王颂
- 作品数：20 被引量：29H指数：3
- 供职机构：吉林大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅资助项目吉林省科技厅科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- VEGF／KDR双位点抑制诱导膀胱癌细胞凋亡和丝裂霉素C化疗增效的实验研究
- 2008年
- 目的观察针对VEGF/KDR双位点抑制诱导膀胱癌T24细胞凋亡以及对联合应用细胞毒药物丝裂霉素C(MMC)的增效作用。方法将针对血管内皮生长因子(VEGF)的VEGFsiRNA和VEGF受体2(KDR)的可溶性受体(sKDR)表达质粒共转染T24细胞和在其中加入MMC的细胞悬液分别汁射到裸鼠背部皮下,观察两者对裸鼠膀胱痛生长的影响。结果两种制剂均能在不同程度上诱导膀胱癌细胞凋亡,抑制癌细胞增殖,从而延缓甚至遏制肿瘤生长。但加入MMC组作用更显著,效果更好,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论VEGFsiRNA和sKDR通过双重途径有效抑制VEGF的生物活性,使其促肿瘤血管生成的能力明显降低,诱导细胞凋亡的作用显著提高。在辅以MMC后这种作用效果进一步加强。因此推测,抗VEGF/KDR基因的双位点靶向治疗与肿瘤化疗的结合可能是一个具有诱人前景和巨人潜力的膀胱癌治疗方案。
- 刘禄成韩艳君魏巍李然伟王颂
- 关键词：膀胱肿瘤血管内皮生长因子丝裂霉素C
- VEGF/VEGFR在膀胱癌中表达的研究被引量：8
- 2006年
- 目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)和血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)KDR在膀胱移行细胞癌(TCC)患者的组织标本及正常膀胱黏膜组织中的定位及表达情况。方法:分别采用免疫组化SABC法和TUNEL法检测60例膀胱癌组织,并以40例正常膀胱黏膜组织作为对照,比较两种不同组织中VEGF及KDR的阳性表达率和表达强度的差异。结果:在60例膀胱TCC中,VEGF和KDR分别有53例和51例呈阳性表达,平均表达率分别为88%和85%,随肿瘤病理分期和细胞分级的增高其表达水平上调。但在40例正常对照组中无一例表达。两者分别比较,差异均极显著(P<0.01)。结论:VEGF可能通过膀胱移行细胞上的相应受体而发挥一定的生物学作用。膀胱TCC患者的肿瘤组织中KDR的表达可能直接诱发了肿瘤血管的形成。
- 刘禄成李香云范海涛郭航张明王颂
- 关键词：膀胱癌血管内皮生长因子受体
- 可溶性血管内皮生长因子受体2片段的表达及其对血管内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体2（sKDR）抑制血管内皮细胞增殖及在血管生成中的作用。方法提取脐静脉内皮细胞（HUVEC）总RNA,扩增KDR基因膜外1~4结构域,构建原核表达载体pQE40-KDR,转化E.coli M15,经IPTG诱导表达,镍离子柱亲和层析纯化后复性,用Western blot检测sKDR蛋白的表达,MTT比色法和鸡胚尿囊膜（CAM）试验分别检测其对HUVEC增殖的影响及其对血管生成的作用。结果经RT-PCR扩增得到了1150 bp左右的sKDR片段,并在pQE40原核表达系统中表达了sKDR蛋白,以包涵体形式存在。纯化后蛋白电泳呈现相对分子质量50000左右的单一条带,纯化蛋白占总蛋白的98%,蛋白含量为80μg/ml。Western blot证实其为重组sKDR蛋白。MTT检测结果显示,sKDR可抑制血管内皮生长因子（VEGF）刺激的HUVEC增殖,并阻滞VEGF诱导的CAM血管增生。结论已成功构建sKDR原核表达载体,并在大肠杆菌M15中获得表达,纯化的sKDR片段具有与VEGF结合的生物学功能,有望成为基因治疗肿瘤血管形成的理想靶点。
- 李然伟刘禄成李哲王颂高瑞娟
- 关键词：血管内皮生长因子受体2血管生成人脐静脉内皮细胞鸡胚尿囊膜
- 克林霉素致血尿1例被引量：2
- 2008年
- 病例：患者，女。2008年2月于我院行剖官产手术。术前血常规、血生化检查示：白细胞计数6．66×10^9,／L，中性粒细胞65．5％，红细胞计数5．13×10^12/L，血红蛋白152g／L，血小板计数155×10^9／L，尿素氮5．12mmol／L，肌酐77．89μmol／L，总蛋白69．10g／L。术前尿常规检查未见异常。无药物过敏史。
