温乐英
- 作品数：72 被引量：775H指数：16
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 在我国流行的脊髓灰质炎中发现脊灰病毒Ⅰ型自然重组株被引量：7
- 1993年
- 脊髓灰质炎病毒(PV)是引起脊髓灰质炎的最主要的病毒。我们在研究PV1野毒株的分子流行病学时,发现了一株PV1自然重组病毒。用Sabin 1特异PCR检定该毒株基因组2505～2601区段,或用两个Sabin 1特异RNA探针分别打点杂交检定641～740和2502～2575区段时,推断它可能为野毒株;而测定VP1/2A连接区段3296～3445序列时,又表明它为疫苗株。向5′端扩大测序,从3262起的5′侧有与我国PV1野毒株相同的许多核苷酸取代,证明它为野毒株和疫苗株的重组病毒,重组位点为3262/3263。实验中建立了检测该重组病毒的特异的PCR方法。检测我国10个省市、自治区47份PV1分离株中,5个省区14份麻痹病例由重组病毒感染引起。这些重组株在我们测序的3155～3445区段序列彼此几乎相同(同源性≥96.7％),推断它们可能是某病儿受野毒株、疫苗株双重感染产生重组病毒后的子代病毒。有关该重组病毒的毒力、免疫原性、传播性等正在进一步研究中。
- 方肇寅O.Kew任斌郑渡平温乐英杨辰夫苏锦陈美光郑焕英孟宪坤张振国刘复林H.Yoshikura
- 关键词：脊髓灰质炎病毒重组病毒
- 成人腹泻轮状病毒蛋白的免疫印迹分析
- 1993年
- 我们从腹泻病人便样中纯化了病毒,其结构蛋白组分按分子量大小分别为VP1(136K),VP2(113K),VP3(92K),VP4(84K),VP5(64K),VP6(47K),VP7(41K)。所有这些蛋白皆具有抗原性。WP6是B组轮状病毒的共同抗原。B组轮状病毒的每一结构蛋白与A组轮状病毒都无交叉免疫反应。另外注意到二例不同病人对VP6和VP7刺激产生的抗体水平不同。
- 方肇寅温乐英R.Glass
- 关键词：轮状病毒免疫印迹病毒蛋白腹泻
- 人轮状病毒非复制型重组腺病毒粘膜免疫效果的研究
- 我们在用非复制型腺病毒载体成功制备含有人轮状病毒VP7、VP6基因重组腺病毒的基础上,利用小鼠为实验模型,通过灌胃和滴鼻两种免疫途径对其粘膜免疫的效果进行了研究。为较全面了解非复制型重组腺病毒免疫小鼠后,粘膜免疫产生的情...
- 何金生王健伟姜秀丽王大燕温乐英董京芳屈建国洪涛
- 文献传递
- 从人分离出两株甲型流感H9N2亚型毒株内部基因特性的研究被引量：6
- 2003年
- 目的 了解 2株从人分离出的H9N2亚型毒株内部基因特性 ,并弄清其来源。方法 用RT PCR扩增目的基因 ,用PGEM T Vector (美国Promega公司 ) ,4℃过夜连接 ,重组质粒转入dH5α细菌 ,筛选阳性菌落 ,酶切鉴定 ,送六合通公司自动测序。然后进行进化树分析。结果 2株测定毒株内部基因均为G9基因系 ,它们相互间除PA基因有差异外 ,其余 5个基因均相同。结论 2株测定毒株的基因组均为G9基因系 ,它们是由携带不同基因特性H9N2毒株的禽群分别直接感染人 。
- 郭元吉温乐英王敏郭俊峰张烨李梓
- 关键词：流感病毒A型H9N2亚型RT-PCR禽流感病毒
- 中国人感染H5N1亚型高致病性禽流感病例病毒分离培养探讨
- 2009年
- 目的分析中国大陆人感染H5N1高致病性禽流感病例标本采集和病毒分离培养之间的关系。方法对2005年10月至2009年3月中国大陆人感染H5N1高致病性禽流感病例标本进行病毒分离培养。结果标本采集时间主要集中在发病后的0-14d，其中0-7d采样的标本阳性率分布相对集中，病毒分离的效果要更加显著；标本采集类型主要为呼吸道标本，其中下呼吸道标本的病毒分离阳性率分布较集中，病毒分离效果也更明显。结论人禽流感病例标本采集时间及标本的采集类型对病毒分离有一定的影响，应在发病的急性期侧重于采集下呼吸道标本，这样利于提高病毒分离的阳性率。
- 邹淑梅张烨李梓董婕赵新生董丽波温乐英徐翠玲王敏郭俊峰隗合江高荣宝王秀平舒跃龙
- 关键词：流感病毒A型病毒培养
- 轮状病毒蛋白的研究进展被引量：13
- 1996年
- 轮状病毒是传染性胃肠炎的重要病原，完整病毒颗粒有三层蛋白壳（Ｃａｐｓｉｄ）．本文简要综述组成病毒颗粒的六个结构蛋白（ＶＰ，ｖｉｒａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ）和另外五个病毒复制过程中需要的非结构蛋白（ＮＳＰ，ｎｏｎ－ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ）的生化特性及功能的研究进展。
- 温乐英
- 关键词：轮状病毒人体病毒学病毒蛋白
- 5型腺病毒载体的改建被引量：2
- 1999年
- 腺病毒载体是一个良好的真核表达载体，已有多种外源基因在５型腺病毒载体得到表达。病毒学研究所形态室八十年代中期从国外引进了Ｅ３区缺失的５型腺病毒载体，并应用该载体表达了Ｂ组轮状病毒第５基因和乙型肝炎表面抗原基因，在使用过程中发现该载体有以下缺点，１．载...
