罗志勇
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：厦门大学更多>>
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- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- 铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA、KaiB和KaiC间相互作用的研究
- 生物钟蛋白之间的相互作用可能是蓝藻生物钟产生计时信号的关键所在。因此为了研究铜绿微囊藻生物钟的计时机制,我们分别用酵母双杂交系统和 pull-down 及 far-western 等方法对 KaiA、KaiB 和 Kai...
- 罗志勇徐虹章军
- 文献传递
- 铜绿微囊藻生物钟蛋白的表达纯化与抗体制备被引量：1
- 2006年
- 为了获得融合表达的铜绿微囊藻（Microcystic aeruginosa）生物钟蛋白KaiA、KaiB、KaiC并制备其相应的多克隆抗体,将kaiA、kaiB、kaiC基因分别克隆到原核表达质粒pET-His中.重组质粒pET-His-KaiA,pET-His-KaiB和pET-His-KaiC经酶切和测序鉴定后,分别转化E.coli BL21（DE3）进行融合表达.经SDS-PAGE分析可知,融合表达的KaiA、KaiB和KaiC蛋白表达量可分别达到菌体总蛋白的25%、40%和20%.经亲和层析后融合蛋白KaiA和KaiB的纯度分别达95%和92%,而KaiC经胶回收纯化后纯度也可达93%.将纯化后的三种Kai蛋白作为抗原分别免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA检测抗体滴度表明,制备的抗KaiA、抗KaiB和抗KaiC的多克隆抗体效价高,分别可达到1：50000、1：60000和1：100000.Western blotting结果表明：获得的多克隆抗体具有较高的效价,抗体能识别相应的Kai蛋白,具有较高的特异性,能用于铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA、KaiB和KaiC的表达节律检测.
- 罗志勇徐虹章军杨秀娜王立红
- 关键词：铜绿微囊藻生物钟蛋白酶联免疫吸附免疫印迹
- 铜绿微囊藻生物钟蛋白的节律检测及其相互作用蛋白的筛选
- 生物钟是广泛存在于蓝藻、植物和动物细胞中的内源计时系统，它对各种代谢和行为的实时调控使机体能更好地适应环境日变化(如光照、温度和湿度等)。生物钟一般具有三个主要特点，即在稳恒条件下生物钟仍然能以近似24h的周期自由运行;...
- 罗志勇
- 关键词：铜绿微囊藻生物钟蛋白相互作用蛋白筛选
- 文献传递
