田高飞
- 作品数:5 被引量:1H指数:1
- 供职机构:南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 荷瘤小鼠肝脏免疫耐受的机制探讨
- 研究背景:肿瘤和炎症的关系一直是世界范围内科学家非常感兴趣的问题.越来越多的研究表明炎症是肿瘤生长过程中的重要因素.那么肿瘤的生长对机体免疫系统有着怎么样的影响,进而如何影响机体的炎症呢?我们发现荷瘤小鼠对ConA诱导的...
- 张鸿儒田高飞吴震州赵立青尹芝南
- 关键词:肝炎MDSCNKT
- 荷瘤小鼠肝脏免疫耐受的机制探讨
- 研究背景:肿瘤和炎症的关系一直是世界范围内科学家非常感兴趣的问题。越来越多的研究表明炎症是肿瘤生长过程中的重要因素。那么肿瘤的生长对机体免疫系统有着怎么样的影响,进而如何影响机体的炎症呢?我们发现荷瘤小鼠对ConA诱导的...
- 张鸿儒田高飞吴震州赵立青尹芝南
- 关键词:肝炎MDSCNKT
- 文献传递
- 营养环境对T细胞中IL-2表达影响的初步研究
- 2019年
- 白细胞介素2(IL-2)是一种重要的细胞因子,在机体免疫应答中发挥多种功能.探明不同营养环境对IL-2的影响对于细胞免疫应答、活化等基础研究均具有重要意义.通过使用RPMI、IMDM两种不同的细胞培养基,对小鼠淋巴细胞进行培养,分析T细胞中IL-2的表达水平.结果显示,IMDM培养基条件下,CD4+和CD8+T细胞中IL-2的表达均高于RPMI培养基,且IL-2的表达呈先下降后上升的动态改变.IMDM培养条件下,T细胞的细胞增殖能力与RPMI培养基类似.RPMI中增加氨基酸含量不能上调T细胞中IL-2的表达.研究结果为深入探讨外界环境对细胞分化和功能影响的研究奠定了初步的基础.
- 王倩田高飞赵立青
- 关键词:IL-2T细胞细胞分裂
- OGA糖苷酶酶活中心的鉴定
- 2012年
- N-乙酰葡萄糖胺(O-linkedN-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰是一种重要的蛋白翻译后修饰,参与生物体中的多种细胞活动.O-GlcNAcase(OGA)是生物体内唯一水解蛋白O-GlcNAc修饰的糖苷酶,但该酶的糖苷酶活性中心一直存在争论.实验利用PCR的方法,获得3种不同缺失的人源OGA片段(OGA1:aa1~916;OGA2:aa1~677;OGA3:aa1~350),并将3种片段构建到质粒pET28a中;重组质粒转化大肠杆菌BL21后,进行诱导表达、纯化;以4-甲基伞形酮2-乙酰氨基-2-脱氧葡萄糖为底物测定不同OGA片段的糖苷酶酶学特征常数.结果发现OGA3仍保持糖苷酶的活性,因此OGA的糖苷酶活性中心位于N端1-350aa.
- 李国超徐䶮田高飞李建华李延平冯涛李静
- 关键词:O-GLCNACASE缺失突变酶学特性
- O-GlcNAcase抗原片段的选择、优化表达和多克隆抗体的制备被引量:1
- 2011年
- 为了探讨O-GlcNAc修饰的生物学作用和相关疾病的发病机理,需制备高效、专一的O-GlcNAcase(OGA)抗体。通过对人源OGA蛋白进行序列分析发现,氨基端1~350 aa片段(sOGA)抗原性和亲水性较强,将该片段构建至原核表达载体pET-28a,并在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行诱导表达,通过优化IPTG浓度(0.05 mmol/L)和诱导时间(10 h)获得了高可溶性表达的重组蛋白酶。采用Ni-NTA亲和层析和分子筛层析对重组蛋白进行了纯化,SDS-PAGE检测分子量的大小(45 kDa)和纯度(95%以上)。以4-MU-O-GlcNAc为荧光底物,检测到sOGA的糖苷酶活性为106 nmol/(min.mg),表明该片段是OGA糖苷酶的活性区域。以此片段作为抗原免疫新西兰大白兔,以CNBr活化Sepharose 4B微珠纯化抗血清制备OGA特异性多克隆抗体。Western blotting和ELISA检测表明,该抗体可以特异识别含有OGA糖苷酶活性区域的多种变体,检测灵敏度为0.11 ng/mL(效价为1∶80 000),可应用于O-GlcNAcase生物功能研究。
- 林霖李国超李中华徐田高飞李静刘艳玲
- 关键词:O-GLCNACASE生物活性多克隆抗体