- 蔡淼王颂
- 关键词：克林霉素血尿血生化检查红细胞计数血小板计数尿常规检查
- 不同品系小鼠肝螺杆菌感染实验模型的建立及病理特征分析被引量：1
- 2011年
- 目的应用肝螺杆菌感染不同品系小鼠，观察肝螺杆菌的定植状况及病理特征，以期获得稳定的动物模型。方法SPF级雄性BABL／c Cr、SCID／Cr、C57BL／6Cr小鼠接种肝螺杆菌（H．hepaticus，Hh）标准菌株ATCC51450菌液0．2ml（1×10^8CUF／ml），连续3次，每次间隔48h，对照组灌饲等量的PBS。于末次接种H^后第4周、8周及16周处死小鼠，取出小鼠食管、胃、空肠、回肠、盲肠、结肠、肝脏及胰腺组织，行病理组织学检查、微需氧菌分离培养鉴定及Hh特异性16SrRNA基因扩增。结果BALB／cCr小鼠和SCID／Cr小鼠接种Hh后4周、8周及16周盲肠定植率均为8／8，4周、8周及16周结肠定植率分别为（4／8、5／8、5／8）和（3／8、6／8、5／8），16周回肠及空肠定植率均为1／8，8周、16周肝脏定植率分别为（2／8、3／8）和（2／8、2／8）；C57BL／6Cr小鼠接种Hh后4周、8周16周盲肠定植率分别为1／8、2／8和2／8，8周、16周结肠定植率分别为1／8、2／8。Hh感染的BALB／cCr和SCID／Cr小鼠肝脏、盲肠及结肠炎症改变较C57BL／6Cr小鼠更为明显（P〈0．01），且随着感染时间的延长病理组织学评分逐渐增加（P值分别〈0．05和0．01），其中结肠及肝脏组织中Hh定植者的组织学评分明显高于无Hh定植者（P〈0．05），盲肠组织的病理组织学评分随着Hh定植密度的增加而增加（P〈0．05）。结论不同品系小鼠对Hh的易感性不同；BALB／cCr、SCID／Cr小鼠接种Hh后可获得较好的Hh感染模型。
- 李红艳季尚玮王颂张永贵斯庆图娜拉王静杨吉利张曼华王江滨
- 关键词：螺杆菌感染疾病模型小鼠SCID小鼠
- 良性前列腺增生TURP术后病理诊断前列腺癌27例分析被引量：1
- 2007年
- 目的探讨前列腺增生症病人经尿道前列腺电切(TURP)术后病理检出前列腺癌的临床特点及治疗措施。方法对三家医院于2003年1月～2006年12月经尿道前列腺电切术(TURP)327例进行回顾性分析,对比术后病理诊断为前列腺癌的患者与前列腺增生的患者的前列腺抗原及前列腺特异性抗原密度(PSAD)。结果327例患者中PSA在4～10ng/ml间者共112例,PSA在10～20ng/ml之间者共15例。术后病理诊断为前列腺癌的27例,其中有21例患者的PSAD值高于0.15。结论经尿道前列腺电切术(TURP)是早期发现前列腺癌的重要手段;前列腺特异性抗原密度(PSAD)有助于更好地鉴别前列腺增生症和前列腺癌。
- 李颂王颂黄海
- 关键词：经尿道前列腺电切术前列腺偶发癌检出率
- 荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型的建立及VEGFsiRNA转染对肿瘤生长的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:建立模拟人的荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型,评价经VEGFsiRNA转染的人膀胱移行细胞癌T24细胞和未经转染的T24细胞在裸鼠膀胱内的成瘤状况。方法:采用细胞移植法分别将转染和未转染的T24细胞移植到裸鼠膀胱内后用核磁共振成像(MRI)定期检测,并在28d时处死动物称瘤重量,测定瘤体积,进行组织病理学和细胞学检查。结果:两组裸鼠膀胱内的总成瘤率为90%(36/40),转染组瘤细胞生长速度明显缓于未转染组。转染组和未转染组的重量和体积分别为:(1.1±0.3)g,(1.6±0.5)g;(805±172)mm3和(1389±294)mm3,两组比较差异具有显著性(P<0.05)。组织病理学和细胞学检查结果表明,转染组T24细胞恶性程度降低,浸润转移能力减弱,未转染组T24细胞恶性程度未发生改变,表现出极强的浸润转移倾向。结论:模拟人的荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型更接近人体膀胱肿瘤的向膀胱腔内生长过程,荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型可用于研究开发新型膀胱内抗肿瘤生物免疫制剂和抗癌化疗药物临床前期评价。
