邵毅
- 作品数：7 被引量：14H指数：1
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- BTLA对T细胞活化的起始和早期阶段免疫应答的调节
- 目的：观察BTLA在T细胞上的表达并探讨其在各个阶段不同时相对T细胞活化的抑制.方法：分离人外周血单个核细胞,经阴性选择磁珠分离纯化获得T淋巴细胞.流式检测新鲜分离T细胞上BTLA、HVEM、LIGHT、CTLA-4和P...
- 王月颖张世杰邵毅蒋玉平顾宗江
- HVEM在人CD4^+CD25^+调节性T细胞上的表达及功能研究被引量：1
- 2009年
- 研究单纯疱疹病毒侵入介质(herpesvirus entry mediator,HVEM)在人CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)上的表达及对Treg功能的影响。分离人外周血单个核细胞,磁珠纯化获得T细胞及其不同亚群,流式细胞术检测Treg上HVEM的表达。Treg按不同比例分别与去除Treg的CD3^+T细胞、CD4^+CD25^-T细胞或CD8^+T细胞混合培养,加入抗HVEM抗体或同型对照抗体,并用CD3抗体单独或联合CD28抗体刺激T细胞,MTT法检测T细胞增殖。结果显示,Treg上HVEM表达量为90%～95%(n=15)。抗HVEM抗体组与对照组相比,降低了Treg对各类T细胞增殖的抑制作用(P<0.05),证明Treg表达的HVEM介导了其发挥抑制功能。
- 王月颖张世杰李道明陈曦邵毅张学光顾宗江
- 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞HVEM免疫抑制
- BTLA信号对T细胞活化的起始和早期阶段的调节作用被引量：12
- 2010年
- 目的:观察BTLA分子在T细胞上的表达并探讨其在各个阶段不同时相对T细胞活化的抑制。方法:分离人外周血单个核细胞,经阴性选择磁珠分离纯化获得T淋巴细胞。检测T细胞上BTLA、CTLA-4和PD-1的表达;用CD3抗体刺激T细胞活化,比较BTLA、CTLA-4和PD-1在T细胞活化过程中的动态表达。CD3抗体联合CD28抗体活化T细胞,在不同的活化时间,MTT法检测BTLA单抗8H9对T细胞增殖的影响。GM-CSF和IL-4体外诱导单核细胞分化成未成熟DC,CD40抗体刺激DC成熟,流式检测HVEM在DC上的表达。用DC诱导T细胞活化,加入游离8H9或抗HVEM抗体,阻断HVEM和BTLA结合,MTT法检测T细胞增殖。结果:静止T细胞组成性高表达BTLA,不表达CTLA-4和PD-1分子。T细胞活化后,BTLA分子表达有所降低,然后迅速回升至高水平。CTLA-4、PD-1分子在活化后两天几乎不表达,第三天开始表达并逐渐上升。8H9可以抑制CD3和CD28抗体活化的T细胞增殖。CD3和CD28抗体预先活化T细胞24小时或48小时后,再加入8H9仍然具有抑制效应,但不如在T细胞活化之初加入8H9的抑制效应。单核细胞诱导的不成熟DC上高表达HVEM,当DC成熟后,HVEM表达降低。用游离8H9或HVEM抗体阻断DC表面HVEM与T细胞表面BTLA结合,48小时之内均明显增强了DC诱导的T细胞增殖。结论:BTLA信号可以提高T细胞的活化阈值,在T细胞活化的起始和早期阶段发挥重要的负性调控作用。
- 王月颖张世杰邵毅蒋玉平顾宗江
- 关键词：BTLAT细胞活化免疫调节
- 人CD160基因转染细胞株的建立及其生物学特性的研究
- 2011年
- 目的克隆人CD160基因,并构建含有该目的基因的pIRES2-EGFP重组质粒载体,获得稳定表达CD160分子的基因转染细胞。方法从人外周血cDNA文库中扩增CD160的基因,另以VSIG4基因的cDNA为模板扩增跨膜区基因片段,将它们一并装入pIRES2-EGFP质粒载体中,脂质体法共转染L929细胞,用G418筛选出能稳定表达CD160分子的L929细胞株。结果成功克隆出了CD160的基因,构建了pIRES2-EGFP/CD160TMV质粒载体,并建立了稳定表达人CD160分子的L929转基因细胞株,该转基因细胞能结合L929/HVEM转基因细胞,证明其功能性。结论构建了含人CD160基因的重组pIRES2-EGFP质粒载体和建立稳定表达人CD160分子的细胞株,为CD160分子的后续研究奠定基础。
- 邵毅张世杰徐慧顾宗江
- 关键词：PIRES2-EGFP基因转染L929细胞
- 儿童脑动静脉畸形并发症的预测模型构建及经动脉血管内栓塞研究
- 目的:通过收集儿童脑动静脉畸形(cerebral arteriovenous malformations,cAVMs)病例,对患儿一般临床特征、影像学资料进行系统性分析,构建机器学习模型来预测儿童cAVMs伴发出血及癫痫...
- 邵毅
- 关键词：儿童动静脉畸形出血癫痫
- 人CD160转基因细胞株的构建及单克隆抗体的制备
- 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白CD160是一个27 kDa糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族,其基因定位于人染色体1q21.1。CD160最早发现于具有细胞毒活性的细胞表面,有一个IgV样结构域,由于剪接拼接的不同,CD160有四种异...
- 邵毅
- 关键词：单克隆抗体基因转染细胞
- 文献传递
- 鼠抗人B7-H4单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:研制鼠抗人B7-H4分子的单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性。方法:以高表达人B7-H4分子的转基因细胞L929/B7-H4为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴瘤杂交技术,经免疫荧光标记和流式细胞术分析、反复筛选、多次克隆化培养,获得两株可特异分泌鼠抗人B7-H4分子mAb的杂交瘤细胞株。采用快速定性试纸分析法鉴定mAb所属的Ig亚类。用Dot-blot、Western blot鉴定mAb的特异性,竞争结合抑制实验鉴定mAb所识别的抗原结合位点,T细胞增殖抑制阻断实验对mAb的生物学功能进行初步的鉴定。结果:获得两株持续、稳定地分泌抗B7-H4 mAb的杂交瘤细胞,分别命名为1F10和2B2。Dot-blot的结果显示,两株mAb均能特异性识别B7-H4分子。Westernblot检测显示,mAb 2B2可以特异性识别B7-H4分子,而mAb 1F10则不能识别。位点竞争实验表明,两株mAb之间,mAb 1F10与商品化的mAb H74之间识别位点不同,mAb 2B2与商品化mAb识别位点相近。T细胞增殖抑制阻断试验显示,这两株mAb均能一定程度地阻断B7-H4对T细胞的抑制作用。结论:成功地获得两株抗人B7-H4分子的mAb,为进一步研究B7-H4分子的生物学功能提供了有效的工具。
- 徐慧房鹏刘艳萍邵毅顾宗江
- 关键词：B7-H4单克隆抗体杂交瘤
