王玉
- 作品数：83 被引量：287H指数：9
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省卫生厅科技基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点的体外克隆与应用
- 2012年
- 目的探讨基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点在基因克隆中的效用。方法以pIRES2-EGFP为母本,PCR扩增获得携附加XhoⅠ位点和满足甲基化序列组成的XbaⅠ位点、同时缺失IRES和EGFP区段的载体骨架pΔSG,其PCR产物与携带对等酶切位点的EGFP PCR产物经酶切、连接后,构建重组质粒rpΔSG-EGFPV-Xho、rpΔSG-EGFPV-Xba。另将pΔSG和EGFP的PCR产物分别与pMD 18-T Simple T载体连接,构建重组质粒psT-ΔSG和psT-EGFP,并亚克隆获得重组质粒rpΔSG-sT-EGFPV-Xho。以DsRed2基因置换rpΔSG-sT-EGFPV-Xho中的EGFP基因,获得重组质粒rpΔSG-sT-DsRed2V-Xho。各重组质粒经脂质体介导转染CHO细胞。结果各重组质粒转染的细胞中明显可见EGFP或DsRed2的高效表达。结论 PCR产物中满足甲基化序列组成的XbaⅠ位点,在体外酶切与连接的克隆效果良好;该序列经体外重组并导入Dam+和/或Dcm+宿主菌中扩增时被重新甲基化而受保护,且对重组质粒在宿主细胞内的稳定性和生物活性没有明显影响。
- 王玉于爱莲姜世金郭慧君赵英会于广福施鲁笛
- 关键词：重组克隆稳定性生物活性
- HSV-2gD模拟抗原表位、HBsAg与IL-18融合蛋白DNA疫苗的免疫效果观察
- 2012年
- 目的:研究串联重组核酸疫苗pc(pcDNA3.1)-S(HBsAg)-P6-IL18和pc(pcDNA3.1)-S(HBsAg)-NP6-IL18对机体的免疫效果,P6是我们前期采用噬菌体展示技术筛选出的HSV-2gD的模拟抗原表位,NP6为与HSV-2gD模拟抗原表位P6最相似的天然抗原表位序列。方法:分别将空质粒pcDNA3.1(阴性对照组)和构建的真核表达质粒pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18肌内注射免疫接种BALB/c小鼠3次,每次间隔2周。末次免疫后2周眼眶静脉采血,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量;末次免疫后一月,处死小鼠,无菌分离脾脏,用刀豆蛋白A刺激淋巴细胞,采用MTT法测定脾淋巴细胞增殖率。结果:重组核酸疫苗pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18免疫小鼠后可刺激血清特异性抗体(抗HBsAg抗体和抗HSV-2gD模拟表位抗体)的产生,与阴性对照组相比可诱导分泌较高水平的IFN-γ和IL-18,可促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。结论:重组核酸疫苗pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18能诱导较强的细胞免疫和体液免疫,可用于今后预防HBV和HSV-2感染的研究。
- 焦凤萍郑绮菡于爱莲王玉于广福
- 关键词：DNA疫苗IL-18HBSAG
- 基于MSAP的牡丹复色花DNA甲基化分析
- 牡丹原产中国，花色丰富，娇艳多变。在牡丹众多的花色表型中，复色花最为稀少珍贵，具有较高的观赏价值。但牡丹复色花形成的机理，目前尚不清楚。探讨牡丹复色花形成机理对指导牡丹花色调控以及牡丹复色花育种具有重要意义。本研究选取花...
- 王玉
- 关键词：DNA甲基化基因克隆
- 文献传递
- 中国花卉业发展动态研究被引量：4
- 2014年
- 随着经济的发展,中国花卉业取得了令人瞩目的成就,并逐步成为中国的一个新兴产业。为了解中国花卉业近20年的发展动态,笔者通过文献查询与实地调研对中国花卉业发展现状、动因、趋势、存在的问题展开研究。研究表明,中国花卉业发展总体呈逐年增长趋势,尤其是近10年来,由于花卉市场需求旺盛和国家对农业进行战略性的结构调整,中国花卉业的发展尤为迅速。花卉生产面积逐年扩大,2012年生产面积达到112万hm2,成为世界花卉种植面积最大的国家;花卉产值以超过20%的速度增长,内销市场越来越旺,出口创汇也有较大幅度上升,具有良好的产业前景。但是中国花卉业在生产、市场、科研、管理等方面还存在不少问题,必须尽快采取相应的对策措施,才能使中国花卉业顺利健康发展。
- 张娜娜赵兰勇谢婷婷王玉
- 关键词：花卉业
- HBsAg、HSV-2gD双抗原真核表达载体的构建
- 2012年
