0 6份正常人血清类胰蛋白酶含量的平均值为 2 .2 4ng/mL。过敏性休克死者血清类胰蛋白酶含量为正常人的 5 0倍。结论　本实验建立了较灵敏的检测类胰蛋白酶的ELISA法。; 陆超王雪雯赵凤娣殷莲华; 关键词：血清类胰蛋白酶酶联免疫吸附试验

可溶性VEGF受体sflt-1载体的构建: 2002年; 目的本文以逆转录病毒作为载体将sflt-1基因结构中前3个免疫球蛋白区域的编码序列插入 ,构建成含有sflt-1的载体 ,为抑制肿瘤的血管新生提供基础。方法与结果1、sflt-1基因制备购买新鲜胎盘 ,用异硫氰酸胍提取总RNA。经RT -PCR制备sflt-1基因 ,引物设计如下 :P1 :5’ -GGAATTCCGCGCTCAC CATGGTCAGC -3’ ;P2 :5’ -TTGGATCCTACCGCTTGCCAGCTACG GTTT-3’。目的基因共1080bp,包含sflt-1前三个免疫球蛋白区域 ,两端分别加上EcoRI和BamHI位点。PCR反应设定 :94℃5min,使模板充分变性 ,94℃1min ,55℃1min ,72℃1min30s ,共30个循环 ,72℃10min。PCR产物有目的片断和600bp的杂带 ,经调整复性温度不能去除 ,将含目的片断的凝胶条带切下并提取DNA。2、sflt—1基因片断的克隆与测序用 pUC -T-vector将目标DNA接入质粒 ,DNA片断A -tailing:2μl10Xbuffer,1UTaq酶 ,0 .5μl10mMdNTP ,纯化的DNA片断 ,共组成201反应体系。72℃15min。纯化DNA连接反应 ,1μlpUC_mT ,1μl2Xbuffer,1150 %PEG8000 ,纯化的DNA产物70g,0 .5μlT4DNA连接酶 ,加适量水组成10μl反应体系 ,20℃温育8h ,22℃温育8h ,连接反应产物转化感受态细菌 ,置于含50g/m1青霉素的LB平板 ,37℃过夜 ,挑取克隆在LB中扩增 ,提取质粒后用EcoRI和BamHI酶切 ,; 曹翔陆超殷莲华金惠铭; 关键词：SFLT-1 逆转录病毒肿瘤血管新生基因克隆

类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)在血管内皮细胞中的表达及对ABC蛋白表达的影响: 一、前言类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)首先是在类固醇激素生成组织中发现的,对类固醇激素合成具有重要限速作用。StAR可介导胆固醇由线粒...; 宁艳霞马永杰江一峰陆超赵凤娣殷莲华陈思锋; 关键词：病理生理学血管内皮细胞; 文献传递

类胰蛋白酶对ECV304细胞促炎作用分子机制的研究: 目的:探讨类胰蛋白酶(tryptase)对ECV304细胞促炎作用的分子机制。方法:采用RT-PCR和Western-blot方法,检测tryptase对ECV304细胞转录因子AP-1、NF-кB、蛋白激酶PKB(Ak...; 张滨钱睿哲陆超赵凤娣殷莲华; 文献传递

基因芯片检测apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化相关基因的表达节律被引量：2: 2007年; 目的利用基因芯片筛选apoE-/-动脉粥样硬化小鼠心脏与主动脉内膜中可能受到生物钟调控的动脉粥样硬化基因,并研究其表达情况。方法采用apoE-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型,以同品系C57BL/6J小鼠作为对照;使用动脉粥样硬化基因芯片检测在ZT0与ZT12处死的两种小鼠心脏与主动脉内膜中113个动脉粥样硬化相关基因的表达情况;应用Real-time PCR检测在心脏与主动脉内膜中表达均发生改变的ACE与MMP3的昼夜表达节律。结果饲以高脂膳食(含0.15%的胆固醇和21%的脂肪)4周的apoE-/-小鼠主动脉粥样斑块形成;apoE-/-动脉粥样硬化小鼠血清胆固醇与低密度脂蛋白明显高于对照组C57BL/6J小鼠,高密度脂蛋白则明显低于对照组;基因芯片结果显示apoE-/-动脉粥样硬化小鼠与C57BL/6J小鼠心脏与主动脉内膜动脉粥样硬化相关基因表达有较大差异,apoE-/-小鼠心脏与主动脉内膜分别有6个及10个基因在两个时间点表达均下调,此外,心脏与主动脉内膜中分别有15及12个原本在C57BL/6J小鼠表达随时间改变的基因在apoE-/-小鼠中不再随时间改变;Real-time PCR结果显示ACE与MMP3在对照组C57BL/6J小鼠心脏中具有昼夜节律,但在apoE-/-动脉粥样硬化小鼠中,这种表达节律消失,且表达水平降低。结论动脉粥样硬化相关基因表达节律发生改变,这可能在动脉粥样硬化的病理过程中发挥了重要作用,对其机制的研究对我们更好地认识这种心血管疾病将具有重要意义。; 徐晨张雪晴华鲁纯陆超金惠铭钱睿哲; 关键词：动脉粥样硬化基因芯片

