潘秀珍
- 作品数：188 被引量：482H指数：12
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金南京军区医学科技创新课题更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- 应用NPCR发现我国Kawasaki型恙虫病立克次体被引量：40
- 1995年
- 本文报告用恙虫病立克次体表面蛋白５６ＫＤａ型特异抗原（ｔｓａ５６ＫＤａ）基因编码区的引物，采用嵌合式聚合酶链反应（ＮＰＣＲ）鉴定江苏地区的２株恙虫病立克次体。结果该２株恙虫病立克次体与Ｇｉｌｌｉａｍ，Ｋａｒｐ，Ｋａｔｏ和Ｋｕｒｏｋｉ型特异引物无任何ＤＮＡ扩增带，而与日本ｋａｗａｓａｋｉ株型特异引物扩增后有５２３ｂｐ的ＤＮＡ扩增带，表明我国存在Ｋａｗａｓａｋｉ型恙虫病立克次体。
- 郭恒彬吴光华唐家琪李先富于明明张云潘秀珍李越希
- 关键词：恙虫病立克次体特异抗原聚合酶链反应
- 2型猪链球菌MocR家族转录调控因子SSU0562基因敲除突变体的构建及毒力分析被引量：2
- 2015年
- 目的:构建2型猪链球菌强毒株05ZYH33中MocR家族转录调控因子SSU0562基因敲除的突变株,探索SSU0562基因缺失对细菌基本生物学特性和毒力的影响。方法:构建左右两侧为SSU0562基因上下游的同源序列,中间部分为壮观霉素抗性基因(Spcr)的基因敲除质粒,通过同源重组的方法筛选SSU0562基因敲除突变株Δ0562。对突变株与野生株的基本生物学特性进行系统的比较分析,并且将小鼠作为动物感染的模型来研究突变株的毒力。结果:组合PCR的分析及基因测序结果均表明Spcr完全取代了S.suis2中SSU0562基因位点,表明基因敲除突变体Δ0562构建成功,反转录PCR(RT-PCR)证实了突变株Δ0562中SSU0562基因在转录水平的缺失;在溶血活性、生长速率及对小鼠的致病力方面,突变株Δ0562与野生株05ZYH33相比均无显著差别,然而革兰染色实验显示突变株Δ0562的成链能力明显减弱。结论:猪链球菌强毒株05ZYH33的毒力并未因SSU0562基因的缺失而发生显著性改变,表明SSU0562基因并非猪链球菌的毒力决定因子,但很有可能参与猪链球菌成链能力的调控。
- 李娟刘丽娜胡丹朱旭辉龚秀芳赵琳钟璟皓潘秀珍王长军
- 关键词：2型猪链球菌
- 猪链球菌2型荚膜唾液酸对细菌毒力和宿主炎症反应的影响被引量：4
- 2012年
- 【目的】阐明猪链球菌2型荚膜唾液酸是否影响细菌毒力以及宿主对其炎症反应应答,为研究猪链球菌2型的致病机制奠定基础。【方法】比较实验菌株对BLAB/c小鼠模型的致病性;通过涂板计数的方法检测实验菌株在小鼠体内的分布;观察小鼠脑组织病理改变,分析实验菌株感染小鼠后中枢神经系统的病变差异;从小鼠体外全血细胞水平,运用ELISA法检测实验菌株感染后细胞炎性因子的分泌水平。【结果】荚膜唾液酸合成基因neuB缺失突变株ΔneuB相比野生株05ZYH33株,对小鼠毒力显著降低,回复突变株cΔneuB毒力回复至野生株水平;野生株和突变株在血液及脑组织中分布具有显著差异,均可致BLAB/c小鼠脑组织不同程度的损伤;与野生株组相比较,细菌/细胞相互作用不同时间点后,突变株组体外刺激小鼠全血细胞分泌MCP-1、IL-6的水平显著提高;【结论】荚膜唾液酸影响细菌的毒力及宿主细胞对其的炎症反应应答,它是猪链球菌2型穿透血脑屏障导致脑膜炎的重要毒力因子。
- 石洁胡丹朱静张先云侯田青郭静静潘秀珍李先富王长军
- 关键词：猪链球菌2型荚膜唾液酸毒力
- 信号肽与猪链球菌GDH融合的DNA疫苗构建及体液免疫研究被引量：4
- 2008年