- 目的利用简并引物PCR法及重叠PCR法构建HBsAg(S),HSV-2gD模拟抗原表位P6及天然抗原表位NP6,IL-18真核表达载体,并对其表达能力进行鉴定,为后期疫苗的研制奠定基础。方法采用简并引物PCR法扩增IL-18-P6(包括P6-IL-18)片段及IL-18-NP6(包括NP6-IL-18);根据GenBank(FJ589066.1)公布的S基因设计引物,扩增获得含有重叠区的S片段(包括S1,S2,S3,S4);采用重叠PCR法扩增三基因融合片段IL-18-P6-S,IL-18-NP6-S,S-P6-IL-18和S-NP6-IL-18,经纯化回收后将其克隆到原核载体pMD 18-T simple vector中,测序正确的目的片段插入真核表达载体pcDNA3.1(-),构建重组质粒pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcD-NA3.1-S-NP6-IL-18,采用间接免疫荧光法检测靶基因的表达情况。结果成功构建了含有双抗原的真核表达载体pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcDNA3.1-S-NP6-IL-18。脂质体介导真核表达载体转染CHO细胞,间接免疫荧光法检测细胞浆中有黄绿色荧光。结论构建的真核表达载体pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcDNA3.1-S-NP6-IL-18能在CHO细胞中有效表达。
- 郑绮菡王玉焦凤萍于爱莲于广福
- 关键词：重叠PCRHBSAGHSV-2GDIL-18
- PBL+LBL双轨教学法在留学生医学微生物学教学中应用的探索被引量：9
- 2013年
- 目的:评价PBL+LBL双轨教学法在留学生医学微生物学教学中应用效果。方法:采用期末考试成绩和问卷调查综合评价PBL+LBL双轨教学法的教学效果。结果:期末考试实验班学生成绩显著高于对照班学生成绩(P<0.05)。90%以上的学生认为PBL+LBL双轨教学模式可激发学习兴趣,提高自身多重能力。结论:PBL+LBL双轨教学法在留学生的教学效果明显优于传统LBL教学。
- 邱玉玉李晓霞景学安李仙兰于爱莲张忠王玉于广福
- 关键词：留学生医学微生物
- 荷斯坦牛leptin基因exon 2突变与泌乳性能的关联分析被引量：5
- 2007年
- leptin蛋白是leptin基因在脂肪组织表达的一种蛋白质,经证实,其基因单核苷酸多态性与奶牛的繁殖力、能量平衡及乳蛋白含量相关。本研究运用PCR-RFLP方法,对荷斯坦牛leptin基因外显子2序列E2JW和E2FB位点进行了突变检测,并分离了基因型,然后应用SAS 8.2软件分析了两个位点突变对泌乳性能的影响。结果发现,E2JW SNP不同基因型对乳脂率(P=0.02)、305d产奶量(P=0.03)的影响显著;E2FB SNP不同基因型对乳蛋白率的影响显著(P=0.04);在分析E2JW SNP和E2FB SNP联合基因型对305 d产奶量的影响中,AB/CC基因型与AA/CC、AA/CD、AA/DD、AB/CD、AB/DD之间存在显著性差异,在对乳脂率的影响中,AA/CD基因型与AB/CD基因型之间存在显著性差异;因此,荷斯坦牛leptin基因E2JW和E2FB位点可以作为影响泌乳性能的两个标记。
- 徐凯勇姜运良王玉东金华吴红超樊新忠
- 关键词：荷斯坦牛LEPTIN基因单核苷酸多态性泌乳性能
- HBV相关肝细胞癌肝组织中HBV cccDNA突变位点筛选分析被引量：6
- 2016年
- 目的阐明乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝细胞癌的癌组织与癌旁组织中HBV cccDNA全基因组的点突变模式及其与HBV cccDNA和总DNA含量的关系,寻找可以作为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后判断指标的突变位点。方法取23例HCC患者术后肝癌与癌旁组织各1份,采用Qiagen法提取DNA,采用滚环扩增HBV cccDNA,采用Taqman探针法定量测定HBV cccDNA和总DNA。采用PCR分段扩增HBV cccDNA全基因组,PCR产物纯化后测序,确定其基因型,并与标准野生株序列比对,确定HBV cccDNA的突变位点。结果肝癌与癌旁组织中HBV cccDNA突变频率较高的位点集中于X和C区,肝癌与癌旁组织突变个数之和大于10的位点有26个。G1719突变组HBV cccDNA和总DNA的含量均低于T1719野生型组(t=2.449,P<0.05和t=2.525,P<0.05),G1719突变组患者术后生存时间短于T1719野生型组(χ2=8.56,P<0.05),并且T1719G突变与患者BCLC分级相关,G1719突变组更倾向于较高的BCLC分级(χ2=6.296,P<0.05)。结论 T1719G突变可能成为HCC患者术后预后的早期预测因素,值得进一步研究。
- 焦凤萍龙璐谢宵梦于爱莲王玉
- 关键词：乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA突变肝细胞癌
- 同向串联共表达双色荧光蛋白报告基因载体
- 本发明涉及同向串联共表达双色荧光蛋白报告基因载体pDsRed2-MCS-EGFP。它是在载体pIRES2-EGFP的基础上，经PCR反应获得缺失IRES和EGFP序列的载体骨架pΔSG，构建其T载体克隆psT-ΔSG，酶...
- 王玉于爱莲姜世金施鲁笛
- 文献传递
- 输卵管妊娠主要危险因素的Meta分析被引量：11
- 2007年
- 目的:探讨目前我国人群输卵管妊娠发生的主要危险因素.方法:对近4a国内已发表的关于输卵管妊娠的病因研究的文献进行查阅,综合,再用SAS8.1版本软件和Ex-cel2003软件分析.结果:炎症、巨细胞病毒、手术史、细小病毒、解脲支原体、沙眼衣原体均与输卵管妊娠有关.其中炎症、巨细胞病毒,手术史与输卵管妊娠关系最密切.结论:预防炎症,减少微生物感染是预防输卵管的主要手段.
- 赵英会张念华侯海峰王玉张忠侯盼飞于爱莲
- 关键词：META分析随机效应模型
