- 新耐药基因HA117多克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的制备HA117多克隆抗体。方法以HA117表达质粒pAdTrack-HA117为模板,PCR扩增HA117基因,扩增产物转入BL21(DE3)感受态细胞,进行HA117蛋白诱导表达,采用SDS-PAGE检测表达产物。纯化HA117蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。通过间接ELISA检测其效价。将转染携带HA117重组腺病毒的HEK293细胞为实验组,未转染的HEK293细胞为对照组,用细胞免疫荧光和Western blot方法检测其过表达的HA117蛋白,验证制备的HA117多克隆抗体的特异性。结果成功获得HA117多克隆抗体,间接ELISA法检测显示抗HA117血清效价为1∶729 000。细胞免疫荧光和Western blot检测示制备的HA117多克隆抗体可以特异性识别HA117抗原蛋白。结论获得了效价和特异性较高的HA117多克隆抗体。
- 陈建飞金先庆丁雄辉孙艳辉赵利华郭振华王士奇
- 关键词：多克隆抗体抗体制备
- 经典P-糖蛋白在儿童淋巴瘤和肾母细胞瘤中的表达及意义被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)在儿童霍奇金淋巴瘤(Hodgkin disease,HL)、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin disease,NHL)和肾母细胞瘤(Wilms’tumor,WT)中的表达意义,为临床制定个体化疗方案提供理论依据。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例淋巴瘤(HL 26例、NHL 24例)和32例WT中P-gp的表达情况及其与临床病理特征的关系。结果:(1)P-gp在HL、NHL、WT中的阳性表达率分别为57.7%、70.8%、65.6%。(2)HL和NHL中P-gp的表达差异无统计学意义(P=0.39),WT与癌旁对照组中P-gp的表达差异无统计学意义(P=1.00)。(3)HL的乳酸脱氢酶的量、有无纵膈病变对P-gp表达的影响有统计学意义(P=0.03、P=0.05);NHL的临床分期对P-gp的表达影响也有统计学意义(P=0.02);WT的组织分型、临床分期、有无淋巴结转移和术前化疗对P-gp的表达差异无统计学意义(P=0.53、P=0.25、P=0.64、P=0.45)。结论:(1)P-gp的高表达与儿童HL、NHL和WT的耐药密切相关,是这3种肿瘤预后的不利因素。(2)在临床上可以根据肿瘤耐药蛋白的表达情况针对性地选择化疗药物,使肿瘤患儿用上敏感的化疗药物。
- 段文娟丁雄辉金先庆王士奇刘行朱进
- 关键词：P-糖蛋白霍奇金淋巴瘤非霍奇金淋巴瘤肾母细胞瘤
- 梅克尔憩室并发症101例临床分析被引量：11
- 2012年
- 目的总结梅克尔憩室并发症临床特点，提高对该病并发症的诊治水平。方法回顾性分析我院近3年收治的101例梅克尔憩室并发症手术患儿诊疗经过，对其症状、检查、手术情况等进行统计学分析。结果并发症中出血50例、肠梗阻37例、憩室炎7例、穿孔7例，比例约为7：5：1：1。本组梅克尔憩室^99mTc检查敏感度92％，全部病例痊愈出院。结论患儿中出血最常见，并发梗阻、炎症及穿孔术前不易确诊^99mTc检查可以诊断梅克尔憩室，其准确率与和异位组织相关，受憩室炎症影响；与性别、年龄、病程、憩室距回盲部距离无相关性。
- 金鑫李晓庆周德凯王士奇朱进张艳金先庆
- 关键词：梅克尔憩室手术后并发症
- ATRA耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义。方法随机选择23例肺癌组织和21例乳腺癌组织作为实验组,9例非癌肺组织和11例非癌乳腺组织作为对照组,应用免疫组化S-P法检测HA117相关蛋白在上述组织切片中的表达,并结合其临床资料进行回顾性分析。结果 HA117相关蛋白在肺癌组织、乳腺癌组织、非癌肺组织及非癌乳腺组织中的阳性表达率分别为60.9%(14/23)、57.1%(12/21)、11.1%(1/9)及0.0%(0/11)。HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的阳性表达明显高于非癌组织(P<0.05)。HA117相关蛋白的表达水平与肺癌及乳腺癌患者的年龄、肿瘤分级、病理分型、淋巴结转移及有无术前化疗方面无明显相关性(P>0.05)。结论 HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌的高表达提示二者对ATRA具有较强的耐药性。
- 牟廷刚金先庆赵利华丁雄辉陈建飞孙艳辉李昆昆王士奇
- 关键词：多药耐药相关蛋白类肺肿瘤维甲酸
- 外源性人多药耐药基因转染对兔骨髓单个核细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2010年
- 目的：观察外源性人多药耐药基因（human multidrug resistance gene 1, hMDR1）对新西兰兔骨髓单个核细胞（mononuclear cells, MNCs）生物学行为的影响.方法：用携带目的基因hMDR1和绿色荧光蛋白（green fluorescence protein, GFP）报告基因的复制缺陷型重组腺病毒（rAd-hMDR1-GFP）转染原代培养的MNCs以获取hMDR1基因修饰的MNCs （MNCs-rAd-hMDR1-GFP）,荧光显微镜和FCM法检测转染效率;MTT法绘制MNCs-rAd-hMDR1-GFP细胞生长曲线;FCM检测MNCs-rAd-hMDR1-GFP细胞周期及细胞凋亡情况;RT-PCR及Western印迹法从基因和蛋白水平检测MNCs-rAd-hMDR1-GFP细胞内hMDR1的表达;柔红霉素（daunorubicin, DNR）泵出实验检测导入hMDR1基因的外排泵生理功能.结果：感染复数（multiplicity of infection, MOI）为100时,rAd-hMDR1-GFP对MNCs的转染效率为30%～35%,且不影响MNCs增殖生长;FCM结果提示,rAd-hMDR1-GFP对MNCs细胞周期及凋亡无影响（P＞0.05）;rAd-hMDR1-GFP转染72 h后hMDR1转录水平和P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）表达水平均明显升高（P＜0.01）,且外源性hMDR1能发挥外排泵功能（P＜0.01）.结论：rAd-hMDR1-GFP能将外源性hMDR1基因高效导入兔骨髓MNCs并稳定功能性表达,不影响MNCs细胞周期、细胞凋亡及细胞增殖生长等生物学特性,为进一步研究hMDR1基因的骨髓保护作用提供实验依据.
