王一
- 作品数:304 被引量:621H指数:11
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 大鼠视网膜神经节细胞存活和突起生长与可溶性混合晶状体蛋白的促进作用:体外培养实验被引量:4
- 2005年
- 目的:观察不同培养基中血清和混合晶状体蛋白对视网膜神经节细胞的影响,探讨晶状体损伤后其促进视网膜神经节细胞存活和再生的作用。方法:实验于2004-04/07在解放军第三军医大学西南眼科医院眼科实验室完成。选择成年LongEvens大鼠8只用于可溶性混合晶状体蛋白的提取;选择新生0~2dLongEvens大鼠30只用于视网膜神经节细胞的培养。分别用下列3组培养基对离体视网膜神经节细胞进行培养:①100mL/L新生牛血清+900mL/LDMEM/F12培养基(新生牛血清+DMEM/F12组)。②100mL/L新生牛血清+100mL/L胎牛血清+800mL/LDMEM/F12培养基(新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组)。③100mL/L胎牛血清+900mL/LDMEM/F12培养基(胎牛血清+DMEM/F12组)。每组又分为6个亚组,其中5个亚组分别加入5种不同终浓度的可溶性混合晶状体蛋白(1,0.5,0.02,0.01,0.005mg/L)溶液,一个亚组不加可溶性混合晶状体蛋白液。每天在倒置相差显微镜下观察细胞生长情况,记录存活细胞数和存活时间。培养2,4,6d后,计数每视野分散的、有突起生长的视网膜神经节细胞数和最长突起长度(每一视野随机取5个细胞进行测量,共30个视野,150个突起)应用LeicaQWin图像分析系统。结果:①视网膜神经节细胞存活时间:新生牛血清+DMEM/F12组培养细胞能存活六七天,新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组和胎牛血清+DMEM/F12组培养细胞能存活七八天。②有突起生长的视网膜神经节细胞数目和最长突起长度:在相同培养天数(2,4,6d)和条件下(加入同一终浓度晶状体蛋白)新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组细胞数目均多于新生牛血清+DMEM/F12组犤加入0.5mg/L晶状体蛋白,2d时(3.83±4.53比0.14±0.38)个/视野,(4d时14.7±9.62比2.5±3.89)个/视野,P<0.01;6d时(20.13±12.32比5.43±5.62)个/视野,P<0.05犦;在4d内胎牛血清+DMEM/F12组细胞突起长度明显优于新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组(P<0.01);加入混合晶状体蛋�
- 刘康王一牛建军王艳华曾玉晓
- 关键词:视网膜神经节细胞细胞培养
- 巨噬细胞培养液对离体培养的大鼠视网膜神经节细胞的作用研究被引量:1
- 2006年
- 目的研究巨噬细胞培养液对离体培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglioncells,RGCs)存活和生长的作用,探讨损伤晶状体促进RGCs存活和轴突再生的作用物质,为视神经损伤和再生的基础研究提供理论依据。方法制备大鼠巨噬细胞培养液,分别用巨噬细胞培养液及DMEM对RGCs进行离体培养,观察RGCs在体外存活的时间,测量培养1d、3d和5d有突起的RGCs数目及最长突起长度,进行组间比较。结果(1)对照组离体培养的细胞于培养5~6d崩解死亡,而巨噬细胞培养液组细胞能存活6~8d;(2)培养1d、3d和5d,巨噬细胞培养液组有突起的RGCs数目分别为(59.74±2.04)个.mm-2、(96.78±4.11)个.mm-2和(99.26±3.04)个.mm-2,均明显多于同期对照组,差异非常显著(P<0.01);(3)培养1d和3d,巨噬细胞培养液组RGCs最长突起长度分别为(39.70±0.71)μm和(76.19±1.56)μm,较对照组延长,差异非常显著(P<0.01)。培养5d,RGCs最长突起长度与对照组比较差异显著(P<0.05)。结论巨噬细胞培养液可促进离体培养的RGCs存活和生长。
- 王艳华王一曾玉晓王东武
- 关键词:视网膜神经节细胞细胞培养
- 医用组织粘合剂在眼科应用的现状和未来
- 组织粘合剂在眼科手术中的应用于1963年被提出, 1968年首次被报道用于角膜穿孔的过程,它分为两大类: 合成粘合剂(如氰基丙烯酸酯衍生物)和生物粘合剂(如纤维蛋白粘合剂).在眼科临床,组织粘合剂已被用于:翼状胬肉手术,...
