王建锋
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：天津市高等学校科技发展基金计划项目国际科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 基于细胞性质分析不同有机溶剂对简单节杆菌C1,2脱氢反应的影响被引量：6
- 2012年
- 通过对简单节杆菌细胞性质的研究,探讨了不同有机溶剂(乙醇、DMF、DMSO、甲醇)加入后醋酸可的松生物转化反应效率产生差异的原因。采用底物转化法检测生物转化率,采用平板活菌计数法计算细胞存活率,通过糖代谢活力保留值表征细胞的生理代谢活力,用原子力显微镜观察细胞超显微结构,以FDA法表征细胞膜通透性。在体积分数为4%的条件下,4种有机溶剂均能提高简单节杆菌生物转化醋酸可的松的初始转化速率和最终转化率,转化率从高到低依次为乙醇>DMSO>甲醇>DMF;4种溶剂对简单节杆菌存活率和糖代谢活力保留值的影响趋势基本一致,其中DMF最大,DMSO次之,乙醇和甲醇较小;4种溶剂中,甲醇对简单节杆菌细胞完整性的影响最大,乙醇次之,DMF和DMSO差别不明显;4种有机溶剂对简单节杆菌细胞膜通透性的影响大小依次为甲醇>乙醇>DMSO>DMF。上述结果表明,细胞生理代谢活力和细胞膜通透性的差异是造成转化率水平不同的重要原因。其中,细胞膜通透性的增强有利于底物分子更容易进入细胞与生物酶接触,进而提高转化率。
- 骆健美宋妍王建锋宁静成永新郑宇申雁冰
- 关键词：有机溶剂简单节杆菌脱氢反应
- 基于抑菌活性的ε-聚赖氨酸的微孔板生物检测法被引量：4
- 2011年
- 基于ε-聚赖氨酸的抑菌活性,以96微孔板为平台,建立适合大规模样品快速分析的微孔板生物检测法。结果表明,藤黄微球菌(Micrococcus luteus)为最适敏感指示菌,当敏感指示菌初始浓度为107-108 CFU/mL,培养时间为4 h时,ε-聚赖氨酸浓度在100.00-500.00 mg/L范围内与抑菌率呈较显著的线性关系(R2=0.997 5)。该方法不仅表现出良好的精密度和准确度,与HPLC和甲基橙法的实验结果对比,微孔板生物检测法的相对标准偏差(RSD)和相对偏差(RD)分别小于3.5%和3.0%,说明该方法是一种与HPLC法有类似分析精度,但能直接反映样品的抑菌活性,且更适合大规模样品快速检测的方法,可用于发酵过程中ε-聚赖氨酸产量的检测和突变株的高通量筛选。
- 骆健美成永新李培君王建锋郑宇王敏
- 关键词：Ε-聚赖氨酸微孔板生物检测抑菌活性藤黄微球菌
- 基于快速筛选的纳他霉素产生菌的微量培养
- 2010年
- 以纳他霉素产生菌——褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)为研究对象,以96深孔板为载体,建立适合大规模菌株快速筛选的微量培养体系。首先用8层纱布外加有孔不锈钢盖子较好地解决了水分蒸发及交叉污染的问题;确定了深孔板装液量600μL、转速300r/min、振幅40mm的最佳培养条件,此时菌体生长和产物合成的变化趋势均与摇瓶培养过程非常类似。实验发现微量培养体系的最大板内和板间差异分别为1.93%和6.62%,通过统计学软件分析,两种不同培养体系下获得的菌株产量之间具有极显著的线性回归关系(F=39.303,P=0.00<0.01),产量分布的排序大致相同,这表明微孔板作为培养体系,具有标准化、平行化等优点,能很好地应用于大量菌株的快速筛选。
- 骆健美刘峰张俊威李建姝王建锋王敏
- 关键词：纳他霉素褐黄孢链霉菌
- 乙醇对简单节杆菌TCCC 11037生长和细胞性质的影响被引量：4
- 2011年
- 研究了乙醇体积分数对简单节杆菌TCCC 11037生长和细胞性质的影响。结果表明,随着乙醇体积分数的增大,菌体的延滞期延长,生物量和比生长速率下降,当乙醇体积分数为6%时几乎不能观察到明显的菌体生长;菌体形态随着乙醇体积分数的增大出现较明显的改变,当乙醇体积分数为8%时,细胞完整性明显破坏,胞浆大量外泄;菌体的耗糖能力随着乙醇体积分数的增大受到明显抑制,菌体生长到32 h时,对照组和3%乙醇添加组中的葡萄糖浓度由9.8g.L-1分别下降到2.2 g.L-1和5.6 g.L-1,6%乙醇添加组几乎没有明显的糖耗。利用Rh123法和FDA荧光法分别测定了乙醇体积分数对菌体跨膜电位和通透性的影响。结果表明,随着乙醇体积分数的增大,跨膜电位下降,细胞膜通透性提高,当乙醇体积分数为3%和6%时,跨膜电位分别下降了14.14%和24.58%,细胞膜通透性分别增加了6.58%和18.37%。
- 王建锋骆健美宋妍刘洋郑宇王敏
- 关键词：简单节杆菌乙醇体积分数菌体生长