- 目的设计、构建猪链球菌GDH真核表达载体并研究DNA疫苗免疫小鼠的体液免疫。方法在猪链球菌保护性抗原GDH基因5′末端引入人IL-2信号肽序列,通过PCR进行拼接,得到的融合DNA片段经过酶切克隆入质粒pcDNA3.0,构建核酸疫苗重组质粒pcDNA3.0-gdh。通过肌肉注射途径将重组质粒pcDNA3.0-gdh免疫小鼠,经ELASA实验和Western blot进行检验。结果构建的表达载体在小鼠体内表达出正确的目的蛋白,能诱导体液免疫。结论构建的DNA疫苗能够引起体液免疫,为研究猪链球菌核酸疫苗提供分子工具。
- 潘秀珍赵华梅葛俊超王长军郑峰李先富唐家琪
- 关键词：猪链球菌DNA疫苗信号肽
- 猪链球菌2型组氨酸三聚体蛋白原核表达被引量：4
- 2009年
- 目的鉴定猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype2,S.suis2)组氨酸三聚体蛋白(Histidine Triad Pro-tein,HTP),并研究该蛋白的免疫原性,为研究S.suis2保护性疫苗奠定实验基础。方法通过与相关家族蛋白进行同源性比较,在猪链球菌Z型05ZYH33全基因组序列中发现了编码HTP的基因。设计合成引物,进行PCR扩增,并将目的片段克隆到表达载体pET28a,表达并纯化出目的蛋白,通过蛋白印迹(Western blot)检测其免疫原性。结果PCR扩增出约2.7kb的片段,并成功表达分子量在110KD左右的目的蛋白。通过His-Tag亲和层析,获得纯度较高的融合蛋白。Western blot检测结果表明,该表达产物具有免疫原性。结论S.suis2中国强毒株中存在HTP,并具有良好免疫原性,可作为S.suis2免疫保护性疫苗候选分子。
- 邵珠卿韩明月葛俊超王长军潘秀珍唐家琪
- 关键词：猪链球菌2型克隆
- S.suis 2溶血素SLY的分子克隆及溶血活性和免疫学特性研究被引量：1
- 2014年
- 目的克隆并表达猪链球菌2型(S.suis 2)溶血素重组蛋白SLY,对其溶血活性及免疫学特性进行研究,为探讨SLY在S.suis 2感染中的致病机理及筛选有效的疫苗预防和控制猪链球菌病奠定基础。方法对S.suis2 05ZYH33全基因序列进行生物信息学分析,构建pET32a-sly原核表达质粒并诱导表达出S.suis 2重组溶血素SLY蛋白;采用高浓度尿素裂解包涵体和His-Tag亲和层析对重组SLY蛋白进行纯化并复性;免疫保护实验检验SLY的免疫保护作用。结果 SDS-PAGE显示70kD的SLY蛋白条带;重组SLY蛋白具有溶血活性并受多种因素的影响;SLY对感染S.suis 2的Balb/c小鼠有一定的免疫保护作用。结论优化原核表达体系可以有效提高SLY蛋白的表达量,经提纯并复性的重组SLY具有较高的溶血价,为进一步纯化及分析SLY蛋白的特性提供了必要的前提。
- 孙雯潘秀珍
- 关键词：包涵体溶血活性
- 高致病性猪链球菌2型多重实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：9
- 2012年
- 目的建立对高致病性猪链球菌2型毒力基因SalK、virB4-89K、cps2J同步检测的多重实时荧光定量PCR检测方法。方法根据SalK、virB4-89K、cps2J基因保守区域设计并合成3对引物及其探针;通过反应体系和扩增条件优化,建立快速鉴定高致病性猪链球菌2型的方法,并对方法的特异性、敏感性、重复性指标进行评估。结果反应体系具有良好的扩增效率,全部扩增检测可在60min内完成。SalK、virB4-89K、cps2J基因检测灵敏度分别为19cfu/ml、27cfu/ml和32cfu/ml。重复性试验中变异系数均小于3%。用该方法考核33株猪链球菌,包括1/2型、1型、3型至33型,以及9株常见对照菌株,仅猪链球菌1/2型检测到cps2J基因荧光信号增强。对疫情现场获得的SS2感染者血液进行检测,3个基因均阳性。结论建立的多重实时荧光定量PCR方法可快速检测高致病性猪链球菌2型,并能鉴定是否含有89K毒力岛基因SalK、virB4-89K,具有敏感、特异、重复性好的特点。
