蒋骄云
- 作品数：10 被引量：30H指数：4
- 供职机构：广西师范大学更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学更多>>
- 黄鳝性腺抑制差减文库的构建和分析被引量：5
- 2011年
- 应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝（Monopterus albus）IV期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库。正向差减杂交以间期性腺为试验方,IV期卵巢为驱动方;反向差减杂交以IV期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方。将获得的差减cDNA片段连接质粒载体,然后转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含461、678个重组子。经PCR扩增鉴定插入片段范围为200-2 000 bp。随机选取正、反文库共100个阳性克隆测序分析,得到90个有效基因片段,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对。进一步从文库中选取2个基因用于半定量RT-PCR,对文库质量进行验证。结果表明,所建文库能够达到富集这两期性腺差异表达基因的目的。黄鳝性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定黄鳝性腺发育和性逆转的相关基因奠定了基础。
- 曲宪成尚晓莉程翠曲学伟张勇张开岳蒋骄云
- 关键词：黄鳝性腺抑制性差减杂交差减CDNA文库
- 黄鳝性逆转相关基因的克隆和表达被引量：6
- 2012年
- 运用cDNA末端快速扩增(Rapid-Amplification of cDNA Ends,RACE)技术和半定量RT-PCR技术,克隆了黄鳝(Monopterus albus)性腺差异表达基因(F64)的cDNA全长序列,分析了该基因于各期性腺组织的表达情况。结果表明,F64基因cDNA全长1 721 bp,含有142 bp的5’-UTR、268 bp的3’-UTR、1 311 bp的开放阅读框(ORF),共编码436个氨基酸;在线SignalP分析表明,F64亚基肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白;同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因;F64在卵巢发育早期不表达,从排卵的Ⅴ期卵巢开始表达,随着卵巢的败育和精巢的发育,表达量明显升高。
- 蒋骄云冯龙许世杰李园园曲宪成
- 关键词：黄鳝性腺差异表达基因RT-PCRRACE
- 一种用于生物材料染色的染色盒
- 本申请提供了一种用于生物材料染色的染色盒，包括盒体和设置在所述盒体内的隔板，所述隔板将盒体内部空间隔成若干个隔间；所述隔间内设置有Z型载胶台。本申请提供的用于生物材料染色的染色盒由于设置有Z型载胶台，在取胶时直接拿取Z型...
- 蒋骄云田文斐
- 文献传递
- 不同开口饵料对河川沙塘鳢仔鱼生长和鱼体成分的影响被引量：10
- 2014年
- 为研究不同开口饵料对河川沙塘鳢的仔鱼生长和鱼体成分的影响,选择4种开口饵料,分别为经小球藻强化培育的轮虫、蛋黄、轮虫+小型枝角类和鱼苗专用开口配合饲料。通过15 d的投喂实验,选出最适口的开口饵料。实验表明,经过15 d的投喂以小球藻强化培育的轮虫作为开口饵料最为适合,其平均体长为8.759 mm,平均体重为0.050 3 g,成活率为94%,蛋白含量21.65%,脂肪含量1.57%。其次为轮虫+小型枝角类组,蛋黄和鱼苗配合饲料不适合作为开口饵料。
- 李园园徐育强蒋骄云许世杰王倩曲宪成
- 关键词：河川沙塘鳢开口饵料鱼体成分
- 黄鳝性逆转相关基因F4的克隆和表达分析被引量：2
- 2013年
- 本文运用cDNA末端快速扩增(Rapid-amplificationofcDNAends,RACE)技术、半定量RT-PCR技术和原位杂交技术,克隆黄鳝Monopterusalbus性腺差异表达基因(F4)的cDNA全长序列,并分析该基因于各期性腺组织的表达情况。结果显示:F4基因cDNA全长2466bp,含有142bp的5′-UTR、596bp的3′-UTR、1728bp的开放阅读框(ORF),共编码575个氨基酸;在线SignalP分析表明,F4亚基肽链不存在信号肽,为非经典分泌蛋白;同源性分析结果显示该基因无同源性序列,视为新报道的基因;F4在卵巢发育早期不表达,从排卵的Ⅳ期卵巢开始表达,随着卵巢的败育和精巢的发育,表达量明显升高。性逆转过程中差异表达基因的克隆和鉴定,为进一步探究黄鳝性别调控机制奠定了基础。
- 蒋骄云冯龙曲宪成田文斐
- 关键词：黄鳝性腺差异表达基因原位杂交
- 千岛湖细鳞鲴种群线粒体COⅠ基因变异及遗传分化研究被引量：8
- 2011年