- 王一
- 文献传递
- 玻璃体切除联合硅油填充术治疗糖尿病视网膜病变的愈后及并发症分析被引量:24
- 2015年
- 目的探讨玻璃体切除联合眼内硅油填充术治疗糖尿病视网膜病变的视力改善及并发症分析。方法回顾性分析98眼行玻璃体切除联合眼内硅油填充术治疗的糖尿病视网膜病变患者,观察术后视力恢复情况和术后并发症,分析影响视力预后的因素,探讨术后并发症与并发性疾病等其他因素的关系。结果 98眼患者行玻璃体术后视力提高率为66.33%,术后并发黄斑病变组的视力改善率(55.26%)显著低于无黄斑病变组的视力改善率(73.33%)(P<0.05)。高血压组和糖尿病肾病组的高眼压、新生血管、再出血、黄斑水肿和黄斑前膜的发生率显著高于无高血压组和无糖尿病肾病组(P<0.05)。血糖控制状况良好和较短的糖尿病史可以显著降低高眼压、再出血、黄斑水肿和黄斑前膜的发生率(P<0.05)。高血压组和糖尿病肾病组的高眼压、新生血管、再出血、黄斑水肿和黄斑前膜的发生率显著高于无高血压组和无糖尿病肾病组(P<0.05)。血糖控制状况良好和较短的糖尿病史可以显著降低高眼压、再出血、黄斑水肿和黄斑前膜的发生率(P<0.05)。结论玻璃体切除联合眼内硅油填充术治疗糖尿病视网膜病变可以显著提高患者术后视力,且术后是否并发黄斑病变是影响视力改善的重要因素,术后并发症的发生率与并发性疾病、血糖控制和糖尿病史密切相关。
- 于茜陈少军黄小勇刘勇王一
- 关键词:糖尿病视网膜病变并发症
- α晶体蛋白对LPS诱导视网膜小胶质细胞活化的抑制及TNF—α表达的影响
- 目的:观察α晶体蛋白对脂多糖(LPS)诱导的视网膜小胶质细胞激活数量及TNF—α生物学活性的影响。方法:原代培养视网膜小胶质细胞,并采用 CD11b 细胞免疫荧光及流式细胞仪鉴定纯度,用α晶体蛋白预处理小胶质细胞,再加
- 吴楠王一王艳华刘东宁
- 文献传递
- 角膜溃疡胶原酶潜酶氧化活化的动物实验研究被引量:1
- 1997年
- 目的观察角膜溃疡氧自由基的产生与胶原酶活化的关系。方法以兔角膜溃疡为模型,用SOD+CAT联合滴眼治疗和生理盐水滴眼对照10天后测定角膜组织MDA和胶原酶活性。结果治疗组角膜组织中MDA及胶原酶活性均显著低于对照组,并在角膜组织匀浆上清中加入胶原酶潜酶活化剂(APMA)后,对照组胶原酶活性无变化,而治疗组则显著提高,但总酶活力仍低于对照组。结论在体内氧自由基参与胶原酶潜酶活化;也表明氧自由基的清除可减少释放的胶原酶总量。
- 徐毅王一魏明竟
- 关键词:角膜溃疡胶原酶氧自由基
- α晶状体蛋白对脂多糖诱导的视网膜小胶质细胞增生及TNF-α表达的影响被引量:3
- 2007年
- 目的观察α晶状体蛋白对脂多糖(LPS)诱导的视网膜小胶质细胞增生及肿瘤坏死因子α(TNF-α)生物学活性的影响。方法原代培养视网膜小胶质细胞,并采用CD11b细胞免疫荧光及流式细胞仪鉴定纯度,加入α晶状体蛋白及LPS后,通过MTT(四氮唑蓝比色细胞增生测定)检测α晶状体蛋白对LPS活化的小胶质细胞增生能力的影响,并采用ELISA、RT-PCR检测TNF-α蛋白水平及mRNA水平表达的变化。结果原代培养的小胶质细胞经免疫组织化学鉴定及流式细胞仪鉴定纯度分别达到95.8%和91.4%,经10-4g/Lα晶状体蛋白预处理后,LPS诱导的小胶质细胞增生被抑制(P<0.01);与未处理组比较,TNF-α蛋白质量浓度及mRNA表达量明显降低(P<0.05)。结论α晶状体蛋白可以减少LPS诱导的原代培养视网膜小胶质细胞增生及TNF-α表达。
- 吴楠王艳华王蕊刘东宁王晓芹王一
- 关键词:小胶质细胞脂多糖
- 利用荧光金逆行示踪技术评价视神经不完全损伤后视网膜神经节细胞的存活率被引量:21
- 2005年
- 目的 利用荧光金逆行示踪技术评价正常及视神经不完全损伤后的视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells,RGCs)的数目。 方法 正常成年LongEvans大鼠 2 0只 ,体重(2 70± 2 0 ) g ,雌雄不限。按对照组、损伤后 7d、14d、2 1d分组 ,每组 5只大鼠。在球后视神经钳夹伤前 7d行荧光金逆行标记。 7d后损伤组大鼠用反向血管夹于左眼球后 2mm处夹视神经 10s。对照组大鼠只暴露视神经不行钳夹 ,分别于各时间点将大鼠用 4 %多聚甲醛灌注固定后 ,行全视网膜铺片 ,3h内在荧光显微镜下观察。在每张视网膜的上、下、鼻、颞侧距视盘 1/ 6、1/ 2、5 / 6半径处共拍摄 12张荧光照片。对照片上标记的RGCs进行计数 ,求平均值 ,计算损伤后各时间点剩余的RGCs与正常视网膜中RGCs的百分比。结果 视网膜铺片的RGCs边界清晰 ,并可见明显的细胞突起 ,血管走行区未见节细胞分布。正常组每张铺片的平均节细胞数为 (2 0 31± 2 87)个·mm-2 ,损伤后 7d的RGCs存活率为 71% ,14d存活率为 5 1% ,2 1d存活率为 35 %。结论 荧光金逆行标记是评价视神经损伤后RGCs存活率可靠并且有效的方法。
- 任蕾牛建军王一王仕军曾玉晓刘志敏
- 关键词:荧光金视网膜神经节细胞视神经损伤
- 探通法治疗小儿先天性泪道阻塞46例
- 1998年
- 周继红王一
- 关键词:先天性泪道阻塞
- Avastin应用对增生性糖尿病视网膜病变患者玻璃体手术的前瞻性研究
- 吴楠王一刘玺顾鹏刘娜