牛颜冰
- 作品数:184 被引量:650H指数:12
- 供职机构:山西农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山西省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- RNA沉默在分析植物基因功能方面的研究被引量:5
- 2005年
- RNA沉默是真核生物的一种高度保守的和序列特异的RNA降解系统,它不但是基础生物学领域的研究热点,同时在调节基因表达或研究基因功能方面也是非常有前景的。植物中的转录后基因沉默(PTGS)是RNA沉默的一种形式,通过PTGS能对目标RNA进行特异性降解。对双链RNA(dsRNA)在RNA沉默启动中所起中心作用的认知,形成了几种RNA沉默载体的构建方法,这些方法与基因组资源相结合,通过转基因或非转基因的方法能够快速和高效研究植物的基因功能。
- 牛颜冰郭失迷申林炎雷万钧雷霄飞
- 关键词:RNA沉默基因功能
- 应用RNA沉默技术获取抗黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)转基因烟草被引量:11
- 2011年
- RNA沉默是迄今最为有效的抗病毒策略,利用该策略不但能获得免疫转基因植株,且所得植株不易与其他病毒基因重组或异源包壳、生物安全性较高。将本实验室已构建的携带有烟草花叶病毒(TMV)部分移动蛋白基因(ΔMP)和黄瓜花叶病毒(CMV)部分复制酶基因(ΔRep)反向重复结构的植物表达载体pBIN438-MP-Rep(i/r),用农杆菌浸润法转化普通烟草品种K326,共得196株转化植株,经卡那霉素筛选和PCR检测发现128株为阳性转基因植株;PCR-Southern和RT-PCR分析表明外源基因已整合到烟草基因组并在转录水平上得到表达;ELISA结果显示20.3%的转基因植株对CMV和TMV复合侵染表现免疫性。本结果为利用RNA沉默技术进行植物抗多种病毒育种提供重要数据,为防治其他多种病毒复合侵染提供借鉴。
- 牛颜冰王德富姚敏闫钊由文鑫
- 关键词:RNA沉默黄瓜花叶病毒烟草花叶病毒
- 高效诱导植物RNA沉默的反向重复构件的设计
- 2008年
- RNA沉默(RNA silencing)是真核生物体内普遍保守的、发生在RNA水平的、基于核酸序列同源性相互作用的一种对基因表达的调控机制。通过设计反向重复构建在植物体内产生双链RNA来诱导RNA沉默的方法是一条非常有效的植物抗病毒和功能基因组研究途径。本研究通过两个病毒基因的反向重复构建发展了两种通过小型中间载体设计反向重复构建的方法。其共同特点是构建简易,操作方便,可为通过设计反向重复构建实现植物体内高效持久的RNA沉默提供方法上的参考,促进RNA沉默技术更加广泛深入地应用于植物抗病毒基因工程研究和植物功能基因组研究。
- 牛颜冰青玲王德富姚敏郭失迷郭平毅
- 关键词:RNA沉默抗病毒基因工程
- 半夏miR167及其靶基因响应大豆花叶病毒胁迫的表达
- 2023年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA,在植物逆境及生物胁迫中通过调节靶基因来发挥重要的调控作用。半夏内源miR167是否参与了大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)的胁迫及相互作用关系尚不清楚。本研究利用茎环法扩增半夏内源miR167基因,命名为pt-miR167,采用生物信息学软件对其进行保守性分析,系统进化性分析及靶基因预测。在此基础上,采用qRT-PCR技术检测病毒积累量、miR167及其潜在的靶基因的表达水平,分析miR167及靶基因响应病毒侵染的表达模式。结果表明,病毒积累量在5~15 d时迅速增加,其中10 d时增加最快,随后呈现缓慢上升趋势。病毒侵染后,pt-miR167相比对照组,表达量呈下调,并且在10 d时表达量最低。进化树分析表明,pt-miR167与番茄(Solanum lycopersicum)中的sly-miR167a聚为一族,高度同源。预测的潜在主要靶基因ARF6表达量与pt-miR167表达量呈现正好相反的趋势,其在10 d时表达量达到最高。本研究表明,miRNA167参与了寄主半夏与病毒SMV的相互作用关系,研究结果有助于揭示SMV与寄主半夏之间的相互作用机制,为今后深入研究病毒与植物提供了参考,为半夏生产提供了研究的基础。
- 王晨燕杜江马振男张丽王德富牛颜冰
- 关键词:半夏大豆花叶病毒靶基因
- 一种含牡丹籽油的隔离霜及其制备方法
- 本发明属于化妆品加工技术领域,本发明公开了一种含牡丹籽油的隔离霜及其制备方法。本发明以牡丹籽油、桑叶提取物、蒸馏水等为主要材料,通过混合搅拌的方法制备出一款成分天然,具有美白、保湿、抗氧化防衰老效果的隔离霜,对皮肤具有良...
