李凌云
- 作品数：23 被引量：13H指数：3
- 供职机构：深圳大学更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- Syntabulin诱发线粒体在微管上融合
- 李凌云薛秀芬王晓红买制刚李世和易俊波许进英陈龙苏庆宁
- 关键词：线粒体微管
- 新型钠肽、制备方法及其在制备基因工程药物中的应用
- 本发明公开了一种新型钠肽，该新型钠肽由脑钠肽和蛇钠肽连接组成；脑钠肽位于所述新型钠肽的N端，且蛇钠肽位于新型钠肽的C端；其中，脑钠肽包括由两个半胱氨酸残基形成的二硫键环状结构。其制备方法包括：获取脑钠肽基因和蛇钠肽基因，...
- 李凌云周兆平王晓红章刚林枫
- 文献传递
- 弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析被引量：2
- 2012年
- 目的制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析。方法根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET KDO中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析。结果从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白。结论运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白。
- 易俊波王晓红买制刚章刚李凌云林枫
- 关键词：刚地弓形虫免疫印迹
- HER-2/neu基因探针的制备及特异性分析
- 2008年
- 目的筛选、制备乳腺癌标志基因——HER-2/neu的标记探针,利用间接荧光原位杂交(FISH)技术,探索其临床应用价值。方法通过文库构建、多级筛选、PCR鉴定、序列分析等技术获得HER-2/neu基因组片段,缺口转移法制备生物素标记探针,与生物素-亲和素放大系统和多种荧光显色系统组合,针对病理标本、细胞涂片进行间接FISH检测。结果制备的HER-2/neu基因探针可以特异性地检测乳腺癌阳性、胃癌阳性病理片,也可以特异性检测阳性、阴性细胞标本,并与不同的荧光显色系统结合使杂交信号可以选择性地呈现绿色或红色荧光。结论高特异性的HER-2/neu基因探针和灵活的显色系统为FISH的临床应用奠定了基础。
- 李凌云卢海蓉易俊波林枫
- 关键词：HER-2/NEU基因荧光原位杂交
- 基于可感染病毒颗粒型抗体重链库/轻链库的抗体筛选和制备方法
- 本发明涉及新型抗体筛选方法，该方法包括抗体库构建步骤：构建可感染病毒颗粒型抗体重链库和可感染病毒颗粒型抗体轻链库；第一筛选步骤：利用可感染病毒颗粒型抗体重链库和可感染病毒颗粒型抗体轻链库感染动物细胞，采用特异性抗原筛选被...
- 李凌云周兆平雷明军易俊波苏庆宁
- 文献传递
- 登革病毒的PCR检测方法
- 本发明公开了一种登革病毒的PCR检测方法，首先从待检测样本中提取登革病毒基因组RNA并纯化，然后基于登革病毒的四种病毒毒株的5’‑UTR共有一致性序列，设计用于逆转录的特异性环状引物，并构建特异性逆转录环状引物，其中，所...
- 李凌云代函鹰周兆平王晓红
- 顶空毛细管气相色谱法测定重组人心钠肽中残留乙腈被引量：3
- 2009年
- 目的:建立重组人心钠肽中残留溶剂乙腈的气相色谱分离测定方法。方法:采用DB-624弹性石英毛细管色谱柱(30m×0.32mm,1.8μm),载气为氮气,氢火焰离子化检测器FID,进样口温度为250℃;检测器温度为250℃;柱温为40℃保持8min。分流比10∶1,水为溶剂,乙醇为内标物。结果:使用该方法被测物乙腈能得到良好的分离与测定,峰面积与浓度呈良好的线性关系,精密度良好。结论:方法准确可靠,可用于重组人心钠肽药品中有机溶剂残留量的检测。
- 易俊波买制刚邱岗峰李凌云周兆平林枫
- 关键词：顶空进样法毛细管气相色谱法乙腈
- Syntabulin诱发线粒体在微管上融合
- 细胞中的线粒体处于经常运动、分裂与融合的活动状态。线粒体的不断分裂与融合确保了线粒体之间DNA的混合从而保证了线粒体代谢功能的正常运转。线粒体的融合是由一组dynamin类GTP酶所调节的,到目前为止的研究表明,这类分子...
- 李凌云薛秀芬王晓红买制刚李世和易俊波许进英陈龙苏庆宁
- 关键词：线粒体微管
- 文献传递
- 单纯疱疹病毒II型糖蛋白G主要抗原表位的表达和抗原性检测
- 2007年
- 利用PCR拼接技术，合成含单纯疱疹病毒II型糖蛋白G（gG2）抗原表位（氨基酸序列第561～578位）的片段，并进一步利用基因工程技术获得该表位的双拷贝片段，克隆入pET—KDO表达载体进行原核表达。经IPTG诱导后，高效表达出分子量大小约为39kDa的融合蛋白，经Western blot检测具有良好的抗原性。表达的融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析纯化，得到双拷贝gG2（561～578aa）目的蛋白，经ELISA检测具有良好的灵敏度和特异性。该重组抗原的构建和表达可用于HSV-2特异性血清学诊断的研究。
- 王晓红卢海蓉章刚陈少娟黄德新李凌云林枫
- 关键词：抗原表位
- 梅毒螺旋体重复蛋白K的克隆表达被引量：1
- 2008年
- 目的体外克隆并表达梅毒螺旋体重复蛋白K,为制备预防性疫苗奠定基础。方法利用PCR反应及基因重组技术,扩增重复蛋白K编码基因,构建重组质粒pET28b㈩/TprK,IPTG诱导表达。结果PCR法扩增出了1350bp的目的片段,原核表达质粒pET28b㈩/TprK酶切鉴定正确,测序结果与Gengbank上公布的该基因序列完全一致,并可在大肠杆菌中高效表达。结论成功构建人pET28b㈩/TprK原核表达载体,并能高效表达TprK蛋白,为梅毒的预防性疫苗的制备以及进一步研究其血清学诊断试剂奠定了基础。
- 向华国熊礼宽王晓红李凌云周亚红
- 关键词：梅毒螺旋体聚合酶链反应基因克隆基因表达