- 朱静张锦海胡丹石洁张先云李先富潘秀珍王长军
- 关键词：猪链球菌2型
- 肝炎病人中不同基因型TTV的检出及序列分析被引量：2
- 2001年
- 目的 了解TTV在肝炎病人中的感染率及基因型别。方法 采用半套式PCR方法 ,对 72例不同型别的肝炎病人血清进行TTVDNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果 在 72例不同肝炎病人中 ,共检出39例TTVDNA阳性血清 ,总检出率为 5 4 16 %。其中在非甲 庚型肝炎病人中TTVDNA阳性率为 87 5 % ,而在明确诊断为甲 庚型肝炎病人中TTVDNA阳性率为 5 0 % ,两组相比差异显著 (χ2 =4 0 2 78,P <0 0 5 )。测序的 6个分离株相互间的核酸同源性为 6 0 4%～ 93 2 % ,氨基酸的同源性为 5 4 1%～97 3%。这 6个分离株与 9个G1、G2代表株核酸的同源性为6 0 4%～ 99 1% ,氨基酸的同源性为 5 5 4%～ 98 6 %。经系统发育分析表明这 6株TTV可分属于G1、G2两个基因型的 4个亚型。结论 非甲 庚型肝炎病人的TTV感染率明显高于明确病原的甲 庚型肝炎病人。TTV感染与肝炎有关 ,可能是非甲 庚型肝炎的病原之一。检出的TTV至少可分属于G1、G2两个基因型中的
- 潘秀珍单祥年唐家琪李先富郭恒彬
- 关键词：TT病毒病毒性肝炎
- 献血员、肝炎患者TTV DNA检测及部分TTV基因序列分析
- 2001年
- 目的 :了解献血员、肝炎患者中的输血传递病毒 (TTV)感染状况及基因型别。 方法 :设计合成引物采用半套式聚合酶链反应 (hem i- nest PCR)方法 ,对 195份献血员血清、72份不同型别的肝炎患者血清进行了 TTV DNA的 PCR检测 ,并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。 结果 :1在血清丙氨酸转氨酶 (AL T)异常 ,HBs Ag及抗 HCV阴性的 99份献血员血清标本中 ,检出 TTV DNA阳性标本 36份 ,阳性检出率为 36 .3% ;而在 A L T正常的96份献血员血清标本中 ,检出 TTV DNA阳性标本 16份 ,阳性检出率为 16 .6 % ,明显低于 A L T异常献血者。 2在72例不同肝炎患者中 ,共检出 39例 TTV DNA阳性血清 ,总检出率为 5 4.16 % ,在非甲 -非庚型肝炎患者中 TTVDNA阳性率为 87.5 % ,而在明确诊断为甲 -庚型肝炎的患者中 TTV DNA阳性率为 5 0 % ,两组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。对 8株阳性株序列分析结果显示 ,测序的 8个分离株与 9个 G1、G2代表株核酸的同源性为 6 0 .4%～99.1% ,氨基酸的同源性为 5 5 .4%～ 98.6 %。经系统发育分析表明 ,这 8个 TTV分离株中有 7株可分属于 G1、G2两个基因型的 5个亚型 ,而另 1株为 G1型的新亚型。 结论 :1献血者中存在 TTV感染 ,提示 TTV可以导致感染个体的肝功能异常 ,TTV可能与
- 潘秀珍唐家琪单祥年李先富郭恒彬陶庆杨志国
- 关键词：TT病毒献血员肝炎聚合酶链反应
- ^（60）Coγ射线照射对ABO血型单克隆抗体试剂稳定性的影响
- 1996年
- ^（６０）Ｃｏγ射线照射对ＡＢＯ血型单克隆抗体试剂稳定性的影响潘秀珍，唐家琪，季先富（南京军区军事医学研究所，南京２１０００２）关键词ＡＢＯ血型，单克隆抗体，^（６０）ＣＯ，γ射线在制备ＡＢＯ血型单克隆抗体（ＭｃＡｂ）试剂的实践中发现，个别批次试剂的效...
- 潘秀珍唐家琪季先富
- 关键词：ABO血型Γ射线
