许家园
- 作品数:6 被引量:15H指数:3
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 兔肠艾美耳球虫SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立
- 为建立一种肠艾美耳球虫定量的检测方法,本研究在肠艾美耳球虫核糖体第二内转录间隔区(ITS2)序列设计一对特异性引物,以10倍倍比稀释的已知卵囊含量的肠艾美耳球虫DNA为模板进行SYBR Green PCR的扩增和标准曲线...
- 许家园程田胡会朋翁亚彪林瑞庆
- 关键词:荧光定量PCR
- 文献传递
- 兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR检测引物和试剂盒
- 本发明涉及检测技术领域,具体公开了兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR检测引物和试剂盒,所述引物为Me‑F和Me‑R,其序列如SEQ ID NO:1~2所示,基于所述引物优化反应体系和反应条件,研制出一种基于荧光染料法的定量检...
- 林瑞庆许家园翁亚彪胡会朋李国良何茜吕梦娜
- 文献传递
- 兔肠艾美耳球虫实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:4
- 2015年
- 为建立一种肠艾美耳球虫定量的检测方法,在肠艾美耳球虫核糖体第二内转录间隔区(ITS2)序列设计一对特异性引物,以10倍倍比稀释的已知卵囊含量的肠艾美耳球虫DNA为模板进行SYBR GreenⅠreal-time PCR的扩增和标准曲线的建立。结果显示,最低可检测1个卵囊含量的样品,与同属的黄艾美耳球虫、中型艾美耳球虫、大型艾美耳球虫均不发生交叉反应,重复性变异系数小于2%。表明建立的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可为快速检测肠艾美耳球虫提供有效的方法。
- 许家园程田胡会朋陈晓珍翁亚彪林瑞庆
- 关键词:SYBR实时荧光定量PCR
- 兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR检测引物和试剂盒
- 本发明涉及检测技术领域,具体公开了兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR检测引物和试剂盒,所述引物为Me-F和Me-R,其序列如SEQ?ID?NO:1~2所示,基于所述引物优化反应体系和反应条件,研制出一种基于荧光染料法的定量检...
- 林瑞庆许家园翁亚彪胡会朋李国良何茜吕梦娜
- 1株肠炎沙门氏菌噬菌体的污水分离及生物学特性研究被引量:6
- 2014年
- 以1株肠炎沙门氏菌作为宿主菌,应用双层平板噬菌斑试验从污水中分离噬菌体并对其基本生物学特性进行研究。结果显示成功地从污水中分离出1株肠炎沙门氏菌噬菌体,噬菌斑呈圆形透明状,直径2mm左右(培养12h),边界清楚;电镜观察结果显示该噬菌体有1个正多面体立体对称的头部,头部直径约54nm,无囊膜,有1长尾,无收缩尾鞘,尾长约110nm;当感染复数(MOI)为2时,子代噬菌体滴度较高;按一步生长试验结果绘制出一步生长曲线,结果显示感染宿主菌的潜伏期约为10min,裂解期约100min,平均裂解量约为61。该试验结果为动物沙门氏菌病的进一步噬菌体生物防制研究提供了材料。
- 邹尚书许家园翁亚彪林瑞庆
- 关键词:噬菌体生物学特性
- 3种兔艾美耳球虫rDNA ITS序列测定与系统进化分析被引量:6
- 2014年
- 为研究内转间隔区(ITS)序列能否作为鉴别不同种兔球虫的分子标记,本试验以兔肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫和大型艾美耳球虫为研究对象,对其核糖体DNA(rDNA)ITS全序列进行PCR扩增,扩增产物纯化后连接至pGEM-T Easy载体上,重组质粒通过菌液PCR鉴定后测序,将测序结果与GenBank中公布的兔球虫ITS序列进行同源性比对,用Mega 5.0绘制系统进化树。结果显示,兔肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫和大型艾美耳球虫ITS序列长度分别为1065、1009和1047bp,与GenBank公布的同种球虫相应序列同源性分别为99.2%、99.0%和94.5%,与其他种球虫序列的同源性为55.3%~82.1%。系统进化树显示兔球虫ITS序列形成单系群,该单系群又根据卵囊外残体的有无分为2个亚群。研究结果表明ITS序列种内同源性高于种间同源性,可作为3种兔球虫种间鉴定的分子标记。
- 许家园廖贵城胡会朋陈晓珍刘丽丹吴松明温远辉刘园翁亚彪林瑞庆
- 关键词:RDNAITS系统进化分析