肥大细胞类胰蛋白酶在动脉粥样硬化发生中的作用机制被引量：1: 2011年; 很多研究报道在动脉粥样硬化斑块周围有大量肥大细胞聚集,其中肥大细胞中类胰蛋白酶含量也增多,且与炎症关系密切,但是其在动脉粥样硬化发生发展中的作用并不明确。本课题组从炎症角度进行研究了类胰蛋白酶在动脉粥样硬化发生中的机制。①纯化了人肺组织β类胰蛋白酶,并且制备了β类胰蛋白酶的两个单克隆抗体,以此为基础建立了国内首个人血清β类胰蛋白酶的ELISA检测方法,该方法为炎症、过敏性休克、哮喘等类胰蛋白酶相关疾病的诊断和法医学鉴定提供了新的方法。; 殷莲华李晓波宁艳霞支秀玲陆超; 关键词：肥大细胞类胰蛋白酶动脉粥样硬化

类胰蛋白酶引起ECV304细胞表达IL-1β,IL-8和SCF变化的机制研究: 目的:研究类胰蛋白酶、血管内皮细胞以及PAR2的激活与炎症之间的相互关系以及阐明与炎症有关的疾病机制。方法:本实验用RT-PCR,Northern blot方法检测类胰蛋白酶刺激后内皮细胞炎症介质IL-1β、IL-8和干...; 陆超李晓波张滨赵凤娣殷莲华; 文献传递

载脂蛋白E基因敲除小鼠钟基因、凋亡相关基因及动脉粥样硬化相关基因表达节律的改变被引量：2: 2007年; 徐晨陆超华鲁纯金惠铭殷莲华陈思锋钱睿哲; 关键词：病理学与病理生理学

类胰蛋白酶与疾病被引量：15: 2002年; Thyptase,a predominant serine protease in mast cells,is released by mast cell degranulation in an enzymatically active form.Recent research suggests that ttyptase plays important roles in mast cell mediated anaphylaxis,angiogenesis,initiation and promotion of neoplasm.This paper reviews tryptase’s struture,molecular biology,biochemistry,processing,activation and its relationship with diseases.; 陆超殷莲华金惠铭; 关键词：分子生物学生物活性过敏性疾病肿瘤类胰蛋白酶疾病

肥大细胞类胰蛋白酶促进人乳腺癌细胞系MDA-MB-435的跨膜侵袭被引量：3: 2008年; 目的研究类胰蛋白酶对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435侵袭力的影响及其机制。方法通过体外细胞侵袭力试验观察不同浓度、不同时间类胰蛋白酶对乳腺癌MDA-MB-435细胞跨膜侵袭力的影响，并利用RT-PCR以及明胶酶谱法研究类胰蛋白酶对基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制物（tissue inhibitor of metalloproteinases-2，TIMP-2）表达水平的调节。结果150～500pmol／L的类胰蛋白酶可以促进MDA-MB-435细胞的跨膜侵袭；还可以促进MMP-2、TIMP-2的mRNA表达（P〈0．01）和MMP-2的蛋白表达（P〈0．05）。结论类胰蛋白酶可以促进人乳腺癌细胞系MDA-MB-435细胞的跨膜侵袭，该作用可能与增加MMP-2的mRNA和蛋白表达、TIMP-2的mRNA表达相关。; 顾漪萍向萌陆超赵凤娣李晓波殷莲华; 关键词：类胰蛋白酶乳腺癌肥大细胞

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陆超

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