蒋欣 作品数:22 被引量:54 H指数:5 供职机构: 北京安波特基因工程技术有限公司 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
抗人卵巢癌抗人CD3双特异性抗体 本发明提供了一种抗卵巢癌的双特异性抗体,它是由抗卵巢癌的抗体,或其Fab片段、单域抗体或单链抗体;和抗人CD3的抗体,或其Fab片段、单域抗体或单链抗体连接而成的。本发明还提供了编码这种抗体的DNA序列,含有这种DNA序... 黄华樑 蒋欣 方敏 冯捷 周萍 余小淙 林晴文献传递 双特异抗体与肿瘤的免疫治疗 被引量:1 2001年 蒋欣 俞小淙 黄华关键词:肿瘤 免疫治疗 双特异抗体 链间连接肽对单链双特异性抗体生物学活性的影响 被引量:3 2003年 单链双特异性抗体(ScBsAb)是具有良好临床应用前景的基因工程抗体,但不同的链间连接肽(interlinker)对其生物学活性的影响尚有待深入研究. 设计并合成3种不同的链间连接肽序列,分别命名为Fc,HSA和205C′,并构建成单链双特异性抗体通用表达载体,以抗人CD3改形单链抗体(ScFv)和抗人卵巢癌单链抗体为基础,构建成单链双特异性抗体.SDS-PAGE及 Western blot结果表明,3种不同的链间连接肽对抗体的表达量无明显影响.在此基础上,进行ELISA及血液药代动力学测定,发现不同链间连接肽的单链双特异性抗体与相应抗原的结合活性及其在小鼠体内的清除相T_(1/2)存在一定差异,链间连接肽HSA可以显著延长抗体在体内的滞留时间.上述研究结果提示,链间连接肽序列将会影响单链双特异性抗体的抗原结合活性及其在体内的稳定性等重要的生物学特性.因此,筛选理想的链间连接肽序列对于构建单链双特异性抗体具有重要意义. 合适的链间连接肽可以赋予单链双特异性抗体更适于临床应用需求的生物学活性. 方敏 蒋欣 杨志 俞小淙 尹长城 李骅 赵瑞 张众 林晴 黄华樑关键词:单链双特异性抗体 生物学活性 基因工程 肿瘤 免疫 抗日本血吸虫膜蛋白单克隆抗体NP11-4轻链可变区基因的分离克隆及测序研究 被引量:1 2000年 本文报告了从抗日本血吸虫单抗NP11- 4杂交瘤细胞株的基因组DNA中 ,用PCR技术扩增出抗体轻链可变区基因 ,并克隆至pUC19质粒中进行测序分析。研究表明 :该基因长 336bp ,编码 112个氨基酸 ,经结构分析及与抗体库中一般序列的比较 ,证实该序列为轻链可变区基因 ,属κ轻链SubgroupII亚类 ,由种系基因中的V与Jκ 2基因重排而成。 俞小淙 蒋欣 尹长城 张众 林晴 管晓虹 黄华梁关键词:轻链可变区基因 日本血吸虫 单克隆抗体 利用PE构建免疫毒素 被引量:3 1997年 利用PE构建免疫毒素蒋欣黄华梁(中国科学院遗传研究所,北京100101)PEandPE-derivedRecombinantImmunotoxinsJiangXinHuangHualiang(InstituteofGenetics,ChineseAc... 蒋欣 黄华梁关键词:免疫毒素 抗人卵巢癌单域噬菌体抗体的表达 被引量:4 1998年 目的:制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183B2单域(重链可变区,VH)抗体,以用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗。方法:将已分离的VH基因克隆入噬菌粒表达载体pFUW80中,将重组子转化琥珀突变抑制菌株XL1BLue,经辅助噬菌体M13K07援救后包装成噬菌体颗粒,表达产物通过ELISA测定活性。结果:VH基因克隆入噬菌粒pFUW80,双酶切鉴定见预期大小片段,表明克隆成功。表达产物经ELISA测定,待测值高出阴性对照2.5倍。