[目的]运用多种表面增强激光解吸-离子化飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片及多元分析方法寻找由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染引起的肝纤维化病程相关的血浆生物标志物。[方法]选用多种SELDI化学表面芯片,比较分析肝纤维化病人和正常血浆样本,筛选和确定3种最佳芯片类型。用这3种芯片分析无肝纤维化、轻度肝纤维化、重度肝纤维化和肝硬化4组共110例患者的血浆样本。运用主成分分析(PCA)、偏最小二乘回归(PLSR)、软独立建模分类法(SIMCA)等数据分析技术寻找差异蛋白。用聚类分析法研究差异蛋白的表达相似性。[结果]3种最适芯片类型分别是弱阳离子交换芯片(WCX2)、强阴离子交换芯片(SAX2)、固定化镍金属螯合亲和层析芯片(IMAC-Ni)。这3种芯片吸附的蛋白质种类互不相同,所发现的差异蛋白质峰也不同。经t检验分析,3种芯片共发现了20个差异蛋白峰。运用PCA、PLSR、SIMCA等数据分析技术,分别发现了105、98、62个差异峰,并对差异峰的重要性的可信度进行衡量。运用聚类分析技术,将差异蛋白的表达模式分组。[结论]联用多种SELDI芯片检测,结合多元分析方法,使SELDI技术成为筛选疾病相关的生物学标志物的有力工具。