- 朱德淳梁新刘禄成李然伟任明郭航李志王颂
- 关键词：膀胱肿瘤裸鼠
- 膀胱内灌注盐酸表柔比星预防膀胱癌术后复发92例临床对照研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究盐酸表柔比星膀胱灌注预防经尿道膀胱癌电切术(TURBt)术后复发的疗效。方法对184例膀胱癌患者在TVRBt术后行膀胱灌注化疗,平均分成两组:Ⅰ组(92例)定期膀胱内灌注盐酸表柔比星,术后第1天使用50 mg,膀胱内灌注保留2 h,1周后开始常规灌注化疗,每周1次连续3次,然后每月1次连续11次,共1年;Ⅱ组(92例)为对照组灌注丝裂霉素40mg,灌注方法同Ⅰ组。结果随访10～46个月,平均(30±4)个月。复发率Ⅰ组为6.5%,Ⅱ组为17.4%,差异有统计学意义(P<0.05);不良反应包括尿路刺激症状、肉眼血尿等,两组比较差异无统计学意义。结论 TURBt后早期膀胱内灌注盐酸表柔比星化疗,可以显著降低膀胱肿瘤复发率。
- 张明刘秋菊魏巍王颂张丹
- 关键词：膀胱癌盐酸表柔比星膀胱灌注
- 膀胱癌患者体液中血管内皮生长因子含量检测
- 2006年
- 目的测定膀胱癌患者血液和尿液中血管内皮生长因子(VEGF)的含量。方法采用免疫组化ELISA法检测60例膀胱癌患者及30例健康志愿者体液中VEGF的表达。结果膀胱癌组血液和尿液中VEGF含量明显高于对照组(P<0·001和P<0·005)。结论膀胱癌患者VEGF水平增高有可能成为一种新的肿瘤标志物而用于膀胱癌的早期诊断及病情进展的动态监测指标。
- 李香云王春光刘禄成王颂李志郭航
- 关键词：膀胱癌血管内皮生长因子体液
- 血管内皮生长因子及其受体双靶向阻断对膀胱癌细胞生长及血管生成的抑制作用
- 2008年
- 目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（KDR）双靶向阻断对人膀胱癌T24细胞和裸鼠膀胱癌移植瘤生长的抑制作用。方法构建VEGF siRNA和可溶性KDR（sKDR）表达质粒的共转染细胞系，采用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法和流式细胞仪测定T24细胞的增殖和凋亡，采用免疫组化法检测裸鼠移植瘤组织中VEGF的表达、瘤间质微血管密度（MVD）和细胞DNA拓扑异构酶（Topo）Ⅱα的表达，采用原位末端标记（TUNEL）法检测裸鼠移植瘤中肿瘤细胞的凋亡。结果MTT法检测结果显示，VEGF siRNA、sKDR和联合应用组细胞的生存率分别为56．3％±8．3％、42．6％±13．8％和32．5％±4．3％，均明显低于阴性对照组（97．3％±11．6％，P〈0．0001）。流式细胞仪分析显示，VEGF siRNA、sKDR和联合应用组在G0期前均出现亚二倍体凋亡峰，凋亡率分别为5．1％±0．9％、4．2％±0．5％和8．8％±0．7％，均高于阴性对照组（0．9％±0．4％，P〈0．05），而且联合应用组的凋亡率还明显高于VEGF siRNA和sKDR组（P〈0．01）。体内实验结果显示，VEGF siRNA、sKDR和联合应用组的肿瘤生长均受到不同程度的抑制，联合应用组从16d开始肿瘤体积即明显小于阴性对照组（P〈0．05），28d起肿瘤生长几乎处于停滞状态。免疫组化分析显示，联合应用组肿瘤组织中VEGF的表达水平为54．37±5．28，显著低于阴性对照组（141．66±8．59，P〈0．0001）；瘤间质MVD仅为8．22±3．79，明显低于阴性对照组（61．76±5．28，P〈0．0001）和sKDR组（19．46±4．16，P=0．0089）；瘤细胞增殖指数为1．5％±0．7％，显著低于阴性对照组（11．8％±5．2％，P〈0．0001）；而凋亡率达到67．2％±8．5％，明显高于阴性对照组（8．7％±2．7％，P〈0．0001）、VEGF siRNA组（54．3％±4．8％，P=0．0492）和sKDR组（52．3％±6．4％，P=0．0293）。结论VEGF siR
- 陈秀玲刘禄成许宗革李哲李然伟高瑞娟王颂张明郭航
- 关键词：膀胱肿瘤血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体2裸鼠