结论:该抗人卵巢癌小分子单域抗体具有与相应卵巢癌抗原发生特异结合的能力,有望用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗。 周萍 冯捷 黄华梁 钱和年 蒋欣 蒋欣 付天云关键词:卵巢肿瘤 药物疗法 噬菌体 单克隆抗体 植物抗体基因工程研究进展 被引量:7 1998年 抗体基因工程与植物生物技术相结合 ,产生了植物抗体 .研究表明 ,工程抗体中不论是全抗体或小分子抗体 ,在植物中表达后都具有与抗原结合的活性 ,即具功能性 ,从而使植物抗体的研究备受人们的关注 .目前主要在下述 3个方面开展研究 :( 1 )医用治疗性抗体 .人们期望利用农业大田规模的方式生产抗体 ,以降低成本 .另外 ,利用植物可多次杂交的特点 ,装配双 (或多 )功能的新的大分子抗体 ,创造新的抗体药物 ;( 2 )植物生理 .通过表达植物激素及微量活性物质的工程抗体 ,封闭原有活性成分 ,研究植物的生长和发育 ;( 3)植物抗病 .将由植物病毒制备出的工程抗体基因转入植物 ,以抵御该病毒的入侵 ,达到防病、治病的目的 . 曾君祉 付钰 俞小淙 蒋欣 黄华梁关键词:抗体基因 植物抗性 转基因植物 基因工程 抗膀胱癌单链抗体基因在烟草中的表达 被引量:3 1999年 以抗膀胱癌单链抗体(scFv)基因为目的基因,构建植物表达载体,转化烟草,研究医用治疗性工程抗体基因在植物中的表达.结果表明,经Southern杂交鉴定出的转基因植株,叶片提取物的蛋白电泳有特异带出现,其分子量约为27 ku,同预期的单链抗体分子量一致,表达量最高的一株,抗体含量占可溶性蛋白的1.4%.竞争性抑制ELISA测定结果显示,该抗体有抗原结合活性. 付钰 曾君祉 黄浩旻 林晴 蒋欣 李志华 周志勇 黄华梁关键词:抗膀胱癌 单链抗体基因 转基因烟草 基因表达 抗人膀胱癌单链抗体的构建及表达的研究 被引量:1 2001年 目的 为膀胱癌的导向诊断和治疗提供免疫原性更低的单链抗体。 方法 从 1株分泌鼠抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株BDI 1中分离出总RNA ,逆转录cDNA ,并以此为模板用聚合酶链反应技术扩增VH 和VL 基因 ,分别克隆入pUC19质粒 ,进行序列分析。将VH 和VL 插入表达载体pFUW80中 ,并转化大肠埃希菌JM83,诱导表达出抗人膀胱癌单链抗体。用免疫竞争抑制酶联免疫吸附测定法鉴定免疫活性。用固相化的金属离子亲和层析柱纯化抗人膀胱癌单链抗体。 结果VH 全长 36 6bp ,属于小鼠重链可变区Ⅱ亚类 ;VL 全长 32 4bp ,属于小鼠K轻链IV亚类。表达产物可抑制原单抗BDI 1与人膀胱癌细胞结合的活性。纯化的单链抗体是分子量约 2 90 0 0的单一蛋白条带。 结论 抗人膀胱癌单链抗体被成功地构建并表达。 张民 俞莉章 黄华梁 萧飒 蒋欣 顾方六关键词:膀胱肿瘤 基因表达调控 聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 单链抗体 抗人卵巢癌单链抗体基因的构建 被引量:4 1998年 目的构建抗人卵巢癌单抗COC183-B2单链抗体(scFv)基因。方法将通过PCR方法体外扩增并经测序验证的重链、轻链可变区(VH、VL)基因先后重组入原核表达质粒pTHA90相应的位点上,中间通过一连接肽(Gly4Ser)3基因连接构建成单链抗体基因(scFv),连接产物转化相应受体菌TOP10,提取质粒,酶切鉴定重组克隆。表达产物经ELISA方法测定活性。结果重组克隆经酶切鉴定可见预期大小的片段,表明重组成功。表达产物经ELISA检测证实具有与卵巢癌抗原结合的能力。结论本研究成功地构建了scFv基因。 周萍 冯捷 钱和年 蒋欣 蒋欣 叶雪 付天云 黄华梁关键词:卵巢肿瘤 单链抗体 基因表达