苏秀芬
- 作品数:18 被引量:17H指数:3
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 丙型肝炎病毒NS5A基因真核表达载体的构建被引量:1
- 2007年
- 目的:构建HCV NS5A/pCI-neo真核表达载体,转染Huh-7细胞系,为体外高效表达NS5A蛋白奠定基础。方法:用PCR方法从带有丙型肝炎病毒NS5A基因的pC DNA 3.1(+)/HCV NS345质粒中扩增出HCV NS5A基因,然后TA克隆于pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109。阳性克隆经测序鉴定,再经双酶切消化后插入真核表达载体pCI-neo上,经酶切鉴定与测序证实。结果:用PCR方法扩增出HCV NS5A基因全序列,因其cDNA的G+C含量高直接测序未成功,后经TA克隆,筛选得到的阳性克隆经测序鉴定,与设计的HCV NS5A基因序列完全一致。经酶切连接并成功插入pCI-neo上。结论:成功构建了高效表达丙型肝炎病毒NS5A基因的pCI-neo真核表达载体。
- 苏秀芬牛俊奇姜艳芳胡玉琳
- 关键词:真核表达载体肝炎病毒丙型
- 抑制丙型肝炎病毒NS5A基因表达的shRNA系统的构建及意义被引量:1
- 2009年
- 目的:构建抑制丙型肝炎病毒NS5A基因(HCV NS5A)表达的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体系统,观察其对HCV NS5A蛋白表达的抑制作用。方法:根据HCV NS5A基因已知序列,设计3段19个碱基的HCV NS5A特异性靶序列,合成两对63 bp并含有编码shRNA序列的寡核苷酸,双链退火后,克隆到经过BamHⅠ和HindⅢ双酶切后线性的pSilencerTM3.1-H1neo载体的H1启动子下游,重组构建RNA干扰(RNAi)质粒,进行电泳,将3个不同的RNAi质粒和阴性对照质粒分别与HCV NS5A真核表达质粒共转染正常肝细胞HL-7702细胞系,用Western blotting印迹法鉴定NS5A蛋白表达。结果:对重新构建的pSilencerTM3.1-H1neoHCV NS5A-R1、R2、R3质粒进行测序,与设计的序列完全相同;3个质粒电泳均在4 348 bp处出现特异性条带;Western blotting印迹法测得R1、R2和R3的NS5A蛋白未见明显条带,阴性对照质粒NS5A蛋白在相对分子质量5 600处出现条带。结论:设计合成的3个不同位点的63个碱基均成功插入到预计位点,并且序列完全正确,对HCV NS5A基因表达有特异性抑制作用。
- 苏秀芬姜艳芳王峰牛俊奇唐彤宇
- 关键词:短发夹RNARNA干扰
- 降脂酮对CCl_4诱导的脂肪肝的保护作用被引量:2
- 2008年
- 目的从含有黄芩、枸杞子、山楂等6味中药的复方制剂中提取有效部位:降脂酮,观察降脂酮对四氯化碳(CCl4)诱导的脂肪肝的影响及其作用机制。方法建立CCl4脂肪肝模型,分别用低剂量、中剂量、高剂量降脂酮进行治疗,观察各组大鼠肝组织中超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(PyH)、游离脂肪酸(FFA)的活性或含量。结果与正常对照组比较,CCl4诱导的脂肪肝模型对照组大鼠SOD活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01)、肝组织匀浆游离脂肪酸、羟脯氨酸明显升高(P<0.01);与CCl4模型对照组比较,低、中、高剂量降脂酮给药组SOD活性明显升高(P<0.05);中、高剂量降脂酮给药组MDA含量明显降低(P<0.05);中、高剂量降脂酮给药组肝组织匀浆FFA有明显差异(P<0.05),高剂量降脂酮给药组Hyp有明显差异(P<0.05),余各剂量组统计学上差异不明显(P>0.05)。结论降脂酮能够减轻CCl4诱导的肝脏脂肪病变程度。其机制可能与降脂酮所具有的抗氧化的作用有关。