- 赵利华郭振华金先庆丁雄辉孙艳辉王士奇
- 关键词：肿瘤治疗方案MDR骨髓
- 先天性肛门直肠畸形发病的基因网络调控机制研究
- 第一部分：miRNA-mRNA芯片联合筛选肛门直肠畸形的致病基因 目的:检测肛门直肠畸形(Anorectal Malformations，ARMs)患者直肠末端组织中的miRNA表达谱、mRNA表达谱，利用生物信息学方...
- 王士奇
- 关键词：生物信息学肛门直肠畸形基因网络
- 肥大细胞、神经纤维在先天性肠无神经节细胞症中的相关性研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨肥大细胞、神经纤维在先天性肠无神经节细胞症(HD)患者不同肠段中有无数量及形态变化以及在HD中的可能作用。方法选择2010年1月至2011年12月重庆医科大学附属儿童医院收治的40例HD患者肠组织标本为实验组。选择10例尸检患儿(死于非消化道疾病)直肠标本作为对照组,分别采用甲苯胺蓝化学染色法、S-100免疫组织化学染色法及复合染色法处理,显微镜观察肥大细胞及神经纤维的分布及变化情况。结果镜下肥大细胞主要集中在肠段黏膜层及黏膜下层,与神经纤维毗邻,HD患者痉挛段肥大细胞较对照组及扩张段明显增多(P<0.05),脱颗粒明显,黏膜下层S-100阳性神经纤维表达增强(P<0.05),肥大细胞密度与神经纤维的密度及面积具有相关性(r=0.573,P<0.01;r=0.514,P<0.01)。结论肥大细胞与神经纤维关系密切,两者的变化及相互作用在HD的发病机制中具有重要意义。
- 王士奇金先庆朱进张艳丁雄辉孙艳辉
- 关键词：肥大细胞神经纤维
- 新基因HA117在肠腺癌中的表达及意义被引量：4
- 2011年
- 目的研究新基因HA117在肠腺癌细胞中的表达位置和分布情况,了解其与肠腺癌各临床病例特征的关系。方法应用免疫组化SP法,检测20例肠腺癌和10例结肠正常组织中HA117的表达。结果 HA117在肠腺癌中的表达阳性率为75%,在正常结肠组织中的表达阳性率为10%,其结果差异有统计学意义（P=0.001）;结肠癌组织中的阳性表达率显著高于直肠癌组织和正常结肠组织（P=0.002）。在Ⅲ~Ⅳ期组织中的表达阳性率比Ⅰ~Ⅱ期高,有淋巴结转移组的表达阳性率比无淋巴结转移组高,低分化组的表达阳性率比中高分化组高,但其结果差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 HA117在肠腺癌中有着广泛的分布,从而提示实体肿瘤对化疗药物的耐受性同样受HA117基因的影响。
- 李昆昆金先庆赵利华丁雄辉陈建飞孙艳辉牟廷刚王士奇
- 关键词：基因免疫组织化学
- BMP信号通路在先天性肠无神经节细胞症发生中的作用及机制研究
- 目的：研究BMP信号系统在肠神经节细胞、肠平滑肌组织发生、分化、增殖中的作用,揭示肠无神经节细胞症的发病原因。方法：①获取肠神经嵴干细胞(ENSCs),鉴定干细胞特性(Nestin、P75、CD49d+),采用原代培养及...
- 金先庆郭振华李晓庆丁雄辉王士奇顾晓艳
- 关键词：发病原因
- ATRA耐药基因HA117编码蛋白在常见实体肿瘤的表达及临床意义
- 目的 探讨ATRA相关多药耐药基因HA117的编码蛋白在成人肠腺癌、肺癌、乳腺癌及儿童淋巴瘤、肾母细胞瘤、神经母细胞瘤组织中的表达特点，探讨HA117基因表达的临床意义。
- 刘行段文娟牟廷刚丁雄辉孙艳辉王士奇金先庆
- 关键词：多药耐药实体瘤维甲酸
