范鑫
- 作品数:6 被引量:55H指数:4
- 供职机构:内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的研究
- 奶牛乳房炎(cow mastitis)主要是由病原微生物感染而引起奶牛乳房组织及乳头发炎的一种疾病。引起奶牛乳房炎的病原按种类可分为细菌、病毒、支原体和真菌4大类,其中金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原;而且奶牛乳...
- 范鑫
- 关键词:奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗
- 山羊传染性胸膜肺炎病原的分离鉴定被引量:11
- 2011年
- 从内蒙古地区山羊病料中分离出疑似山羊传染性胸膜肺炎的病原,经染色镜检、生化鉴定、血清学等方法初步鉴定为山羊支原体山羊肺炎亚种。参照已知山羊支原体ADI基因设计的引物进行PCR扩增,通过电泳分析得到与文献报道相一致的大小为316 bp的条带,最终确定为山羊支原体山羊肺炎亚种。
- 刘波郝永清张爱荣徐春光范鑫
- 关键词:山羊支原体山羊肺炎亚种
- 牛GM-CSF与金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB共表达质粒的构建与原核表达被引量:1
- 2011年
- 采用PCR方法对牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和金黄色葡萄球菌FnBPB的D区进行特异性的扩增,并通过重叠延伸PCR扩增GM-CSF-FnBPB串联基因,构建了克隆质粒pMD19-GM-CSF-FnBPB。利用表达载体pET-32a(+)对该融合基因片段进行原核表达,SDS-PAGE分析表明,在1mmol/L IPTG诱导浓度下,在39ku处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western blot分析表明,该蛋白具有反应原性,进而证明该融合基因成功在原核细胞中表达。
- 范鑫郝永清张爱荣陈晓杰
- 关键词:金黄色葡萄球菌粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子原核表达
- 金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB-ClFA共表达质粒的构建与原核表达被引量:8
- 2011年
- 采用PCR方法对编码金黄色葡萄球菌纤黏蛋白B的D区和纤黏蛋白原凝集素A的A区基因片段进行了特异性扩增,并通过重叠延伸PCR扩增了FnBPB-ClFA串联基因,构建了克隆质粒pMD19-FnB-PB-ClFA。将该基因片段定向插入到原核表达载体pET-32a(+)中,构建了表达质粒pET-FnBPB-ClFA,并将其转入宿主菌BL21(DE3)。SDS-PAGE分析表明,在1mmol/L IPTG诱导下,在51ku处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带。Western-blot分析表明,所表达的蛋白与目的蛋白一致。上述结果表明,该融合基因在原核细胞中成功表达。
- 范鑫郝永清张爱荣史冬艳陈晓杰
- 关键词:金黄色葡萄球菌重叠延伸PCR原核表达
- 奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎研究进展被引量:26
- 2010年
- 奶牛乳房炎是对世界奶牛业造成经济损失最大的疾病之一,它不仅直接导致乳品工业的经济损失,而且由于患乳房炎的奶牛其乳汁中经常含有大量的毒素、病原微生物以及治疗后残留的抗生素,使得该病日益引起公众的关注。金黄色葡萄球菌是奶牛乳房炎的主要病原,由于其极易产生耐药性,使得治疗变得相当困难,因此使用预防或治疗性疫苗防治乳房炎就成为首选。金黄色葡萄球菌对上皮细胞的黏附和侵袭力被认为是奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎的主要致病机制,金黄色葡萄球菌的致病力涉及到许多不同的毒力因子,如黏附素、荚膜、各种毒素和酶类等。研究表明,以这些毒力因子为靶位进行疫苗研究,可能是预防奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎的有效途径。
- 史冬艳郝永清张爱荣伍玉梅范鑫
- 关键词:金黄色葡萄球菌乳房炎发病机制疫苗
- 金黄色葡萄球菌凝聚因子A区基因的克隆表达及表达产物的免疫学特性被引量:11
- 2009年
- 采用PCR技术对引起乳牛乳腺炎的金黄色葡萄球菌凝聚因子(ClfA)A区基因进行了扩增和克隆测序,并对测序结果用DNAStar软件进行了抗原表位分析,成功构建了原核表达质粒pET-32a-ClfA A。将其转入宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,证实目的蛋白以可溶形式存在。用His.Bind柱对其纯化后获得了纯度较高的蛋白。纯化后的蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫家兔得到了较高效价的抗血清,通过ELISA、试管凝集试验、吞噬调理试验、抗体抗金黄色葡萄球菌黏附能力检测等对表达产物及制备的超免疫血清进行了检测。试验证明目的蛋白具有黏附活性,自制的超免疫血清具有抗金黄色葡萄球菌黏附至牛纤维蛋白原的作用以及吞噬调理作用,所表达的蛋白为ClfA A蛋白。
- 姜晓娟郝永清张爱荣范鑫陈晓杰
- 关键词:乳牛乳腺炎金黄色葡萄球菌