- 白贞子盛传伦苏秀芬刘扬牛俊奇
- 关键词:肝损伤抗氧化
- 竞争性逆转录聚合酶链反应定量检测对HCV RNA
- 1997年
- 为了解感染丙型肝炎病素(HCV)后的(HCVRNA)含量与丙型肝炎病情轻重,预后,治疗反应的关系,采用竞争性逆转录聚合酶链反应(CRT-PCR)的方法,对9例感染了HCV患者的血清进行了HCVRNA的定量检测。结果:6.6×103拷贝1毫升占88.9%,6.6×104拷贝/毫升占11.1%。结果提示:急慢性丙型肝炎及无症状HCV感染者体内均含有较高的病毒滴度,且滴度低预后好,抗病毒疗效好。
- 苏秀芬牛俊奇胡玉琳张清泉许昶
- 关键词:丙型肝炎病毒RNAPCR
- 小干涉RNA对丙型肝炎病毒复制和表达的抑制作用
- 苏秀芬
- 关键词:RNA干涉丙型肝炎病毒基因治疗
- 文献传递
- 肝炎病人生活质量调查分析(附142份健康状况调查)被引量:5
- 2004年
- 目的 :调查病毒性肝炎对病人的工作、学习、生活、情绪、社交等方面的影响。方法 :采用“简明健康状况调查表 (中文版 )SF - 36”对肝炎病人及部分健康人进行调查。调查分为两组 ,A组为肝炎病人与健康对照比较组 ,肝炎病人和健康人各 32人。B组为肝炎病人保肝治疗前后比较组 ,肝炎病人 39人 ,治疗前后各 39份答卷。结果 :肝炎病人 10 0 %对上述调查都有一定或较大影响 ,平均每个病人对表中 36项调查有影响的占83 33%。而 32例健康对照中 ,只有 6个人平均每个人对表中 36项调查有影响的只占 16 6 7%。结论 :两组比较有显著性差异 (P <0 0 1)。B组病人 ,保肝治疗前 ,平均每个病人对表中 36项调查有影响的占 84 6 1% ,而保肝治疗后 ,此比例为 5 8 97% ,两组比较有显著性差异 (P <0 0 5 )。同时还报告了肝炎不同的临床类型和病原学类型其调查结果的不同。肝炎病人的生活质量比健康人明显下降。而经过保肝治疗后病人的生活质量较治疗前提高。不同类型的肝炎病人其调查结果有所不同。
- 胡玉琳牛俊奇苏秀芬
- 关键词:病毒性肝炎生活质量调查表
- 长春地区急性氟硅酸钠中毒12例分析被引量:3
- 2008年
- 马东凯刘玉环苏秀芬王旭李玉香牛俊奇柴俊杰
- 关键词:急性氟硅酸钠中毒
- 靶向CTGF的锤头核酶抑制人肝星状细胞介导肝纤维化的体外研究
- 高润平杨秀云王淑华鲍万国杨永广苏秀芬金清龙华瑞温小玉冯相伟
- 该研究来自吉林省科技发展计划项目,合同编号:200505211。我国是病毒性肝炎高发区,仅乙型肝炎病毒携带就达1.2亿,其中有3000万以上的慢性乙型肝炎患者。这些患者如得不到有效治疗,可发生肝纤维化,进而肝硬化、甚至肝...
- 关键词:
- 关键词:CTGF肝纤维化乙型肝炎病毒细胞因子
- 基因工程口服甲肝疫苗的研制
- 牛俊奇胡玉林苏秀芬潘煜华瑞吕美德许昶
- 该课题用限制性内切酶消化含有甲肝病毒基因组cDNA的质粒PHAV5,删除其5,-非编码区,将其余的全部编码区cDNA插入到高效表达质粒PBV221,用氯化钙转化法转化大肠杆菌DH5α。用核酸探针和限制性内切酶酶谱分析方法...
- 关键词:
- 关键词:甲型肝炎病毒
- 丙型肝炎病毒NS5a基因真核表达载体的构建
- 目的:构建HCV NS5a-pCI-neo真核表达载体。方法:用PCR方法从带有丙型肝炎病毒NS5a基因的pCDNA 3.1(+)-HCV NS345质粒中扩增出HCV NS5a基因,然后TA克隆于pGEM-T载体中,转...
- 苏秀芬牛俊奇姜艳芳胡玉琳
- 文献传递