- 石长信周伟温乐英洪涛
- 关键词：腺病毒Β-半乳糖苷酶
- 多重RT-PCR结合反向杂交技术检测多种流感病毒方法的研究
- 2010年
- 目的 建立一种基于多重RT-PCR结合反向斑点杂交技术的多种流感病毒核酸快速检测方法.方法 对5种亚型流感病毒的HA基因序列进行比对分析,选择合适的保守区域设计引物序列,并在扩增产物序列内部选择高变区设计探针序列.首先,使用生物素标记的引物扩增出同样带标记的PCR产物;然后,产物与膜上的探针杂交,通过生物素-亲和素反应,最后以斑点显色的方式来检测和鉴别不同亚型的流感病毒.实验中还通过摸索不同的引物浓度和探针浓度来优化反应条件.结果 成功建立了一种基于多重RT-PCR结合反向斑点杂交技术的检测方法,该方法能够成功检测和鉴别5种不同亚型的流感病毒,检测灵敏度比传统的RT-PCR方法高100～1000倍.结论 成功建立了一种可高通量快速检测多种流感病毒的多重RT-PCR结合反向斑点杂交技术的检测方法.
- 杨亮张晓梅张晓光马晶王敏温乐英王大燕白天舒跃龙钱永华曾毅
- 关键词：聚合酶链反应杂交流感
- 用大引物PCR法获得轮状病毒VP4基因的突变体被引量：1
- 2002年
- 目的 对A组轮状病毒主要结构抗原VP4基因中PacⅠ的识别序列进行无义突变以便于用腺病毒Ad Easy载体系统进行表达。方法 采用大引物PCR方法 ,通过 3条引物 ,两轮PCR反应 ,获得VP4基因的突变体 ,并经核酸序列分析证实。结果 PacⅠ识别的 8个碱基序列TTAAT TAA ,突变为CTGATCAA。结论 大引物PCR是对核酸进行突变的一种简便。
- 何金生王健伟董京芳温乐英洪涛
- 关键词：聚合酶链反应轮状病毒属VP4基因突变体
- 一种快速构建重组腺病毒的简便方法被引量：4
- 2002年
- 目的 对腺病毒AdEasy载体系统进行方法改良 ,使之成为能被一般实验室采用的快速构建重组腺病毒的系统。方法 用插入有G1VP7基因和绿色荧光蛋白的穿梭载体pAdTrackCMV与腺病毒骨架载体pAdEasy 1共转化E .coliBJ5 183并进行同源重组 ,获得重组腺病毒质粒 ,经PacⅠ线性化后 ,转染 2 93细胞。为便于操作 ,对AdEasy载体系统的某些操作过程进行了适当改进。结果 得到重组腺病毒rvAdG1VP7(G)。转染重组腺病毒DNA的 2 93细胞出现细胞病变 ,经PCR对传代的rvAdG1VP7(G)分析证实 ,有特异性的G1VP7基因整合 ,荧光显微镜能观察到 2 93细胞内有绿色荧光。结论 腺病毒AdEasy载体系统是一种较为简便、快速的构建重组腺病毒的好方法 。
- 何金生王健伟温乐英洪涛
- 关键词：腺病毒科轮状病毒