- 申少斐刘卓欣刘亚君牛颜冰
- 正交法优化黄芩愈伤组织诱导条件
- 2022年
- 药用植物愈伤组织诱导率及生长状态会直接影响其增殖及活性成分积累。为有效提高黄芩愈伤组织的诱导率、优化其生长条件,以黄芩组培苗的根、茎段和叶片为材料,经不同浓度的6-BA、NAA和2,4-D单因素、双因素以及L(933)正交试验处理,以黄芩愈伤组织诱导率和生长状态为评价指标,筛选其最佳外植体和培养基配方。结果发现,在单因素试验中,当6-BA质量浓度为1.0、1.5、2.0 mg/L时,有且只有茎段诱导状态较好,呈淡黄色,分化状态相对较低,最大诱导率可达88%;当NAA质量浓度为0.5、1.0、1.5 mg/L时,同样茎段诱导情况良好,分化较低,增殖快,生物量大,最大诱导率为72%;在2,4-D测试质量浓度范围内,愈伤组织呈乳白色至淡黄色,诱导率大小表现为茎段>根>叶片,且在0.1 mg/L时,茎段有最高诱导率(97%);故选择1.0、1.5、2.0 mg/L的6-BA,0.5、1.0、1.5 mg/L的NAA和0.05、0.15、0.25 mg/L的2,4-D进行双因素和正交试验,并确定茎段为愈伤组织诱导的最佳外植体。在6-BA和NAA组合试验中,发现不同浓度组合均发生分化现象,说明6-BA和NAA组合适合于芽的增殖培养。进一步通过正交试验结果分析,发现适合黄芩茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.25 mg/L 2,4-D,其诱导率高达94.16%,且愈伤组织颜色呈淡黄色,结构疏松,生长状态良好,可用于继代和增殖培养。
- 王玉芬姚东作马海会牛颜冰王德富
- 关键词:黄芩愈伤组织正交试验
- 一种超低高宽比的惯性微流控芯片及其应用
- 本发明公开了一种超低高宽比的惯性微流控芯片及其应用。涉及微流控芯片技术领域。包括大螺旋管道层,高/宽=50μm/900μm;大螺旋管道层包括螺旋形管道和微柱;微柱均匀分布在螺旋形管道中凸出螺旋形管道内壁。本发明通过在螺旋...
- 申少斐赵磊张雅丽白汉洁王德富牛颜冰
- 一种富含黄芪成分的抑菌除臭型中药牙膏及其制备方法
- 本发明公开了一种富含黄芪成分的抑菌除臭型中药牙膏,所述牙膏按重量份数计包括:保湿剂40~60份、摩擦剂20~30份、增稠剂1~3份、发泡剂1~3份、甜味剂0.5~2份、中药提取液1~10份、抑菌剂1~5份、蒸馏水10~2...
- 王德富牛颜冰张学治贾彬良朱静伟崔丽艳李振方吴永娜赵梅梅
- 利用小RNA深度测序技术鉴定半夏病毒病病原被引量:5
- 2018年
- RNA沉默是真核生物体内由病毒来源的干扰小RNA(virus-derived small interfering RNA,vsiRNA)沉默复合物介导目标RNA特异降解的一种保守机制,通过对vsiRNA分析可进行植物病毒病原鉴定。本文利用小RNA深度测序技术对感病半夏叶片进行鉴定,结果发现,表现典型花叶症状的半夏叶片受到大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,Ds MV)、魔芋花叶病毒(Konjac mosaic virus,KoMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)等多种病毒的复合侵染。为明确SMV山西半夏分离物(SMV-SXBX)的进化关系,进行SMV-SXBX全基因组克隆与分析,获得SMV-SXBX全长为9735 nt,编码一个由3 105个氨基酸组成的多聚蛋白质。通过核苷酸与氨基酸序列比对发现,SMVSXBX与半夏分离物P同源性最高,分别为91. 1%和94. 1%,且系统发育分析表明,SMV-SXBX与半夏SMV分离物P聚为一簇。同时,也对vsiRNA进行了系统分析,研究结果有望为半夏SMV的有效防治提供一定科学依据。
- 崔丽艳庞小静齐永红王宝霞王德富牛颜冰
- 关键词:半夏大豆花叶病毒
- 无花丹参叶盘组织培养再生体系的优化选择被引量:1
- 2006年
- 以丹参极品———无花丹参幼嫩叶片为外植体,对丹参的组织培养及植株再生体系进行优化选择,筛选出了能直接诱导芽再生的培养基MS+6-BA及直接诱导生根的培养基1/2MS+IBA。结果表明,该体系与通过愈伤组织获得的再生体系相比,提高了其有效化学成分的含量,为改良丹参品质及产量提供了技术支撑。
- 夏静张大海宋艳波王玉庆牛颜冰
- 关键词:叶盘