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盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法: 本发明涉及一种盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法。在农业生产过程中，由于过量使用肥料导致农产品及农业土壤营养积累，造成土壤次生盐渍化，为农业土壤生态安全及农业可持续发展带来一定问题。本发明在专用液体发酵培养基中培养耐盐微...; 孙晓宇陈锐李玥赵玲侠瞿佳沈卫荣; 文献传递

定边盐碱土壤嗜盐菌的分离及鉴定: 2015年; [目的]从陕西定边盐湖高渗极端环境中筛选分离获得嗜盐微生物,并对筛选获得的微生物进行种属鉴定.[方法]通过高盐选择性培养基平板分离法,从陕西定边盐湖土壤样品中,分离筛选获得极端嗜盐菌株,该菌最适生长温度35℃,最适pH值8.0.通过传统的表型特征（包括形态学观察、生长因子试验、生理生化特征）和系统发育学16S rDNA序列分析鉴定嗜盐菌株的分类学地位＆quot;结果]获得一株最适生长盐浓度在10％～20％的细菌菌株A426,初步鉴定其为盐单胞菌科（Halomonadaceae）盐单胞菌属（Hdomonas）菌株.[结论]成功获得定边盐湖地区中度嗜盐菌株A426.; 孙晓宇陈锐李玥路鹏鹏门欣韩丽萍黄继红沈卫荣; 关键词：嗜盐菌极端微生物盐单胞菌

人源溶菌酶基因在杆状病毒系统中的表达: 2012年; 目的在杆状病毒系统中表达人源溶菌酶(Human lysozyme,hLY)基因,为其临床应用和大规模生产奠定基础。方法将人工合成的含信号肽和不含信号肽的溶菌酶基因克隆至重组杆状病毒表达系统的载体中,构建重组穿梭质粒,转染sf9细胞,SDS-PAGE和Western blot验证蛋白的表达,溶菌试验验证表达产物的溶菌酶活性。结果重组克隆质粒PFastBacHTA-signal-lysozyme和PFastBac HTA-lysozyme的PCR产物分别可见444和393 bp的目的基因条带,测序结果证实重组克隆质粒构建正确。PCR结果显示Lysozyme-1、Lysozyme-2、slysozyme-1、slysozyme-2、slysozyme-3、slysozyme-4号重组穿梭质粒可扩增出目的条带。sf9-PHLY和sf9-PHSLY的表达产物经12%SDS-PAGE分析,分别可见相对分子质量约17 500和19 300的特异蛋白条带;表达的两种重组蛋白均可与鼠抗6×His单抗特异性结合;表达产物具有溶菌酶活性。结论成功在杆状病毒表达系统中表达了hLY基因,为其临床应用和大规模生产奠定了基础。; 陈锐孙晓宇万一门欣路鹏鹏李玥沈卫荣; 关键词：溶菌酶杆状病毒基因表达

一种根结线虫生防菌剂及其生产工艺: 本发明属于农业虫害生物防治领域，具体涉及一种根结线虫生物防治微生物菌剂及其生产工艺。本发明要克服现有技术存在防治效果不理想、专一性差、防效时间短和污染大的问题。本发明的技术解决方案是：一种根结线虫生防菌剂，由下述重量份数...; 沈卫荣韩丽萍孙晓宇路鹏鹏沈俭陈志杰门欣李玥; 文献传递

莽草酸产生菌的筛选及发酵条件初步优化被引量：3: 2010年; 利用对羟基苯甲醛比色法测定莽草酸含量,从130株细菌中株筛选获得一株莽草酸的产生菌E.coliA44102。菌种在三角瓶中发酵最适条件为:装液量50 ml/300 ml,接种量2%(v/v),初始pH值7.0,摇床转速200 r/min,温度35℃,发酵时间48 h。在此条件下莽草酸含量达到3.43 g/l。; 孙晓宇韩丽萍沈卫荣李玥路鹏鹏门欣; 关键词：对羟基苯甲醛分光光度法莽草酸

