牟琴峰 作品数:27 被引量:41 H指数:3 供职机构: 苏州大学附属第三医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 常州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
载脂蛋白M在结直肠癌组织中的表达及其临床病理相关性 被引量:3 2012年 目的探讨载脂蛋白M(apoM)在结直肠癌组织中表达水平的变化及其临床相关性。方法采用荧光定量PCR检测20例结直肠癌组织及其癌旁组织中apoM的mRNA表达:采用免疫组织化学方法检测7例正常肠黏膜、6例肠炎组织、10例肠息肉、20例结直肠癌及其癌旁组织中apoM的蛋白表达水平。结果apoMmRNA在结直肠癌组织和癌旁组织中均有表达.前者相对表达量显著低于后者(0.05±0.01比0.19±0.05,P〈0.05)。无淋巴结转移者apoMmRNA表达水平显著低于有淋巴结转移者(P〈0.01)。结直肠癌组织中apoM蛋白表达中位分值为5.50.显著低于癌旁组织(10.5,P〈0.05)、肠炎组织(9.75,P〈0.05)、肠息肉组织(11.0,P〈0.01)及正常黏膜组织(10.5,P〈0.05)。未见结肠癌组织中apoM蛋白水平与患者临床病理特征有关(P〉0.05)。结论载脂蛋白apoM在肠癌组织中的mRNA及蛋白水平较正常组织及良性病变组织显著降低。结直肠癌组织中apoMmRNA表达水平与淋巴结转移有关。 牟琴峰 罗光华 陈陆俊 魏江 郑璐 张晓膺 徐宁关键词:结直肠肿瘤 载脂蛋白M 荧光定量PCR 免疫组织化学 膜型基质金属蛋白酶-2在肺癌组织中的表达及其临床意义 2012年 本研究旨在检测膜型基质金属蛋白酶-2(MT2-MMP)在肺癌组织中的表达并分析其临床意义。 谢军 陈陆俊 李青 谈炎 牟琴峰 鲁常青关键词:膜型基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶-2 肺癌组织 肾移植受者外周血循环中pp65阳性内皮细胞的新模式 被引量:1 2003年 目的 :为观察感染人类巨细胞病毒 (HumancytomegalovirusHCMV)的 1例女性肾移植受者外周血中膨大内皮细胞 (Cytome galicendothelialcells ,CEC)的一种新模式。方法 :本研究运用了HCMVpp65抗原分析法、实时PCR技术、流式细胞分析法等系列技术。结果 :发现在一围绕并粘附了许多白细胞的蛋白样物质内 ,含有几个pp65阳性的CEC。这种蛋白质样物质的成分和功能目前还不清楚。该患者外周血中出现CEC表明其血管有损伤 ,而且该患者的CD4+ 及CD8+ 淋巴细胞的百分比都超出正常范围。其血浆、外周血白细胞及尿液中的HCMV DNA都阳性 ,但该患者并没有明显的HCMV病症状。结论 :HCMV感染和CEC形成之间的关系需进一步研究。 罗光华 叶青 何小舟 郑璐 董选 朱江 牟琴峰 许贤林 高锦声关键词:肾移植 受者 外周血循环 PP65 内皮细胞 实时PCR 结直肠癌组织中CD_(40) mRNA的表达变化及临床意义 2013年 目的观察结直肠癌组织中CD40mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法应用RT-PCR法分别检测30例结直肠癌及其癌旁组织中CD40mRNA的相对表达量,并分析其表达与结直肠癌患者性别、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期相关性。结果结直肠癌组织中CD40mRNA的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05);结直肠癌组织中CD40mRNA的表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05),与患者性别、浸润深度及远处转移无关(P>0.05)。结论结直肠癌组织中CD40mRNA表达显著降低,并与肿瘤的浸润性生长相关;CD40分子可能成为判断结直肠癌预后的有效指标。 杨晨晨 李忠 吴雨岗 牟琴峰 罗光华 谢海彬关键词:结直肠肿瘤 肾移植受者并发巨细胞病毒感染的相关研究 叶青 何小舟 罗光华 董选 曾文彤 郑璐 朱江 许贤林 牟琴峰 陆亚萍 该课题为了进一步提高肾移植病人术后的长期存活率,调研了国内外相关资料,尚未发现有较成熟的早期诊断和预测肾移植患者发生CMV病的方法,因而进行了该课题研究。该项目所建立的预测肾移植受者并发CMV肺炎的阈值具有很高的灵敏度和...关键词:关键词:肾移植 巨细胞病毒 并发症 ShineRoar探针技术检测单核苷酸多态性 被引量:12 2007年 目的建立一种低成本、高效率、操作简便的单核苷酸多态性(SNP)检测技术。方法采用自行设计的"ShineRoar 探针",结合融解曲线技术检测目的基因 SNP。并根据其工作原理分别对肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)和载脂蛋白 M(apoM)的基因多态性进行检测;同时用 DNA 测序技术鉴定 ShineRoar 探针技术的准确性。结果融解曲线分析结果显示,某一基因的野生型及突变型纯合子分别在2个不同的融解温度出现融解谷。