- 首先利用鱼类线粒体COⅠ基因两端的保守序列设计简并引物,扩增测序获得了细鳞鲴COⅠ基因1 551 bp序列全长。然后利用COⅠ基因部分序列标记对千岛湖汾口(FK)、姜家镇(JJZ)、富文(FW)以及临岐(LQ)4个细鳞鲴群体84个样本的遗传多样性和遗传结构进行了分析,结果表明:在4个群体中共检测到4种不同单倍型。四群体的单倍型多样性(h)分别为0.500 0、0、0.142 5和0.128 7,核苷酸多样性(π)分别为0.001 9、0、0.000 2和0.000 2,其中FK群体的单倍型多样性(h)和核苷酸多样性(π)水平最高,另外3个群体单倍型多样性(h)和核苷酸多样性(π)水平都较低。AMOVA分析显示,群体间遗传变异占总变异的23.56%,群体内的遗传变异占总变异的76.44%,表明群体内变异是总变异的主要来源。研究结果表明千岛湖4个群体间没有明显的遗传分化。
- 曲宪成张勇刘其根张开岳蒋骄云冯龙
- 关键词：细鳞鲴
- 地高辛标记的黄鳝F64基因cRNA探针的制备及其应用被引量：2
- 2016年
- 以黄鳝F64基因序列为模板设计引物,扩增用于c RNA探针合成的模板,构建F64/p GM-T重组质粒并线性化,利用RNA聚合酶体外转录合成正、反义c RNA探针,并对其进行地高辛标记,利用原位杂交方法检测F64基因在黄鳝性腺发育过程中的表达变化情况。结果显示,正义探针未检测到阳性信号,反义探针检测到该基因在黄鳝性腺发育早期不表达,于V期性腺开始表达。研究结果表明,体外转录法可以有效合成c RNA探针,制备的c RNA探针可以准确检测F64基因的时空表达。
- 蒋骄云田文斐冯龙曲宪成
- 关键词：性腺发育RNA探针
- LR型微囊藻毒素对鲢鱼PEPCK基因表达的影响
- 2014年
- 在前期经LR型微囊藻毒素(MC-LR)处理后建立鲢鱼肝脏组织抑制差减杂交文库的基础上,利用RACE方法克隆了经MC-LR处理后差异表达明显的鲢鱼磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK基因cDNA全长,并对其进行了序列分析,然后通过半定量分析了经MC-LR投与1、5、10 h鲢鱼肝脏组织PEPCK表达水平。结果显示:鲢鱼PEPCK基因cDNA全长2 605 bp,包括101 bp的5'端非翻译区、564 bp的3'端非翻译区、1 911 bp的开放阅读框,编码636个氨基酸。将鲢鱼PEPCK基因cDNA核酸及氨基酸序列与GenBank中已发表的其他几种鱼类的相应序列进行比对,表明鲢鱼PEPCK与翘嘴红鲌的同源性最高,其核酸及氨基酸序列的相似性分别达到97%和99%;其次为斑马鱼,同源性均达到90%以上;与星斑川鲽的同源性最差,但核酸及氨基酸序列的相似性也分别达到77%和84%,说明鱼类PEPCK在长期的进化过程中具有很高的保守性。鲢鱼PEPCK具有与草酰乙酯结合的特有结构域以及与GTP三磷酸链结合的激酶1和激酶2基序。另外,鲢鱼投予MC-LR后,肝脏组织PEPCK经过1、5、10 h的表达量均有显著升高,说明鲢鱼投予MC-LR 1 h内该基因即被诱导表达,且在10 h内皆维持较高的表达水平。这与微囊藻毒素作用有关,推测与微囊藻毒素解毒过程相关。
- 徐育强张开岳张勇蒋骄云冯龙许世杰曲宪成
- 关键词：磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶抑制差减杂交快速扩增CDNA末端
- 团头鲂促性腺激素GtHⅡβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建
- 2010年
- 利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列长度为1354bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40～10bp。进一步利用PCR方法扩增得到了811bp(-771～+40bp)、601bp(-561～+40bp)、386bp(-346～+40bp)、239bp(-199～+40bp)和98bp(-58～+40bp)的5个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础依据。
- 曲宪成崔严慧周正峰曲学伟金一春胡萍华尚晓莉程翠张开岳张勇蒋骄云
- 关键词：团头鲂启动子
- 虚拟仿真在实验教学中的应用分析——以分子生物学为例
- 2023年
- 虚拟仿真技术近年来迅速发展,本文以分子生物学为例分析了传统实验课堂存在的一些问题以及虚拟仿真技术在实验教学中展现的优势,探讨了其在应用过程中出现的不足与阻碍。通过将虚拟与现实结合的混合教学方法,学生可以自主学习、探究性学习和进行创新性实践。这一新的现代化信息教育改革模式不仅可以极大地提升教师队伍教学能力, 也可以极大地促进我国高校的教学质量、从而为培养出能够满足社会发展需要的应用型人才奠定良好的基础。
- 田文斐蒋骄云
- 关键词：实验教学教学模式