一种基于抗菌肽的双功能融合蛋白及其制备方法和用途: 本发明公开了一种基于抗菌肽的双功能融合蛋白及其制备方法和用途，所述的基于抗菌肽的双功能融合蛋白，是基于天蚕素B蛋白序列和人表皮生长因子的融合蛋白，并将其连接蛋白特别设计为凝血酶能够识别的位点，并且在融合蛋白上构建纯化的H...; 万一韩丽萍沈卫荣张月娟孙晓宇张琨李玥

一种基于抗菌肽的双功能融合蛋白及其制备方法和用途: 本发明公开了一种基于抗菌肽的双功能融合蛋白及其制备方法和用途，所述的基于抗菌肽的双功能融合蛋白，是基于天蚕素B蛋白序列和人表皮生长因子的融合蛋白，并将其连接蛋白特别设计为凝血酶能够识别的位点，并且在融合蛋白上构建纯化的H...; 万一韩丽萍沈卫荣张月娟孙晓宇张琨李玥; 文献传递

嗜盐枝芽孢菌A355的分离及种属鉴定: 2012年; 通过高盐选择性培养基平板分离法,从陕西定边盐湖土壤样品中分离筛选极端嗜盐菌株,并通过传统的表型特征(包括形态学观察、生长因子实验、生理生化特征)和系统发育学16S rDNA序列分析鉴定嗜盐菌株的分类学地位。结果表明,分离筛选出1株最适生长盐浓度在10%-15%的细菌菌株A355,初步鉴定其为中度嗜盐菌,属于厚壁菌门(Firmicutes)芽孢杆菌科(Bacillaceae)枝芽孢菌属(Virgibacillus salarius sp.)。; 陈锐李玥孙晓宇路鹏鹏门欣韩丽萍沈俭黄继红沈卫荣; 关键词：嗜盐菌极端微生物

陕西定边盐湖嗜盐菌A393的分离及其种属鉴定被引量：4: 2012年; 采用高盐选择性培养基和稀释平板法,从陕西定边盐湖土壤样本中,分离筛选获得嗜盐菌株A393,通过形态学观察、生理生化特征和系统发育学16S rDNA序列分析鉴定嗜盐菌株A393分类学地位。获得的A393最适生产盐浓度在8%～20%。表型特征和16S rDNA序列分析结果初步鉴定其为中度嗜盐菌,属于海球菌属(Marinococcus sp.)菌株。; 陈锐李玥韩丽萍沈俭孙晓宇路鹏鹏门欣黄继红沈卫荣; 关键词：嗜盐菌极端微生物

天蚕素B和表皮生长因子融合蛋白的原核表达、纯化与发酵被引量：2: 2009年; 目的原核表达天蚕素B和表皮生长因子融合蛋白,并进行纯化和发酵。方法全基因合成带有凝血酶切割位点的天蚕素B和表皮生长因子融合基因,克隆入pET22b(+)-X表达载体中,构建重组质粒pET22b-CecropinB-EGF,分别转化大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta-gami2(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE及Westernblot分析。镍离子亲和层析纯化融合蛋白并复性后,对其促表皮生长活性进行测定,最后在5L发酵罐中进行发酵。结果酶切及测序结果显示,融合蛋白基因已克隆入pET22b(+)-X表达载体中;SDS-PAGE分析显示,天蚕素B和表皮生长因子融合蛋白在Rosetta-gami2(DE3)宿主菌中得到了有效表达,表达量约占全菌总蛋白的30%;Westernblot分析显示,表达产物可与表皮生长因子单克隆抗体特异结合;融合蛋白的表达形式为包涵体;纯化、复性后的融合蛋白具有促BALB/c3T3细胞生长的活性,在5L发酵罐中进行发酵,1次可收获菌体约60g。结论已成功地在大肠杆菌Rosetta-gami2(DE3)中表达了天蚕素B和表皮生长因子融合蛋白,为研究具有抗菌和促伤口愈合的双功能药物奠定了基础。; 万一沈卫荣韩丽萍王小霞李玥张月娟孙晓宇陈锐沈俭; 关键词：天蚕素B 表皮生长因子融合蛋白原核表达发酵

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李玥