TNFRⅡ基因第6外显子196位突变(ATG→AGG)所产生的 T 和 G 等位基因的融解温度分别为(52.84±0.75)℃和(58.38±0.61)℃;apoM T-778C 突变所产生的 T 和 C 等位基因的融解温度分别为(42.55±0.73)℃和(49.19±0.57)℃。一致性 Kappa 检验显示 ShineRoar 探针技术与 DNA 测序技术的 SNP 检测结果一致(Kappa=1,P=0.000)。结论ShineRoar 探针技术简单、快速、准确,适用于大批量基因分型的研究。 罗光华 郑璐 张晓膺 许国锋 朱江 牟琴峰 魏江 陈陆俊 张俊 徐宁关键词:基因型 载脂蛋白类 游离脂肪酸下调载脂蛋白M的表达及其机制 被引量:1 2013年 游离脂肪酸(FFA)是构成人体的重要成分,参与血脂代谢.研究表明,FFA水平升高可导致外周胰岛素抵抗,而胰岛素抵抗的个体载脂蛋白M(ApoM)水平下降[1].本研究旨在观察FFA水平升高是否会直接下调ApoM并探讨其机制.一、材料和方法大鼠血浆FFA浓度检测、肝脏组织中mRNA的提取、逆转录、实时定量聚合酶链反应和PCR芯片(Qiagen公司)反应严格参照试剂盒说明书操作.大鼠ApoM和内参照基因β-肌动蛋白的引物和探针由上海生工生物工程有限公司合成.统计学分析参照文献[2]. 施媛萍 冯悦华 牟琴峰 张俊 于洋 张晓膺 徐宁 罗光华关键词:载脂蛋白M 游离脂肪酸 实时定量聚合酶链反应 Β-肌动蛋白 APOM 大鼠血浆 Realtime-PCR动态检测巨细胞病毒在肾移植术后的临床应用 被引量:2 2005年 目的探讨巨细胞病毒(C M V)D N A检测在肾移植术后C M V病预防中的作用。方法采用R ealtim e-PC R定量检测肾移植受者外周血白细胞中C M V-D N A,术后4月内每周1次。结果95例患者中有55例检出C M V-D N A阳性(57.9%),初次检出C M V-D N A的平均时间为(25.6±16.3)d,C M V-D N A的平均拷贝数为(1396.4±445.2)/105白细胞。在随访过程中,18例患者的C M V-D N A水平超过警戒线—800copy/105白细胞,经调整免疫抑制剂后,均降至警戒线以下,所需平均时间为(16.3±8.5)d。所有患者均未出现C M V病。结论C M V-D V A检测可用于预防肾移植术后C M V病的发生。 许贤林 叶启发 何小舟 罗光华 朱江 牟琴峰 叶青 董选关键词:肾移植 巨细胞病毒 载脂蛋白M启动子区的一个新单核苷酸多态性位点及其与冠心病易感性的关系 被引量:5 2014年 目的检测载脂蛋白M(apoM)基因启动子区域的单核苷酸多态性(SNP),探讨多态性位点对转录活性的影响以及与冠心病易感性的关系。方法将受试者分为2组:冠心病组,经冠状动脉造影证实1或1支以上血管直径狭窄50%以上者206例,男165例,女41例,平均年龄(61.9±9.2)岁;对照组,冠状动脉造影无病变者209例,男157例,女性52例,平均年龄(60.4±9.1)岁。设计2对引物用以扩增apoM启动子区序列,采用PCR产物直接测序法进行序列分析。比较冠心病组和正常组间各基因型及等位基因频率分布的差异。进一步利用基因重组和定点突变技术体外观察SNP对apoM基因启动子转录活性的影响。结果在apoM启动子区一724位发现1个新的胞嘧啶核苷酸缺失突变(一724delC)。冠心病组-724del等位基因频率高于对照组(8.0%比4.1%,OR:2.054,95%CI1.125~3.749,P:0.017),-724del等位基因携带者血浆apoM的表达水平降低.总胆固醇水平明显高于C/C基因型[(6.04±0.90)mmol/L比(4.95-4-1.00)mmol/L,P〈0.01]。与apoM野生型启动子比较,一724C位点发生缺失突变后,apoM启动子活性明显下降(相对荧光素酶活性比值:1.13±0.25比2.11±0.15,P:0.009)。结论新发现的-724delC缺失突变可降低apoM启动子活性,下调apoM蛋白表达水平,增加冠心病的发病风险。 郑璐 张俊 牟琴峰 张晓膺 罗光华关键词:载脂蛋白类 冠状动脉疾病 实时荧光定量PCR检测人组织因子及其剪切体方法的构建 被引量:2 2011年 目的建立检测人组织因子(flTF)及其剪切体(asTF)的实时荧光定量PCR检测技术。方法分别采用文献报导及自行设计的检测人flTF和asTF的引物及TaqMan探针,经优化反应体系及反应条件后,用于检测人flTF和asTF基因。将扩增的人flTF和asTF的基因片段纯化后分别与pMD19-T载体连接,分别克隆构建含flTF和asTF基因片段的重组质粒,作为实时荧光定量PCR检测flTF和asTF基因表达的标准品。结果 PCR扩增产物分别经测序证实为flTF和asTF的特异性片段。本法检测flTF和asTF基因表达的灵敏度均为40拷贝/μl,线性范围均为4.00×101~4.00×107拷贝/μl,相关系数均为1.000;扩增效率分别为flTF 91.15%,asTF 90.53%,批间变异系数分别为flTF 3.04%~9.31%,asTF 3.01%~9.64%。结论成功建立了检测人flTF和asTF的实时荧光定量PCR方法,且该方法特异性好,灵敏度高。 朱江 陈陆俊 罗光华 牟琴峰 郑璐 徐宁关键词:剪切体 实时荧光定量PCR